激光共聚焦顯微鏡和掃描電鏡都是點源逐點掃描成像,通過控制掃描驅動范圍,調節放大倍數。激光共聚焦顯微鏡是通過激光掃描的方式工作,可以獲得三維圖像。掃描電鏡是利用細聚焦電子束在樣品表面掃描時激發出來的各種物理信號來調制成像的,只能得到二維圖像,不能得到三維圖像。
1、極限分辨率不同(放大信號源不同)
激光共聚焦:極限分辨率 150nm
掃描電鏡:20nm~0.8nm
2、掃描驅動方式不同
激光共聚焦:激光轉鏡控制激光掃描范圍和掃描速度
掃描電鏡:電磁線圈控制電子束掃描范圍和掃描速度
3、立體成像不同
激光共聚焦:通過納米精度步進電機驅動樣品在Z軸方向逐層成像,軟件將設定的各層圖像合成清晰三維立體圖像
掃描電鏡: 單幀圖像具有很大景深,屬于二維圖像
4、應用范圍不同
激光共聚焦:幾倍~ 幾千倍
掃描電鏡 :幾倍~幾十萬倍
5、工作環境不同
激光共聚焦:可在大氣環境中測試樣品
掃描電鏡:在高真空環境下測試樣品
激光共聚焦顯微鏡 的優點
激光共聚焦顯微鏡 匯集了激光技術、顯微鏡技術、免疫熒光技術、計算機及圖像處理技術、精密的機械技術等,高、精、尖細胞分析及工程技術于一體的新技術。使其成為形態學、分子細胞生物學、神經科學、藥理學、遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具。
激光共聚焦顯微鏡 是現今較為先進的光學顯微鏡,其主要優點為:
1、以激光為光源,在相應的熒光探針標記后,對樣本進行逐點掃描,逐層獲得二維光學橫斷面圖像,具有“細胞CT”的功能,并可通過計算機三維重建軟件支持,獲得三維圖像,并可以任意角度旋轉,觀察細胞,組織立體形態和空間關系;
2、可以對活細胞和組織進行無損傷的觀察,動態測量細胞內的Ca離子濃度和pH值等活細胞生理信息;
3、可對細胞膜的流動性,細胞間通訊,細胞融合,細胞骨架彈性測量等,可用作“光刀子”完成細胞內“外科手術”。這一技術可以對活細胞和組織進行原位動態定量的觀察和測量。
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