質譜技術的創新開發及臨床應用研討會在滬召開

　　分析測試百科訊 2016年9月2日，由上海市徐匯區中心醫院/復旦大學附屬中山醫院徐匯醫院、中國科學院上海臨床研究中心、上海市徐匯區醫學會主辦的“質譜技術的創新開發及臨床應用研討會”在上海市徐匯區中心醫院召開。本次研討會以“質譜技術的創新開發及臨床應用為主題，邀請了來自美國克利夫蘭醫學中心王思合、北京同仁醫院魯辛辛、中山醫院郭瑋和王蓓麗、上海臨床檢驗中心居漪、衛生部北京醫院董軍、南通大學附屬醫院王 惠民、上海市現場物證重點實驗室張玉榮、司法部司法鑒定科學技術研究所卓先義、徐匯區中心醫院胡珺、何悅、李水軍、賈晶瑩、劉罡一、張夢琪、孫世軒等23位專家學者做25場精彩報告，重點探討質譜技術在臨床檢驗中的自建方法開發驗證和質量控制、診斷試劑的研發申報的規范流程、疼痛藥物管理與檢測等領域應用和研究的有關進展，共吸引了180余名來自北京、廣東、浙江、江蘇、黑龍江、吉林、天津以及上海市各大醫院包括中山、華山、長海、仁濟、九院、 十院、兒童、東方、精衛中心、公衛中心、食藥檢所以及徐匯區各社區衛生服務中心等地的專家、學者和研究人員參加。會議除了對質譜領域的理論、技術、規范等感興趣的話題進行講座，也給與會的專家和學員們提供了互動交流和學 習的平臺，對推動質譜技術在臨床應用和研究領域的發展做出了積極貢獻。本次會議也得到了SCIEX公司、賽默飛世爾科技、沃特世公司、島津公司、畢克氣體的傾情贊助和全力支持。

質譜技術的創新開發及臨床應用研討會現場

　　大會開幕式由上海市徐匯區中心醫院實驗室主任藥師余琛主持，上海市徐匯區中心醫院院長朱福致歡迎詞。

上海市徐匯區中心醫院院長 朱福

上海市徐匯區中心醫院 實驗室主任藥師 余琛

上海市徐匯區中心醫院 何悅

　　上海市徐匯區中心醫院的何悅向在場的參會人員現場演示新推出的徐匯“云醫院”。“云醫院”是一款在線的遠程診斷平臺系統，醫師和患者可以通過該系統進行面對面看診，通過可穿戴設備能進行量血壓等檢查，還可以上傳心電圖及CT檢查報告，醫師通過CA認證的電子簽名對患者進行診斷和開具處方。

上海市徐匯區中心醫院 胡珺主任

　　上海市徐匯區中心醫院的胡珺主任向參會人員介紹徐匯區中心醫院概況及“云醫院”。上海市徐匯區中心醫院創建于1934年，而“云醫院”由復旦大學附屬中山醫院、徐匯區中心醫院、13家社區衛生服務中心以及70家零售藥店等聯合打造，于2015年8月開始試運營。作為“智慧醫療”的一部分，徐匯區中心醫院專門建設了“云醫院”平臺，將患者和專家對接，形成包含掛號、預約、檢查、云上問診、病后隨訪、支付、物流配送以及影像、心電等一系列流程的服務模式。

　　隨后，來自克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合教授、復旦大學附屬中山醫院檢驗科的王蓓麗、首都醫科大學附屬北京同仁醫院的魯辛辛教授為參會觀眾帶來精彩的大會報告。

克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監 王思合教授

　　來自克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合教授還擔任克利夫蘭州立大學臨床化學教授、廣州醫科大學金域檢驗學院特聘教授，專注于臨床化學和質譜臨床應用領域。

　　在本次研討會上，王思合教授帶來題目為《用于病人護理的LDT方法的驗證》的精彩報告。臨床實驗室改進修正案（CLIA）規定建立人類的質量標準，如血液、體液和組織標本進行實驗室檢測以達到診斷、預防或治療疾病或健康評估的目的。進行方法驗證需要對準確性、精確性、選擇性、靈敏性、再生性和穩定性等基本參數驗證。

　　王思合教授在3日的研討會上帶來了題為《疼痛藥物管理的實驗室支持》的精彩報告。

　　約上億的美國成年人一直忍受著慢性疼痛帶來的痛苦，人數遠超過心臟病、腫瘤及糖尿病人的綜合。2010年患者保護與平價醫療方案要求衛生和公眾服務部資助醫學研究院將疼痛作為公共健康問題研究。疼痛是醫生和其他醫療保健工作者的主要驅動力，是影響生活質量和生產力以及致殘的主要因素，也是用藥的主要原因。鑒于疼痛給人類、經濟以及社會造成的負擔，減輕疼痛應該是國家優先解決的問題。

