(1)混合試劑:
①試劑Ⅰ:含緩沖液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、輔酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基輔酶A合成酶2.0ml,加雙蒸水4.5ml(共20.5ml)。
②試劑Ⅱ:含MES緩沖液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、過氧化物酶溶液0.4ml,雙蒸水10.0ml(共40.4ml)。
③試劑Ⅲ:NEM緩沖液2.1ml、酰基輔酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。
上述三種混合試劑4℃避光保存可穩定3天。
(2)各管內加入試劑Ⅰ1ml與試劑Ⅱ2ml,混合,37℃10min。
(3)加入空白與血清標本各50μl,混合后37℃5min,在546nm測定吸光度為A1。
(4)加入試劑Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反應停止后在546nm測定吸光度為A2。