細胞周期檢測方法即PI法的操作步驟
1. 細胞培養：取對數生長期的細胞，按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內，進行所需的處理（比如加入藥物），特定時間后終止培養，進行下一步的實驗。2. 細胞固定： 800rpm離心5min，收集細胞沉淀，棄上清，用預冷PBS洗滌兩次，加入預冷75%乙醇，于4℃固定4h以上。3. 細胞染色：1500rpm離心5min，棄上清，以3mL的PBS洗滌一次，加入400uL溴化乙錠（PI，50ug/mL），100ul RNase A（100ug/mL ），4℃避光孵育30min。4. 流式分析： 以標準程序用流式細胞儀檢測，一般計數2~3萬個細胞，結果用細胞周期擬和軟件ModFit分析。細胞周期是指能持續分裂的真核細胞從一次有絲分裂結束后生長，再到下一次分裂結束的循環過程。細胞周期的長短反映了細胞所處狀態，這是一個細胞物質積累與細胞分裂的循環過程。癌變的細胞以及特定階段的胚胎細胞常常有異常的分裂周期。......閱讀全文
細胞周期檢測方法即PI法的操作步驟
1. 細胞培養：取對數生長期的細胞，按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內，進行所需的處理（比如加入藥物），特定時間后終止培養，進行下一步的實驗。2. 細胞固定： 800rpm離心5min，收集細胞沉淀，棄上清，用預冷PBS洗滌兩次，加入預冷75%乙醇，于4℃固定4
細胞周期檢測方法（PI法）
可用于細胞周期檢測的熒光染料有碘化丙啶（Propidium，簡稱PI）、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole，簡稱DAPI)、Hochest、7氨基放線菌素（7-Amino-ActinomycinD，簡稱7AAD）等。細胞周期PI
細胞周期的流式細胞伩檢測實驗方法（PI，Brdu)1
ANALYSIS OF CELL CYCLE?Miriam Capri and Daniela Barbieri?Dept. Biomedical Sciences, Sect. General Pathology,Via Campi, 287, University of Modena, 4110
細胞周期的流式細胞伩檢測實驗方法（PI，Brdu)2
B.3. COMMENTARY?B.3.1 Background information?The critical steps in the methodology are cell fixation, permeabilization and the concentrations of anti-
細胞周期測定的方法步驟
一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數法等，這里介紹一種利用BrdU滲入測
細胞周期測定的方法步驟
一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數法等，這里介紹一種利用BrdU滲入測
細胞周期流式檢測步驟詳解
材料與試劑：全稱簡稱貨號PBS——乙醇，70-80%,提前放置-20°C預冷固定劑——BD Pharmingen? stain buffer, or equivalent, 1X PBS, 2% FBS,?0.1% NaN3 (pH 7.1–7.4)染色液554656BD Pharmingen? P
細胞凋亡檢測操作步驟之ELISA法
細胞凋亡發生時，內源性核酸內切酶將分解核小體區間的雙鏈DNA，但核小體本身由于由組蛋白緊密結合而免受切割，單克隆抗體可以與核小體形成夾心結構，可通過檢測核小體判斷細胞是否經歷凋亡事件。(一) 原理細胞凋亡的發生，是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小
MTT法操作步驟
（1）單細胞懸液接種于96孔培養板；103-104細胞/孔，每孔培養基總量200微升（96孔培養板每孔容積370微升），37℃、5％CO2培養箱中培養一段時間（根據實驗目的決定培養時間）（2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微升／孔）；繼續培養3小時。（3）吸出孔內培養液后，加入DMSO液（150微
細胞周期檢測方法
1. 細胞培養：取對數生長期的細胞，按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內，進行所需的處理（比如加入藥物），特定時間后終止培養，進行下一步的實驗。2. 細胞固定： 800rpm離心5min，收集細胞沉淀，棄上清，用預冷PBS洗滌兩次，加入預冷75%乙醇，于4℃固定4
檢測微生物檢測方法和操作步驟
產品采集與樣品處理 于同一批 號的 二個運輸包裝中至少抽取 12個蕞小銷售包裝樣品，1/4樣品用于檢測，1/4樣品用于留樣，另 1/2樣品（可就地封存）必要時用于復檢。抽樣的蕞小銷售包裝不應有破裂，檢驗前不得啟開。 在100級凈化條件下用無菌方法打開用于檢測的至少 3個包裝，從每個包
PI膜相關知識與PI膜厚度的檢測方法
PI膜又稱為聚酰亞胺薄膜（PolyimideFilm），是世界上性能的薄膜類絕緣材料，由均苯四甲酸二酐（PMDA）和二胺基二苯醚（DDE）在強極性溶劑中經縮聚并流延成膜再經亞胺化而成。 聚酰亞胺作為一種特種工程材料，已廣泛應用在航空、航天、電氣/電子、微電子、納米、液晶、分離膜、激光、機車、汽
DNA測序方法自動測序法的操作步驟
一、準備工作1. BigDye測序反應試劑盒 主要試劑是BigDye Mix，內含PEZL四色熒光標記的ddNTP和普通dNTP，AmpliTaq DNA polymerase FS，反應緩沖液等。2. pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA對照模板 0.2 g/L，試劑盒配套試劑。3. M13(-2
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
氣相色譜法檢測氯乙烯的操作步驟