　　王思合指出，按規定復用阿片類藥物并適當檢測，可以安全有效治療急性、術后及手術疼痛，并且適用于要求減輕疼痛的臨終病人。

　　對于疼痛藥物管理，實驗室檢測應具備正面和負面結果的高可信度，對陰性和陽性結果都有很大把握。其中，免疫法檢測存在一些不足之處：干擾物質導致假陽性/陰性、低靈敏度導致假陰性（高LLOQ）、不能從一批陽性藥物中分離出特效藥、一類藥物中個別藥物交叉反應可能引起顯著變化。

　　王思合還介紹了集中疼痛藥物的實驗室檢測案例，包括海洛因、可卡因等。海洛因是一種半合成嗎啡的衍生物，親脂性強更易吸收，能被血清和肝酯酶迅速分解成6-乙酰嗎啡和嗎啡。海洛因半衰期為7.6分鐘，6-乙酰嗎啡半衰期為21.8分鐘。可卡因是一種很容易上癮并且濫用的潛在危險藥物，服用后半衰期短很快代謝成兩種主要產物：苯甲酰芽子堿（BZE）和芽子堿甲基酯，其中BZE沒有藥理學作用，但由于半衰期長被常規用于可卡因的檢測。

復旦大學附屬中山醫院檢驗科 王蓓麗

　　來自復旦大學附屬中山醫院檢驗科的王蓓麗還擔任上海醫學會檢驗醫學分會青年委員會委員，帶來《醫學檢驗實驗室自建檢測方法的現狀與展望》的精彩報告。

　　王蓓麗介紹了國外醫學檢驗實驗室自建檢測方法的現狀與監管情況。目前，美國有明確的LDT監管措施，將其與醫保制度有關聯；而歐洲與日本沒有明確的LDT監管措施。美國的LDT監管歷史從1976年開始，FDA監管LDT框架指南草案的核心原則是分級與分期，分級原則包含檢測項目是否適用于高風險疾病/狀態人群或患者、檢測項目是否用于篩查還是診斷、依據檢測結果做出臨床決策的性質、臨床醫生是否需要根據LDT結果之外的其他信息一起做出對患者的臨床決策、錯誤結果產生的潛在后果和影響、檢測項目印發不良事件的數量是否與類別相關。

　　報告還指出了我國醫學檢驗實驗室自建檢測方法的現狀與展望。我國對于LDT發展的需求遠重于監管的需求，基于分子診斷檢測技術、質譜分析技術等革新技術的LDT，無論是數量還是種類都與發達國家相距甚遠。同時，我國LDT臨床應用和發展受限于現有的檢驗項目注冊審批制度和收費管理制度，國內僅有少數臨床醫學檢驗實驗室開展，并且大多僅作為臨床研究，無法滿足臨床診療日趨增長的個體化和精準化的需求。

　　LDT很大程度上依賴高科技設備及高素質高水平人才，有條件的大型醫院檢驗部門應當逐步開放甚至鼓勵適當發展LDT，在相關監管機構、醫學檢驗部門及臨床醫學的密切合作下確保檢測結果的準確性與結果解釋的科學合理性，為今后逐步分級推廣LDT奠定堅實的實踐基礎。

首都醫科大學附屬北京同仁醫院 魯辛辛教授

　　來自首都醫科大學附屬北京同仁醫院的魯辛辛教授帶來《微生物MALDI-TOF MS自建體系》的精彩報告。

　　魯辛辛教授介紹了MALDI-TOF MS的原理及功能，MALDI-TOF MS可將蛋白質及多肽按質量數分離排列，形成物種特征峰和指紋圖，完成數據庫中微生物種類鑒定，并具有樣品處理簡單、快速、穩定等特點，可根據微生物特點自建。同時，MALDI-TOF MS具備深入分析功能，如標本直接鑒定、耐藥性分析、聚類分析和自建數據庫等。目前，微生物質譜熱點聚焦于自動化、信息化、多功能化；特殊病原體鑒定；耐藥性分析；標本直接鑒定；聚類分析；數據庫補充等方面。

