衍生化氣相色譜三重四極桿質譜法測定潑尼松龍中聯氨

　　色譜, 2021, 39(7): 750-757

　　DOI: 10.3724/SP.J.1123.2021.03002

　　錢沖, 張梅, 劉珊珊, 勾新磊, 王尉, 胡光輝*

　　潑尼松龍是一種廣泛用于臨床治療的腎上腺糖皮質激素藥物,其中聯氨的殘留會直接影響用藥安全,但目前國內外還沒有出臺相應的法律法規和標準來管控藥物中聯氨的殘留限值。

　　聯氨具有強極性和強還原性,理化性質很不穩定,易被氧化,又因缺少發色團,相對分子質量太小,檢測起來難度很大,需引入一種衍生化試劑,降低其極性,生成相對分子質量較大且理化性質穩定的衍生產物。

　　該研究通過優化衍生化試劑、色譜-質譜條件、溶劑體系和衍生化條件,建立了衍生化-氣相色譜-三重四極桿質譜法(GC-MS/MS)測定潑尼松龍中聯氨殘留的方法,并進行了方法學驗證,結果滿意。

　　稱取1 g潑尼松龍樣品置于10 mL具塞離心管中,加入稀釋溶劑(甲醇-二氯甲烷(14∶23, v/v))至刻度線,渦旋振蕩至樣品完全溶解后,吸取100 μL置于進樣小瓶中,再加入丙酮900 μL,渦旋振蕩混勻,樣品在丙酮-稀釋溶劑(9∶1, v/v)中同時完成稀釋和衍生化反應后,再經GC-MS/MS檢測分析。

　　該研究的衍生化反應無需在添加冰乙酸和超聲條件下進行,也無需再添加其他試劑進行萃取操作,聯氨與丙酮可瞬間發生衍生化反應,直接實現潑尼松龍中聯氨的快速測定。

　　結果表明,聯氨在1~12 μg/L范圍內線性關系良好,線性相關系數(r2)為0.9999；檢出限、定量限分別為0.03和0.10 mg/kg；進樣精密度(RSD)為1.10%。加標回收率和重復性良好,加標水平分別為1、6、12 μg/L時的回收率為96.15%~96.46%,對應的RSD值為1.77%~2.12%。中間精密度良好,不同時間、不同人員在同一臺儀器上測定結果的RSD值為1.77%。

　　方法耐用性良好,通過改變色譜條件來研究檢測結果受影響程度大小,在原條件、初始柱溫±5 ℃、升溫速率±2 ℃/min、柱流量±0.1 mL/min的條件下分別對加標6 μg/L的樣品溶液中的聯氨含量進行檢測,檢測結果的RSD值為2.58%。

　　結論

　　本研究建立了衍生化-GC-MS/MS測定潑尼松龍中聯氨的分析方法。樣品先經甲醇-二氯甲烷(14:23, v/v)溶解,再經丙酮稀釋、衍生后,直接上機檢測分析。該方法操作簡便、專屬性強、檢出限低、準確度高、基質干擾小、基質效應低、耐用性好,能夠滿足潑尼松龍中聯氨的檢測要求,為潑尼松龍及其他藥物中聯氨的檢測及監控提供了科學依據和技術支持。