水溶性維生素的測定

一、維生素B₁的測定

V_B1又叫硫胺素

1、食品中V_B1的存在形式

⑴ 常以游離態存在；

⑵復合脂形式存在（磷蛋白）；

⑶ 輔羧酶形式存在

V_B1在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色的蔬菜和牛乳、蛋黃中比較豐富，動物組織不如植物含量豐富。

2、V_B1的性質

⑴ V_B1在中性、堿性下不穩定，易分解；

⑵ V_B1在酸性條件下穩定，即使加熱酸性也穩定；

⑶ V_B1為白色結晶，微溶于C₂H₅OH，不溶于乙醚或CHCl₃，易溶于水。

3、V_B1的測定

世界各國都用熒光法測定

⑴ 原理：硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中，被氧化成一種蘭色熒光物質，即為硫色素，在紫外光

下，硫色素發出熒光。

⑵ 方法

① 萃取

100g樣品于干燥燒杯中，加入100ml0.1N H₂SO₄，打成勻漿，煮沸30分鐘，稱取一定的樣品經高壓鍋121℃、20分鐘高壓酸解

② 水解

在酸解的樣品中冷卻后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaA_C溶液，搖勻，用15%NaOH調PH=4.5，用淀粉酶使淀粉水解，也可用磷酸酶使淀粉水解，于50℃恒溫箱中12小時

③ 純化

采用柱層析提純

吸附劑采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分數次洗滌，主要是把V_B1吸附上去，吸附上去后，再用熱水淋洗，最后用25%KCl-HA_C把V_B1洗脫下來，這樣就得到純V_B1，再根據上面的原理在堿性下分析。

④ 分析　

裝填柱子（離子交換柱）→ 提純 → 氧化 → 測定