①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,*后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體
②酶標記的抗原或抗體
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
優點:免疫學檢測技術具有檢測速度快、費用低廉、儀器簡單易攜、靈敏度高和選擇性強等優點,可用于現場檢驗。它將酶催化反應的放大作用和抗原抗體親和反應的高度專一性、特異性相結合,以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑進行免疫測試,所以具有很高的靈敏度。
缺點:1.只是診斷的輔助手段,特異性和靈敏性有待提高。
2.操作過程有些繁瑣,反應血藥時間,不能一蹴而就。
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