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  • 發布時間:2021-06-03 21:21 原文鏈接: 新手養細胞注意事項

    1.冷凍管應如何解凍?
    取出冷凍管后,須立即放入 37 ℃ 水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管的爆裂。

    2.細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除 DMSO?
    除少數特別注明對 DMSO 敏感的細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有 10~15 ml 新鮮培養基的培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除 DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。
     
    3.可否使用與原先培養條件不同的培養基?
    不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基,若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。

    4.可否使用與原先培養條件不同的血清種類?
    不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生JI大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

    5.何謂 FBS,FCS,CS,HS?
    FBS (fetal bovine serum) 和 FCS (fetal calf serum) 是相同的意思,兩者都是指胎牛血清, FCS 是錯誤的使用字眼,請不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS ( 則是指馬血清。

    6.培養細胞時應使用 5% 或 10% CO2?或根本沒有影響?
    一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為 pH 的緩沖系統,而培養基中 NaHCO3 的含量將決定細胞培養時應使用的 CO2 濃度。當培養基中 NaHCO3 含量為每公升 3.7 g 時,細胞培養時應使用 10% CO2;當培養基中 NaHCO3 為每公升 1.5 g 時,則應使用 5% CO2 培養細胞。

    7.何時須更換培養基?培養基中是否須添加抗生素?
    視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養基即可。
    除于特殊篩選系統中外,一般正常培養狀態下,培養基中不應添加任何抗生素。
    一 ℃ 16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽 vapor phase 長期儲存。




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