毛細管電泳各類物質的分離要點

1.陰離子及有機酸：
?此類物質沒有紫外吸收，要采用間接檢測法
?間接紫外法一般以鉻酸鈉等物質作為背景吸收物
?CTAB通常用作電滲流反向劑，以加速出峰，提高峰的尖銳度
?要使用反向極性分離

2.陽離子及金屬離子的分離：
?此類物質沒有紫外吸收，要采用間接檢測法
?間接紫外法一般以氨基吡啶等物質作為背景吸收物
?與陰離子不同的是陽離子的分析不需要在緩沖溶液中添加電滲流反向試劑
?也不需要使用反向極性分離

3.易電離有極性的化合物：
?一般采用長60cm的毛細管
?分離的最佳pH在分析物pKa正負1左右
?通常不需要添加劑

4.弱極性物質和水溶性差的物質（一些中藥成分、農藥等）：
?要注意分析物的溶解性，防止在毛細管中的沉淀
?通過有機溶劑的添加，提高分析物在buffer中的溶解度
?添加SDS，增加溶解度
?降低樣品中分析物的濃度，延長ramp time也可以防止分析物的析出

5.還原性的單糖、寡糖和多糖（葡萄糖、半乳糖等及其聚合物）：
?通常無紫外和熒光，注意檢測問題
?可用APTS等衍生試劑衍生，使其帶上電荷和紫外/熒光基團
?多糖也可以采用末端吸收來檢測（180-200nm），不需要衍生化處理，但是要盡量采用高pH使得羥基部分電離帶電

6.非還原性的單糖、寡糖和多糖：
?很難采用衍生的方法檢測，通常對單糖和寡糖采用間接檢測法
?對多糖采用末端吸收的方法來檢測
?通常采用高pH使得羥基部分電離帶電
?高pH緩沖液還有防止多糖在毛細管內壁吸附的作用

7.單鏈核苷酸、雙鏈核苷酸片斷及PCR產物：
?容易在毛細管內壁吸附，通常需要使用涂層管或者對毛細管進行動態涂層
?分子篩原理，凝膠的種類和濃度決定了分辨率的最佳范圍和大小

8.多肽及蛋白質：
?一般來說小的肽段不需要考慮在毛細管內壁的吸附問題
?對于大的肽段和蛋白質一定要考慮在毛細管內壁的吸附，可采用極端pH和涂層毛細管的方法來避免吸附
?在使用極端pH條件的時候，通常都是用正向電壓分離
?在使用涂層毛細管時通常沒有電滲流，而蛋白是兩性物質，需要仔細考慮使用涂層管時的分離極性