液相色譜法對白酒中安賽蜜和糖精鈉標準曲線建立的探討

摘要:建立了高效液相色譜對白酒中安賽蜜和糖精鈉標準曲線的方法，分析討論了影響檢測結果的因素。

關鍵詞：高效液相色譜法；標準曲線；白酒；安賽蜜；糖精鈉

中圖分類號：TS262.3；TS207.3 文獻標識碼：B

白酒是我國傳統的蒸餾酒,歷史悠久,工藝獨特,馳名中外。近年來在我國白酒生產中為使白酒的口感更舒適,增加白酒的甜味，白酒產品中仍然存在違規使用甜味劑的情況。然而,我國國家標準禁止在發酵酒中添加甜味劑,因此，采用一種簡便可靠的方法檢測甜味劑很有必要。白酒中添加的甜味劑主要有糖精鈉、安賽蜜(學名乙酰磺胺酸鉀)、甜蜜素(學名環己基氨基磺酸鈉)、阿斯巴甜等。

高效液相色譜以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相用高壓泵在進樣器處與檢測樣品混合輸入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對樣品的分析檢測。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。本文利用高效液相色譜法對白酒中的微量安賽蜜、糖精鈉甜味劑成分進行了檢測，建立了在實驗條件下安賽蜜和糖精鈉的標準曲線，并探討了影響檢測結果的因素。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

高效液相色譜儀（北京普析通用儀器有限責任公司，型號：L6-P6,配有可變波長紫外檢測器、色譜工作站、150×4.6mmSTC-C18 色譜柱、手動進樣器）。

恒溫水浴鍋（北京科偉儀器有限公司，型號：HH-S4 可控溫度精度：±0.5℃）。

分析天平（美國METTLER,型號：AE240,精度：萬分之一克）。

安賽蜜標準品、糖精鈉標準品(0.25g,色譜純,德國Dr.Ehrenstorfer GMbH 生產)。

甲醇（4L,色譜純,Honeywell公司生產）。

乙酸銨（500g，分析純，天津市科密歐化學試劑有限公司）。

實驗室一級水。

1.2 色譜條件

流動相為0.02mol/L的乙酸銨-甲醇（90∶10），流速為1.0mL/min, 進樣量為20μL，檢測波長為230nm。

1.3 試劑的配制

用分析天平準確稱量1.5416g 乙酸銨用水定容于1000mL容量瓶，配制成0.02mol/L的乙酸銨溶液。

利用配制好的1000mg/L 的安賽蜜和糖精鈉標準溶液，稀釋分別配制成0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L、0.4mg/L、0.5mg/L、0.8mg/L、1.6mg/L的標準濃度。

1.4 標準曲線的建立

提前做好檢測前的樣品和標準溶液的準備工作，利用選定的色譜檢測條件，對標準樣品進行檢測，檢測數據用LCWin 液相色譜工作站v1.0 中的數據處理功能進行數據處理和計算。標準曲線圖是以濃度為縱坐標，峰面積為橫坐標。

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

由圖3 和圖4 比較可以看出，在其他檢測條件不變的情況下，流動相甲醇在10%時安賽蜜出峰時間為3.60min，糖精鈉出峰時間為6.78min。甲醇在5%時安賽蜜出峰時間為5.28min，糖精鈉出峰時間為12.5min。由此判斷甲醇含量增加，出峰時間相應提前，有利于縮短檢測時間。

2.2 檢測波長的選擇

可變波長紫外檢測器是具有高品質光學性能的紫外-可見波長檢測器，其可以與多種HPLC 系統配置兼容，可選波長范圍為190~800nm。每種物質都有特定的吸收波長，在分析過程中，我們采用時間- 波長程序進行檢測，并對樣品進行掃描，掃描的結果顯示安賽蜜和糖精鈉的最大吸收波長在221nm 和217nm 處，這次實驗選用220nm 進行檢測，檢測結果如圖五所示，經過和圖三、圖四的比較發現在220nm下，峰高超過20mAU，采用國標在230nm 下檢測峰高也能達到17mAU，兩者相差不大。

2.3 精密度及檢出下限

按照選定的色譜檢測條件，進行了15 次的平行樣檢測，被測的樣品溶液加標回收率安賽蜜為97.5%，糖精鈉為103%，安賽蜜的RSD 為2.78%，糖精鈉的RSD 為1.26%。測定結果準確，數據可信。選用不含安賽蜜和糖精鈉的白酒樣品，添加安賽蜜和糖精鈉標準溶液進行檢測，在檢測圖譜中，根據3倍噪音所對應的濃度值分別計算出安賽蜜和糖精鈉的檢測下限為0.05mg/L和0.08mg/L。

3 結論

建立了高效液相色譜測定安賽蜜和糖精鈉的方法，并對影響結果的流動相比例和檢測波長進行了分析。該方法安賽蜜的線性回歸方程y=1.4779e-005x-4.4547e-002（mg/L），相關系數r=0.9961，糖精鈉的線性回歸方程y=2.3435e-005x-3.1272e-003（mg/L），相關系數r=0.9973，從回收率和RSD、檢出限可以看出，該方法操作簡便，檢測結果準確可靠。檢

測下限高的原因與檢測器的靈敏度和檢測方法有關，下一步需提高安賽蜜和糖精鈉的檢測下限。