酸化丙酮／甲醇沉淀法實驗

試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇

實驗步驟

材料

鹽酸（高純；如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)

丙酮（高純；如 Aldrich 的金標級)

甲醇（高純；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)

操作程序

本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecular Biology —書改進而成的

1) 配制酸化丙酮：

丙酮                     120 ml

HCl                       10ul

混合，制成1mmol/L 溶液。

2) 配制沉淀劑：將等體積的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷凍。

3) 真空離心，將蛋白質溶液濃縮至少于 0.1 ml。

4) 加入過 5 倍量（按體積）的沉淀劑于蛋白質水溶液。徹底混勻，在-20℃ 冰箱中孵育過夜。

5)4°C 下，用微型離心機的以最高轉速離心 30 min。

6) 用精細的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通風櫥中，用氮氣吹 1h，至干。