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  • 發布時間:2021-05-28 20:53 原文鏈接: 細胞外囊泡的檢測方法

    外泌體具有磷脂雙分子膜結構,導致其沉降系數和蛋白質聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在特異性膜蛋白如CD9和CD81,前者被證實和腫瘤遷移有關,后者與丙型肝炎病毒的侵染有關。而因為外泌體具有這些顯著的易分離的特點,我們可以通過密度梯度離心,親和層析等方法對外泌體進行分離和純化。

    細胞外囊泡的檢測方法

    目前細胞外囊泡(EVs)的檢測方法主要有掃描電子顯微鏡、原子力顯微鏡、動態光散射技術、納米微粒追蹤分析術(NTA)、流式細胞儀和ELISA等,由于通量高、用時短、操作簡單,ELISA和流式細胞儀是比較常用的方法。ELISA方法容易受其他可溶性抗原的干擾,而且無法知道囊泡的大小、數量等信息;流式細胞儀不僅可以檢測囊泡的大小、數量,而且通過細胞特異的標記物染色可以檢測囊泡的來源,將囊泡進行分類,因此,流式細胞儀理論上是進行囊泡快速、高通量、多參數檢測的較優選擇。然而,傳統流式細胞儀針對的樣本主要是細胞,散射光的檢測極限通常是300-500nm,而大多數細胞外囊泡的直徑都在300nm以下,由于無法與背景噪音區分,直徑小于300nm的細胞外囊泡很難被檢測到,因此,囊泡數量往往被低估,檢測結果自然也不準確。

    齊岳生物提供一系列外泌體分離產品和工具,用于表征和分析其RNA和蛋白質含量,以及體外和體內追蹤,以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體。外泌體是包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡 (30–150nm),由所有體外和體內細胞持續分泌。由于人體內復雜的功能,包括細胞間通訊和信號轉導,外泌體正在改變研究。這些細胞外囊泡正在生長,這既是為了了解其生物學功能,也是為了將其用于實際應用,如無創診斷和高級治療開發。

    產品介紹:

    Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數細胞分泌的微小膜泡,具有脂質雙層膜結構,直徑大約40-120 nm。盡管外泌體在1983年就被發現,但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而近幾年,人們發現這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發現點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。

    研究發現外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、腫瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構,能很好的保護其包被的物質,且能靶向特定細胞或組織,因此又是一種很好靶向給藥系統。

    外泌體可大致分為3大類:

    (a)由質膜分裂產生的微囊泡;

    (b)在內質網內形成并在多囊泡體與質膜融合后釋放的外體;

    (c)凋亡體a作為細胞凋亡過程中的囊泡重新釋放。低等生物,如細菌和寄生蟲,也能分泌外囊泡。


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