　　報告還介紹了微生物MALDI-TOF MS的分析方法，包括特殊病原體鑒定、細菌耐藥性分聚類分析等。

SCIEX公司臨床事業部經理 朱林

　　SCIEX公司臨床事業部經理朱林帶來《先進質譜技術與臨床痕量檢測》的精彩報告。

　　朱林指出，LC-MS/MS具有高特異性、高靈敏度、適用范圍廣、小分子/大分子、定量/定性、容易建立新實驗方法、信息豐富、一次進樣多種分析物分析、未知物結構解析等諸多優越性。LC-MS/MS還可進行臨床毒物篩查、新生兒代謝缺陷、治療藥物檢測盒生物標志物等。報告還介紹了SCIEX公司質譜測定痕量雌激素的實際案例。

上海市臨床檢驗中心副主任 居漪

　　上海市臨床檢驗中心副主任居漪帶來《質譜技術在參考方法中的應用》的精彩報告。報告從檢驗醫學參考測量系統、質譜技術與參考方法這兩方面展開，詳細介紹了參考方法的建立流程、參考系統、測量不確定度評定等方面。

上海市徐匯區中心醫院中心實驗室副主任 李水軍

　　上海市徐匯區中心醫院中心實驗室副主任李水軍在本次會議上共帶來兩篇精彩報告。第一篇題為《質譜臨床應用法規要求及質量控制CLSI C62-A指導原則解讀》，報告介紹分2部分，一是介紹了臨床LC-MS/MS的工作流程、工作原理及優缺點；第二部分主要圍繞CLSI C62-A指導原則就儀器組成、預實驗考察、方法開發、方法驗證、QA和QC、方法運行后質量監測這幾方面展開。

　　臨床LC-MS/MS實施流程包括樣品檢測與運輸、樣品接收、樣品制備、色譜分離、質譜檢測、數據計算與審核、結束報告，在具體實施中還需要考慮新LC-MS/MS臨床應用、評估方法可行性、方法開發。方法驗證、方法實施后監控這幾方面的因素。

　　CLSI C62-A指導原則是指導臨床實驗室減少室間波動、評估干擾、方法性能以及相關的臨床分析方法特征。指導原則強調質譜技術方法開發及方法驗證的標準化程序。其主要內容包括LC-MS儀器重要特征、影響方法性能的分析前因素、方法校準、方法開發重要的分析變量、方法驗證、質量保證和質量控制、臨床方法實施后的監測。

　　李水軍帶來的《質譜技術在轉化醫學中的作用和創新開發》的演講報告中指出了我國的醫療現狀，老齡化程度加劇、慢性疾病持續增加，死亡率也在不斷增長。慢性病已成為我國居民健康的主要威脅因素，2012年的統計數據顯示，18歲以上的糖尿病患病率達到9.7%；心腦血管疾病的死亡率達到271.8例/10萬；40歲以上的慢性阻塞性肺病達到9.9%；18歲以上的高血壓人群達到25.2%；2010牛按腫瘤發病率達到286例/10萬，死亡率達到181例/10萬。

　　其中維生素缺乏也成為較普遍的狀況，25羥基維生素D（25OHD）是維生素D營養狀況的最佳指標。近年來，25OHD檢測呈爆發式增長，現有檢測方法包括Radioimmunoassays（RIA）、Enzyme immunoassay（EIA）、HPLC和LC-MS/MS。

　　另一方面，在心血管疾病的檢測中Hcy是極其重要的，是冠狀動脈疾病死亡的預測因子。Hcy的致血管損傷機制尚不明確，能直接對血管內皮細胞有毒性作用，導致血管炎癥，加速氧化LDL。2007年我國首個獲得SFDA批準的具有自主知識產權的液相色譜串聯質譜Hcy體外診斷試劑盒面試，可用于對Hcy的檢測。

上海市徐匯區中心醫院 張夢琪

　　上海市徐匯區中心醫院張夢琪帶來《實驗室自建LC-MS/MS檢測項目方法開發及驗證》的精彩報告。報告指出，實驗室自建LC-MS/MS檢測項目的方法開發包含目標物分析、文獻檢索、質譜方法、液相方法、樣品處理方法和基質效應；實驗室自建LC-MS/MS檢測項目的方法驗證則包含污染、校正品和質控品、殘留、干擾、基質效應/提取效率、定量限/精密度、試劑/樣品穩定性、準確度等方面。

上海市徐匯區中心醫院中心實驗室副主任藥師 劉罡一

　　上海市徐匯區中心醫院中心實驗室副主任藥師劉罡一帶來《質譜技術在體外診斷試劑研發申報中的基本要求》的精彩報告。體外診斷試劑研發申報囊括了產品預期用途、產品所采用技術原理、臨床適應癥背景情況、臨床或實驗室診斷方法、主要原材料來源及制備方法、主要生產工藝過程、質控品/標準品的制備方法及溯源情況等。

