監控細胞狀態，你有很多選擇

　　如果你在真核系統上開展生物學研究，那么你有很大的機會要培養細胞。作為實驗的原材料，細胞的狀態很重要。不過，如今的實驗室中有無數的細胞系，每一種都有其獨特的生長特性，研究人員如何才能確定細胞培養物是健康的？

　　各大廠商已開發出一系列工具來監控細胞培養物。一些是專門的檢測，來監控藥物篩選等應用中的細胞變化。當然，更多的是用于日常的細胞培養。在此，我們就來看看你有哪些選擇。

　　流式檢測

　　細胞健康并沒有一個定義。MilliporeSigma流式細胞應用的研發主管Kamala Tyagarajan認為，這個詞涵蓋了細胞的一切，包括細胞密度、倍增時間以及氧化應激和凋亡狀態。不過，最直接的指標是細胞活力。

　　之前，細胞活力是利用血球計數器和臺盼藍來評估的。臺盼藍是一種無法透過細胞膜的染料，這意味著它會被健康細胞排斥，而只能進入細胞膜受損的細胞。研究人員將染料與細胞混合，并移液至血球計數器，在獲得細胞計數的同時評估多少是活的。這個過程可以自動化，比如Bio-Rad的TC20自動細胞計數器。不過，你也可以選擇放棄臺盼藍，而轉投流式細胞儀的懷抱。

　　比如，MilliporeSigma的Muse? Count & Viability Assay就使用了兩種熒光染料的混合物，一種可染色所有有核的細胞，另一種則染色無活力的細胞。通過在Muse細胞分析儀上分析染色的細胞，研究人員可獲得樣品中的細胞總數和活細胞數量。

　　據Tyagarajan介紹，MilliporeSigma為Muse細胞分析儀開發了超過25種檢測，其中有10種可評估細胞健康，同時還為其他流式細胞儀（如Guava easyCyte系統）開發了其他檢測。這些檢測可監控凋亡、氧化應激、線粒體健康以及細胞周期狀態。

　　Bio-Rad的CytoTrack?檢測也是基于流式細胞儀，可監控細胞增殖。該公司細胞生物學的產品經理Chris Linnevers表示，CytoTrack根據特定染料的豐度來提供細胞增殖的量度。在CytoTrack檢測中，染料被上樣到細胞中，隨著細胞的分裂，每個細胞中的染料數量降至一半。通過流式細胞儀的分析，研究人員可計算細胞分裂了多少次。

　　成像檢測

　　許多公司，包括Bio-Rad、Essen Bioscience和GE Healthcare，也開發出成像平臺，能夠捕獲形態變化，從而監控細胞培養物。

　　比如，Bio-Rad的ZOE?熒光細胞成像儀是一個臺式手動顯微鏡，將平板電腦那樣的界面與倒置顯微鏡和數字熒光成像能力融為一體。ZOE具有一個明視場和三個熒光通道，“是常規監控細胞健康的好工具，特別是表達熒光蛋白的細胞”。即便如此，研究人員也可使用該公司的VivaFix?試劑，這種染料可與伯胺結合，利用活細胞和死細胞之間的染色強度來區分它們。