透射及掃描電鏡演示實驗

一、實驗目的：
1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結構及性能；
2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序；
3、了解電鏡樣品制備的配套設備。
二、實驗儀器及用品：
透射電鏡；掃描電鏡；小白鼠肝臟超薄切片；酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品；噴好金膜的葉片及花粉樣品
三、方法步驟：
（一）透射電鏡操作規程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規程，通過操作考試后才能正式上機操作。
2、操作程序
1）開機準備
（1）    合上總電源閘刀，開啟電子交流穩壓器，電壓指示應為220V。開啟循環水，溫度指示應為15-20℃。
（2）    開啟主機真空開關。
（3）    約20分鐘后，待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
2）工作程序
（1）開啟主機電源開關，待熒光屏顯示操作數據后再進行下一步。
（2）逐級加高壓致所需電壓，每加一級高壓，必須等高壓表中指示針停止擺動才能加下一級。如指示針移出量程，必須從zui低移級加起。
（4）    根據說明書要求進行合軸操作，使儀器處于zui佳操作狀態。
（4）根據說明書的操作要求進行觀察、換樣和拍照。
（5）作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3）關機程序
（1）關燈絲電流。
（2）關高壓。
（3）關主機電源開關。
（4）關真空開關。
（5）    20分鐘后，關循環水和電子交流穩壓器開關。
（6）    關閉總電源。
（二）掃描電鏡操作規程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規程，通過操作考試后才能正式上機操作。
2、操作程序
1）開機準備
（1）合上總電源閘刀，開啟電子交流穩壓器，電壓指示應為220V。開啟冷卻循環水裝置電源開關。
（2）開啟試樣室真空開關（VACUUM POWER），開啟試樣室準備狀態開頭（STAND BY）。
（3）開啟控制柜電源開關（POWER）.
（4）約20分鐘后，往試樣室液氮冷井中加入液氮。
2）工作程序
（1）開啟試樣室進氣閥控制開關（CHAMB VENT），將試樣放入試樣室后將試樣室進氣閥控制開關（CHAMB VENT）關閉抽真空。
（2）開啟鏡筒真空隔閥。
（3）加高壓（ACCELERATION POTENTIAL）至25KV.
（4）加燈絲電流（FILAMENT）至7.5-8.
（5）調節顯示器對比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）至適當位置.
（6）將圖象選區開關撥至全屏（FULL）.
（7）調節聚焦旋鈕（MEDIUM）和(FINE)至圖象清晰。
（8）選擇適當的掃描速率（SCAN RATE）觀察圖象。
（9）根據說明書的操作要求進行觀察和拍照。
（10）作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3）關機程序
（1）關燈絲電流（FILAMENT）。
（2）關高壓（ACCELERATION POTENTIAL）。
（3）反時針調節顯示器對比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）到底.
（4）關閉鏡筒真空隔閥。
（5）關主機電源開關。
（6）關真空開關。
（7）20分鐘后，關循環水和電子交流穩壓器開關。
（8）關閉總電源。
四、觀察結果：
1、小白鼠肝臟超薄切片：一般可見細胞膜、核膜、內質網、線粒體、肌纖維等結構。
2、酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品：由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負的反差，從而襯托出樣品的形態和大小。酵母菌近球型，有時可見出芽生殖；乳酸桿菌為桿狀。
3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾，下表皮可見氣孔器形態
4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發溝和紋飾。
觀察過程中尋找典型部位進行拍照。