高效液相色譜柱的使用

高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經濟損失。
    高效液相色譜柱使用一段時間后,常遇到柱子被污染,柱效會有一定程度的下降,采用適當的方法對色譜柱進行保護,可以延長色譜柱的使用壽命。樣品和流動相的處理:溶解的樣品進樣前用濾膜過濾,以除去不溶物。如果必要,需進行樣品的預處理。流動相中如有不純物質將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動相使用前用微孔薄膜過濾。在流動相的輸液管前安裝過濾器。過濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵塞嚴重的過濾器,可在火焰上灼燒后再清洗。保護柱(預柱)的使用:對于較昂貴的色譜柱,可以在柱前加一保護柱,防止樣品中雜質污染分析柱,對于制備柱,因其進樣量大,使用保護柱尤為重要。
   
高效液相色譜柱的使用注意事項：
    色譜柱的柱效和保護柱
    拿到一根新柱時，一定要先看其使說明，然后測柱效，定期檢測柱效， 保留在新色譜柱上得到的色譜圖，并記錄條件， 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應用于在線監測， 應對色譜柱提供在線的物理保護和化學保護， 例如采取安裝在線過濾器， 自裝填料保護柱和預裝保護柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計，優點是基本不影響柱效， 在需要高柱效的時候常用， 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護柱的作用是防止柱子被化學污染。 缺點是多數保護柱影響色譜柱的柱效， 特別是在用微柱時，常用的是普通 自裝填料的保護柱。
    色譜柱的清洗
    對所做的樣品要有充分的了解，用對該樣品洗脫能力最強的流動相清洗，對于硅膠柱，先用甲醇洗去極性雜質，然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷 1 0 0 - 2 0 O r aL依次活化，對于鍵和相柱，一般用甲醇一lvfang一甲醇一水依次沖洗，每種色譜柱有特定的清洗方法，一定要看其使用說明
    色譜柱的存放
    存放前除去雜質和鹽，采用合適的存放溶劑，避免色譜柱床的干枯，避免機械振動，防止細菌生長，注意存放的溫度。