怎樣確定ELISA樣品的稀釋倍數

ELISA樣品的稀釋倍數確定方法：

首先你要明確你要測的樣品的表達情況,如果低的話那你就得可以先用一兩個孔,把你的樣品原液稀釋為一倍,五倍,做個預實驗不用去測熒光表達,在加完終止液后直接觀察顏色加好,然后確定你樣品檢測時的濃度.如果樣品中要檢測物質的表達較高,那么預實驗室時可以適當的多稀釋一下,五倍,十倍,十五倍,最多二十就差不多了.不過呢,在最終確定濃度時并不一定就是以上西式的濃度,可以去他們之間的數值的.

ELISA體系是之前實驗人員建立的，標準曲線采用軟件進行四參數擬合，舉例如圖。
又想了想出現上述情況可能的原因：
1、樣品稀釋
2、從低濃度到高濃度加樣，不換槍頭
3、標準曲線的形狀。落在高吸光值區間，稍一點偏差對結果影響就很大。因此在稀釋倍數準確的情況下，落在標準曲線變化急劇區域數據更準確。即吸光值小的部分結果準確。
1、2現在基本可以排除。這兩次進行了自認為非常充分的稀釋過程。之前加樣也是低濃度到高濃度不換槍頭。所以，3的可能性比較大。