近日,廣東省科學院測試分析研究所(中國廣州分析測試中心)研究團隊聯合中山大學、華北理工大學附屬醫院,成功研制出一種高選擇性、高富集效率的環糊精聚合物固相微萃取(SPME)纖維,并將其與高效液相色譜-串聯質譜(HPLC-MS/MS)聯用。相關成果發表于《綠色分析化學》(Green Analytical Chemistry)。
環糊精聚合物固相微萃取纖維的綠色樣品制備流程示意。研究團隊供圖
嘌呤作為DNA和RNA的基本組成單元,在細胞能量代謝和信號轉導中發揮關鍵作用。嘌呤代謝紊亂與高尿酸血癥、痛風性關節炎、2型糖尿病等多種疾病密切相關。然而,血清中嘌呤代謝物內源性豐度低、極性高,且基質干擾嚴重。傳統蛋白沉淀結合高效液相色譜-紫外檢測(HPLC-UV)或液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)的方法,主要依靠去除蛋白質來凈化樣品,無法對目標嘌呤進行選擇性富集,殘留的基質效應嚴重制約了檢測靈敏度和數據可靠性。
針對上述難題,研究團隊開發了基于環糊精聚合物固相微萃取的樣品前處理技術,并結合HPLC-MS/MS建立了快速檢測方法。該技術利用多孔結構與主客體識別協同作用,可高效捕獲血清中痕量嘌呤,實現對六種嘌呤代謝物的同步精準定量。該方法操作簡便、有機溶劑消耗低、富集效率高。
該SPME纖維涂層兼具多孔結構(比表面積達318.9 m2/g)與環糊精疏水內腔的主客體識別雙重協同功能:多孔結構提供充足吸附位點,環糊精空腔選擇性捕獲嘌呤分子,二者協同作用實現對血清中六種嘌呤代謝物的高效富集。在相同條件下,其萃取效率顯著優于商品化纖維。
結合HPLC-MS/MS分析,該方法可同步精準定量黃嘌呤、次黃嘌呤、黃苷、鳥苷、鳥嘌呤和腺嘌呤,檢測限低至0.05 μg/L,加標回收率為77.0%~112.0%,重現性良好。單次分析僅消耗80 μL有機溶劑,較傳統液相萃取大幅減少了有機溶劑使用量,為臨床嘌呤代謝分析開辟了一條綠色高效的新路徑。
研究人員指出,該方法為生物樣品中嘌呤代謝物的測定提供了一種靈敏且實用的分析途徑,對闡明嘌呤代謝紊亂的發病機制及促進早期臨床診斷具有重要意義。
相關論文信息:https://doi.org/10.1016/j.greeac.2026.100375
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