1. 細胞培養：取對數生長期的細胞，按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內，進行所需的處理（比如加入藥物），特定時間后終止培養，進行下一步的實驗。
2. 細胞固定： 800rpm離心5min，收集細胞沉淀，棄上清，用預冷PBS洗滌兩次，加入預冷75%乙醇，于4℃固定4h以上。
3. 細胞染色：1500rpm離心5min，棄上清，以3mL的PBS洗滌一次，加入400uL溴化乙錠（PI，50ug/mL），100ul RNase A（100ug/mL ），4℃避光孵育30min。
4. 流式分析： 以標準程序用流式細胞儀檢測，一般計數2~3萬個細胞，結果用細胞周期擬和軟件ModFit分析。
細胞周期是指能持續分裂的真核細胞從一次有絲分裂結束后生長，再到下一次分裂結束的循環過程。細胞周期的長短反映了細胞所處狀態，這是一個細胞物質積累與細胞分裂的循環過程。癌變的細胞以及特定階段的胚胎細胞常常有異常的分裂周期。