百人博士兩篇文章：如何研究細胞關鍵蛋白

　　來自中科院上海生科院生化與細胞所的研究人員利用多種細胞蛋白分析手段發現了兩種關鍵細胞蛋白的作用機理，這兩種蛋白分別是C末端Src激酶(C-terminal Src kinase，Csk)和細胞極性封閉蛋白Occludin。研究論文分別發表在《Proteomic》和《Developmental Cell》上。

　　領導這些研究的是生化與細胞所陳正軍研究員，其早年畢業于第二軍醫大學，后獲國家教委青年獎學金赴德國學習，2001年入選百人計劃受聘于中科院上海生科院生物化學與細胞生物學研究所，主要研究方向是磷酸化蛋白質細胞信號網絡與腫瘤發生。

　　在第一篇文章中，研究人員利用蛋白質組學分析了C末端Src激酶Csk，Src家族包括原癌基因src，yes，lyn，fyn，lck，blk，fgr，bcd和yrk編碼蛋白，它們都有TPK活性.共同參與細胞轉化的信號轉導過程。Csk是Src同源家族激酶，是最重要的負調控因子之一，了解Csk相關的蛋白對于認識Csk的功能和信號傳導具有重要的意義。

　　研究人員利用直接蛋白質組學方法識別了151個新蛋白，之后利用生物信息學分析，發現這些識別出的蛋白包含有一個或者多個Csk-SH2結合位點，這說明這些蛋白與Csk有潛在直接相互作用關系。

　　并且研究人員還利用生物化學的方法確認了四個蛋白：Par3, DDR1, SYK，以及蛋白激酶C iota與Csk-SH2結合位點的相互作用，最后通過免疫熒光實驗，研究人員發現了Csk與Par3之間的作用模式，這些一系列的實驗手段得出的數據，都為Csk研究提供了重要進展，這種新蛋白作用模式也為細胞調控提出了新觀點。

　　另外一篇文章中，研究人員發現，重要的細胞緊密聯接蛋白，又稱封閉蛋白(Occludin)，在上皮細胞的定向遷移過程中定位于遷移的上皮細胞的遷移前緣，可能參與細胞定向遷移的極性的形成和穩定，由此調控細胞定向遷移活動。

　　細胞遷移是一種非常重要的細胞活動現象，它在生物體發育過程以及機體穩態維持方面起著非常重要的作用，也和許多疾病的發生發展緊密相關。細胞遷移過程及其分子調控網絡非常復雜，迄今為止，遷移細胞的極性如何形成，極性蛋白如何被招募到上皮細胞遷移前緣等機制，以及極性蛋白的下游信號傳導通路仍很不清楚。

　　研究人員通過細胞生物學和原子粒顯微鏡等一系列技術和方法發現了四次跨膜封閉蛋白Occludin定位并富集于遷移的上皮細胞前緣，Occludin表達被干擾后，明顯影響其在細胞遷移前緣的定位，并造成細胞微管組織結構紊亂，同時微管組織中心(MTOC)重定向也明顯異常;分子機制的研究結果證明Occludin能與aPKC和PI3K結合，且激活aPKC和PI3K信號通路，借此可能參與調控了微管組織中心定位、細胞骨架組織和細胞偽足突觸伸展等過程。

　　這些研究發現提高了人們對遷移細胞極性的形成和穩定，以及細胞生命活動—細胞極性和細胞遷移—內在生物學相關性的認識，同時也為了解胚胎發育過程和愈傷過程增添了新的內容。

　　之前陳正軍研究組還揭示了Cdc42在肝臟再生過程中擔負的重要功能，Cdc42在肝細胞中的功能調控是一個復雜的網絡，可能涉及到多種不同的細胞內功能和復雜的信號分子通路，對這些問題的闡釋對于我們更深入理解肝臟的生理功能和發病機理具有重要的指導意義。