上海市公安局物證鑒定中心 張玉榮

　　上海市公安局物證鑒定中心的張玉榮帶來《液質聯用技術檢測濫用藥物和毒物》的精彩報告。報告介紹了使用液質聯用技術對現場物證的藥物和毒物檢測情況和檢測方法。

司法部司法鑒定科學技術研究所法醫毒物化學研究室主任 卓先義

　　司法部司法鑒定科學技術研究所法醫毒物化學研究室主任卓先義帶來《藥物中毒現狀及檢測技術》的精彩報告。毒物是指在一定條件下以較小劑量進入機體，通過化學或物理化學作用，引起機體功能性或器質性損害甚至導致死亡的化學物質，毒物與藥物沒有明確界限。其檢測需求主要在于臨床急診、職業病防治、醫療糾紛或事故、司法鑒定等。

衛生部北京老年醫學研究所 董軍

　　衛生部北京老年醫學研究所的董軍研究院帶來《代謝組學與慢病危險預測》的精彩報告。報告指出，中國多種慢性病死亡率高于其他G20國家，而大多數慢性病或其致因是可預防的。代謝組學是指在一定條件下對生物體或體內某一特定組織或體液所包含的所有代謝產物（＜1500Da）的定性定量分析，并研究該代謝物組在外界干擾或自身病理生理誘導下的動態變化規律。代謝組學多借助NMR、質譜等現代分析儀器對生物樣本進行檢測，可用于生物標志物的發現、疾病早期診斷和預防、藥物或營養干預的評價、藥物毒性評價、代謝工程研究等。

　　近年來質譜技術的飛速發展為代謝組學研究奠定了良好的基礎，通過代謝組學更加全面地鑒別代謝特征，揭示帶血族的復雜性所包含的豐富信息，以發現臨床生物學標記物。

復旦大學附屬中山醫院檢驗科副主任 郭瑋

　　復旦大學附屬中山醫院檢驗科副主任郭瑋帶來《液相色譜-串聯質譜在臨床激素檢測中的應用》的精彩報告。報告指出，LC-MS/MS是檢測小分子激素的重要監測方法，可以建立更多、更敏感、更特異的臨床檢測項目，軟/硬件提升將推動LC-MS/MS更廣泛的臨床應用。

賽默飛世爾科技 王立杰

　　賽默飛世爾科技的王立杰帶來《ThermoFisher質譜技術在臨床檢測中的應用》的精彩報告。報告指出，臨床檢測中質譜技術的應用面非常廣，在臨床研究/診斷方面包括體內維生素類目標物、體內激素類目標物、糖/鹽皮質激素類目標物、甲狀腺素類目標物、兒茶酚胺及其代謝物、代謝組學/蛋白組學；在治療藥物檢測方面可用于對強心苷、抗心律失常、抗癲癇藥、抗抑郁藥、免疫抑制劑、平喘藥、β受體阻滯劑、抗生素等；還可用于新生兒篩查、毒理學篩查等。

浙江佰辰檢驗所 高強博士

　　浙江佰辰檢驗所的高強博士帶來《質譜技術在精準醫療中的應用》的精彩報告。報告介紹了質譜技術在臨床檢驗中的應用、國內外質譜臨床檢驗應用的差異、質譜在臨床檢驗中的優勢、質譜分析樣本制備中的難點與解決方案、質譜技術在生物標記物開發中的應用、質譜技術在精準醫療中的應用。報告還分享了質譜在臨床中的實際案例。

南通大學附屬醫院醫學參考實驗室主任 王惠民

　　南通大學附屬醫院醫學參考實驗室主任王惠民帶來《利用同位素稀釋質譜法測定結果不確定度的評定》的精彩報告。

　　1997年CIPM的物質量咨詢委員會在巴黎召開的第六次會議上，確認了同位素稀釋質譜法、庫倫法、重量法、滴定法和凝固點下降法是具有絕對測量性質的方法。同位素稀釋質譜法（IDMS）具有質譜測量的高特異度和高靈敏度，以及化學計量的高精密度。元素周期表中大約80%的元素都可以用該法進行測量。

　　IDMS很少受到各種物理、化學因素的干擾，不需要用參考標準對儀器進行校準，影響測量不確定度的分量也較少。IDMS將成為參考方法（標準方法）的主流。