樣本放置時間對部分免疫項目測定結果的影響

目前免疫檢測市場規模在逐年遞增，而化學發光作為免疫檢測中靈敏度更高，結果更精準的技術，正在不斷的向二級以下醫院市場普及。但由于樣本量的限制，部分用戶經常出現3-7天才開機一次上樣本的情況。而目前大量二級以下醫院對于影響檢測結果的關注點僅僅停留在內源性干擾上，而對于樣本前處理，樣本放置時間等外源性干擾關注度并不高，本文旨在討論樣本放置時間對于部分項目測定結果的影響。

NSE（神經原特異性烯醇化酶）

神經元特異性烯醇化酶(NSE)：血清NSE是神經元和神經內分泌細胞所特有的一種酸性蛋白酶，神經內分泌腫瘤的特異性標志，如神經母細胞瘤、甲狀腺髓質癌和小細胞肺癌(70%升高)，可用于鑒別診斷、病情監測、療效評價和復發預報。

糖分解烯醇酶(2-phospho-D-glycerate hydrolase. EC 4.2.4.11 ，分子量約為80kD) 有多種二聚異構體，由三種亞單位α、β 和γ組成。烯醇酶α亞單位見于哺乳動物多種類型組織中，而β亞單位則主要見于心臟和肌肉組織。αγ和γγ酶異構體稱為神經元特異烯醇化酶（NSE）或γ －酶，高濃度存在于神經細胞和神經內分泌細胞以及這些細胞所引發的腫瘤細胞中。

NSE半衰期為1.5-24h，并且NSE也存在于紅細胞及血小板中，臨床檢測結果會受溶血及半衰期等因素影響，其中放置時間越長，結果越容易偏高，易造成假陽性結果的存在。下圖顯示了不同放置時間對檢測結果的影響。

部分廠家說明書中也有相關保存條件的提示
 

（羅氏）

為此，建議對于排隊0．5 h～1 h的樣本可以置于冷凍條件下保存，可獲得較高的檢測質量，而對于需要排隊1 h以上檢測的樣本，如果檢測結果為陽性，應建議受檢者進行二次檢測(在樣本獲得后的0．5 h內檢測)，以降低神經元特異性烯醇化酶檢測的假陽性率。

HE4（附睪蛋白4）

人附睪蛋白4（HE4）是一種新型的卵巢癌特異性腫瘤標志物，其特異性和靈敏度高于CA125。HE4是由WFDC2基因編碼的，分子量為25kD左右的分泌型糖蛋白，主要在卵巢上皮癌、子宮內膜癌中過量表達，在肺癌和胃癌中也有一定陽性率。HE4的過量表達可促進卵巢癌細胞的增值、浸潤和轉移。

由于HE4在常溫下穩定性較差等因素，不同廠家說明書中均對樣本存放條件進行了說明

（雅培）

（羅氏）

因此對于HE4的檢測，如果在離心之后不能馬上進行，建議立刻放置于2-8度環境下保存。

cTnI（肌鈣蛋白I）

肌鈣蛋白（troponin，Tn）是肌細胞內肌纖蛋白上的一種調節鈣介導的肌動蛋白和肌球蛋白之間相互反應的蛋白，存在于心肌和骨骼肌中，由肌鈣蛋白T（TnT）、肌鈣蛋白I（TnI）及肌鈣蛋白C（TnC）三種亞單位組成。TnT是原肌球蛋白結合亞單位，與肌動蛋白及原肌球蛋白互相作用；TnI是抑制亞單位，抑制肌動球蛋白的ATP酶活性；TnC是唯一與鈣結合的亞單位，可使骨骼肌或心肌收縮。心肌肌鈣蛋白（cTn）分為兩型，即心肌肌鈣蛋白T（cTnT）和心肌肌鈣蛋白I（cTnI）。cTnT在急性心肌梗死后2小時就能在血清中測出，存在時間長，濃度較高。cTnI在急性心肌梗死早期診斷上的價值與cTnT相同。

由于血清中的肌鈣蛋白I在常溫下會產生快速降解，如不能及時檢測，會造成檢測結果的嚴重降低，下圖顯示了不同放置時間對檢測結果的影響

不同廠家在說明書中也均對該項目的放置時間做了較嚴格的要求。

（雅培）

（羅氏）

（西門子）

因此對于cTnI項目來說，如果離心后測試不能馬上進行，建議立刻吸出血清，保存在2-8°C環境中（可保存達72小時）

Folate（葉酸）

葉酸是一種水溶性維生素，它不存在于自然界中也無生物活性，但為具有生物活性的葉酸鹽(folate)的前體。葉酸鹽在自然界廣泛存在，動植物中都有，肝、腎、綠葉蔬菜、土豆、麥麩等含量豐富。葉酸能傳遞一碳基團(甲基或甲酰)給脫氧尿苷酸，使之變為脫氧胸苷酸，進而合成DNA。

血清中存在的抗生素、葉酸鹽拮抗物、血清乳酸桿菌抗體或樣品暴露在日光下，均可使測定值呈假性降低。因此葉酸對樣本放置時間同樣存在要求。

（西門子）

（羅氏）

（雅培）

由于血清中的抗生素，以及光照等因素均會使葉酸發生降解，造成測試結果降低，因此建議在離心之后立刻進行測試，如不能馬上進行測試，需將血清吸出，避光保存在2-8°C環境中。

Insulin（胰島素）/C-peptide（C 肽）

胰島素是一個含有51個氨基酸組成的蛋白激素，它由兩條肽鏈即A鏈（含有21個氨基酸）和B鏈（含有30個氨基酸）通過二硫鍵連接組成，相對分子量為5808道爾頓。胰島素是胰島β細胞分泌的一種蛋白質激素，能維持機體血糖在一個恒定的濃度，以防止血糖中毒。它是體內唯一能降低血糖的激素。

胰島素在其它激素的配合下，調節糖、蛋白質和脂肪的合成與分解代謝，而它最重要的作用是促進三大物質在體內的貯存。

C肽是一條含有31個氨基酸的多肽分子，分子量約為3000道爾頓，是胰臟中β胰島細胞合成的胰島