步驟1、氯乙烯標準溶液的配制用干燥、清潔注射器一次性取2.00ml氯乙烯標準氣,將針尖插入裝有5ml二硫化碳的10ml容量瓶中,慢慢抽動注射器芯吸入溶劑,由于氯乙烯在二硫化碳中的溶解,使注射器現負壓,溶劑仍繼續充入注射器。待停止后,將溶液全部注入容量瓶中,再用二硫化碳抽洗注射器兩次,將洗液合并至容量
DNA測序的方法自動測序法的操作步驟
一、準備工作1. BigDye測序反應試劑盒 主要試劑是BigDye Mix，內含PEZL四色熒光標記的ddNTP和普通dNTP，AmpliTaq DNA polymerase FS，反應緩沖液等。2. pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA對照模板 0.2 g/L，試劑盒配套試劑。3. M13(-2
DNA測序方法中自動測序法的操作步驟
基因分析儀(即DNA測序儀)，采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳，應用該公司ZL的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法)，因此通過單引物PCR測序反應，生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物，使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一根毛
薄層色譜法的操作步驟
薄層板制備薄層板除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2～0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和
蒸餾法的實驗操作步驟介紹
加料 將待蒸餾液通過玻璃漏斗小心倒入蒸餾瓶中，要注意不使液體從支管流出。加入幾粒助沸物，安好溫度計。再一次檢查儀器的各部分連接是否緊密和妥善。 加熱 用水冷凝管時，先由冷凝管下口緩緩通入冷水，自上口流出引至水槽中，然后開始加熱。加熱時可以看見蒸餾瓶中的液體逐漸沸騰，蒸氣逐漸上升。溫度計的讀
關于Annexin－V/－PI－法檢測細胞凋亡的介紹
1992 年Fadok 報道在APO 早期位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserin ,PS) 遷移至細胞外側,這一現象出現在核染色質變性與核體積縮小之前。AnnexinV 是一種具有很強的抗凝血特性的血管蛋白,和磷脂有高親合力,尤其與帶負電荷的磷脂如PS 具極強的結合力,
熒光血管造影法操作步驟
在暗室中進行。先在蘭色光波下觀察眼底檢查部位的情況，注意有無假熒光，為了觀察病人對熒光素有無過敏反應，先取10%熒光素鈉0.5ml加入無菌等滲鹽水4.5ml稀釋，作為預測試驗，緩慢地注入肘前靜脈，詢問病人有何不適。如無不良反應，可調換盛有10%熒光素鈉5ml或20%熒光素鈉2.5～3ml注射器，于1
氣相色譜法檢測氯丁二烯的操作步驟和計算方法
步驟1、色譜條件柱溫:84℃。載氣:氮氣流量30ml/min;燃氣:氫氣流量55ml/min;助燃氣:空氣流量400ml/min。2、標準曲線的繪制用四氯化碳將標準溶液稀釋成以下濃度系列:0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00及6.00μg/ml。另取5ml 具塞刻度管8支,
顛倒溫度計法測水溫的方法、儀器操作步驟
(1)儀器顛倒溫度表:顛倒溫度表有閉端(防壓)和開端(受壓)兩種,均需裝在采水器上使用。前者用于測量水溫,后者與前者配合使用,確定采水器的沉放深度。在深度小于200 m的水中,可根據放出的繩長來確定采水器的沉放深度,而不必用閉端與開端顛倒溫度計的溫差進行計算。顛倒溫度表由主溫表和輔溫表組裝在厚壁玻璃
薄層色譜法的的操作步驟
操作步驟 ①薄層板制備：除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為 0.2～O.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30min，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均
細胞周期檢測方法介紹匯總
細胞周期是一個重要的檢測參數，對細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。細胞周期內有兩個階段最為重要：G1到S和G2到M；這兩個階段正處在復雜活躍的分子水平變化的時期，容易受環境條件的影響，如果能夠人為地進行調控，將對深入了
PI單染色法原理、試劑、操作步驟和注意事項
PI單染色法原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性。PI介紹熒光染料PI（碘化丙啶）是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，常用于細胞凋亡檢測，英文全稱是Propidi
小鼠Treg檢測操作步驟
1、在每個流式上樣管中加入100?μl準備好的細胞懸液，細胞數約為1x106個.2、按照細胞表面抗原染色方法標記表面抗原。根據說明書加入CD4和CD25抗體100?μl體系中使用0.125?μg?FITC?anti-mouse?CD4，0.06?μg?APC?anti-mouse?CD25抗體。最好
細胞周期試劑盒Cell－cycle－staining－Kit中文操作步驟
試劑盒特點：1、獨創的活細胞一步法檢測，收集——洗滌——染色，簡單快速 ? 2、兼容固定細胞檢測，改進的固定方法，更少細胞粘連，更小CV值 ? 3、兼容流式和熒光顯微鏡分析，提供詳細protocol固定細胞處理：1、收集細胞懸液，細胞數為2 × 10^5 ~ 1 × 10^6。離心沉淀細胞，去上清，
關于細胞凋亡檢測—Annexin－V/－PI－法的基本介紹
1992 年Fadok 報道在APO 早期位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserin ,PS) 遷移至細胞外側,這一現象出現在核染色質變性與核體積縮小之前。AnnexinV 是一種具有很強的抗凝血特性的血管蛋白,和磷脂有高親合力,尤其與帶負電荷的磷脂如PS 具極強的結合力,