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實驗步驟在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。純化過程可能已將某一雜質的濃度降低到檢測下限以下，但色譜峰中還有殘留。毫無疑問，表觀純度取決于所選擇的測定方法及其靈敏度。由于大多數分離方法都能夠有效地去除非蛋白質類雜質，因此本章節將主要介紹蛋白質樣品中蛋白質類雜質的檢測方法。有關核酸、脂類、碳水化合物雜質的檢測方法在本系列其他卷中有所介紹。隨著蛋白質類生物制品的流行, 蛋白質純度已經成為藥品管理的重大問題。人用藥品注冊技術要求國際協調會 (TheInternationalConferenceonHarmonisation,ICH) 關于生物制品的質量指導原則（ICHQ6B，1998......閱讀全文
實驗原理： 蛋白質含量測定法，是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法，即定氮法、雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法，即考馬斯亮藍法（Bradford法）。其中Bra
蛋白質純度測定實驗 實驗步驟 在評價樣品
實驗原理：蛋白質含量測定法，是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法，即定氮法、雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法，即考馬斯亮藍法（Bradford法）。其中Bradford法
摘要：本文圍繞蛋白質純度的重要性，闡述了蛋白類雜質的檢測方法，包括電泳法，色譜法，沉降速率測定法，質譜法，光散射法。任何方法都不能直接定量蛋白質樣品的純度。無論最終目的是為了解釋分析數據、驗證過程質量，還是為了確保生物制劑產品的安全性，樣品純度的測定都是至關重要的環節。隨著蛋白類生物制品的發展，蛋白
出色的重復性和超高分辨率 CE-WCID（全柱成像毛細管等電聚焦電泳儀）具有超高的蛋白質pI點的分辨率(△pI<0.01)，這個指標無人能比。 蛋白質pl點的測定舉例：△pI<0.01，7分鐘完成實驗 蛋白質藥物主要成分和降解產物的pl點測定和重復性的考
一、實驗目的和內容目的: 學習考馬斯亮藍（Coomassie Brilliant Blue）法測定蛋白質濃度的原理和方法內容：制作測定蛋白質濃度的標準曲線。制作標準曲線是生物檢測分析的一項基本技術。一般用分光光度法測物質的含量，先要制作標準曲線，然后根據標準曲線查出所測物質的含量。考馬斯亮藍法測定蛋
方法制樣的方法根據所選用電泳方法的性質而定。讀者可參考本卷其他章節中有關非變性凝膠電泳和等電聚焦電泳的討論。最常用的 SDS 凝膠電泳是蛋白質純度檢測的「第一線」(front-line) 方法。由于通常純度評價是非定量的，因此不需要關心諸如極端大小分子的非線性遷移、蛋白質修飾造成的遷移異常以
2013年4月24-26日，第四屆中國上海化學與藥物結構分析會議(CPSA Shanghai 2013)于在上海浦東淳大萬麗酒店召開。本屆會議的主題是“利用轉化科學、監管效率和創新模式振興
實驗原理蛋白質分子中所含酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，使蛋白質在280nm波長處有最大吸收值。在一定濃度范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量成正比關系，可用作定量測定。紫外線吸收法測定蛋白質含量的優點是迅速，簡便，不消耗樣品，低濃度鹽類不干擾測定。因此，廣泛應用在柱層析分離中蛋白
1.DNA電泳與溴化乙錠 “DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑，具有高致癌性，會在60～70 cc蒸發，所以在
1.DNA電泳與溴化乙錠 “DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑，具有高致癌性，會在60～70 cc蒸發，所
1.DNA電泳與溴化乙錠“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑，具有高致癌性，會在60～70 cc蒸發，所以在學生
1.DNA電泳與溴化乙錠“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑，具有高致癌性，會在60～70 cc蒸發，所以在學生實驗
實驗原理考馬斯亮藍（Coomassie Brilliant Blue）法測定蛋白質濃度，是利用蛋白質―染料結合的原理，定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法。這種蛋白質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點，因而正在得到廣泛的應用。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質測定法。考馬斯亮蘭G-250染料
摘要 隨著分子生物學的發展，不論對酶分子本身作用機制的研究以及其他研究，越來越需要純度很高的酶制劑，這就要求我們熟悉酶提純的一般操作及酶的提純及活力測定等重要的生物實驗技術，本次實驗主要是提取啤酒酵母中的蔗糖酶并測定其Km。在試驗過程中用乙醇分級沉淀法，DEAE-Cellulose柱層析，分子篩層析
實驗 植物體內可溶性蛋白質含量的測定植物體內的可溶性蛋白質大多數是參與各種代謝的酶類，測其含量是了解植物體總代謝的一個重要指標。在研究每一種酶的作用時，常以比活（酶活力單位／mg蛋白）表示酶活力大小及酶制劑純度。因此，測定植物體內可溶性蛋白質是研究酶活的一個重要項目。常用測定方法有Lowry法和考馬
食品中蛋白質含量的多少是評價糧油食品品質、營養價值的重要指標。測定某些糧食蛋白質的含量，可以做到充分發揮糧油資源的作用，促進合理用糧，節約用糧，對提高糧油資源的利用率具有重要的意義。 以凱氏定氮法為代表的測定含氮量換算蛋白質的方法操作簡單、測定結果的準確度和精密度較高，適宜于測定任何形態（固體
【目的】掌握BCA法測定蛋白質濃度的原理。【原理】BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他 試劑組成的 試劑 ，混合一起即成為蘋果綠，即BCA工作試劑。在堿性條件下，BCA與蛋白質結合時，蛋白質將Cu2+ 還原為Cu+ ，一個Cu+ 螯合二個BCA分子，工作試劑由原
【實驗原理】蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中為帶電的顆粒，在電場中能向正極或負極移動。當溶液pH值大于蛋白質等電點時，蛋白質帶負電荷，在電場中向正極移動；反之則向負極移動，這種帶電的顆粒在電場中泳動的現象稱為電泳（electrophoresis）。不同的蛋白質由于等電點不同，在電場中的泳動速率也不
一、 相關理論1、 血清（漿）蛋白質是血清（漿）固體成分中含量最多、組成復雜、功能廣泛的一類化和物。2、 血清（漿）蛋白質的分類：目前已研究的有300 余種，已分離提純的有100 余種，大部分在肝臟合成。1） 鹽析法可將血漿蛋白分為白蛋白（Albumin, Alb 或A）和球蛋白（Globulin,
實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、
Edman降解法 實驗方法原理 主要有質譜法，利用蛋白質測序儀進行測序以及利用蛋白質對應DNA或m
實驗原理具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆有雙縮脲反應。在堿性溶液中雙縮脲與銅離子結合形成復雜的紫好色復合物。而蛋白質及多肽的肽鍵與雙縮脲的結構類似，也能與Cu2+形成紫紅色絡合物，其最大光吸收在540nm處。其顏色深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質的分子量及氨基酸的組成無關，該法測定蛋白質的濃度范圍
實驗概要植物體內的可溶性蛋白質大多數是參與各種代謝的酶類，測其含量是了解植物體總代謝的一個重要指標。在研究每一種酶的作用時，常以比活（酶活力單位／mg蛋白）表示酶活力大小及酶制劑純度。因此，測定植物體內可溶性蛋白質是研究酶活的一個重要項目。常用測定方法有Lowry法和考馬斯亮藍G-250染料結合法。
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品，配制成1~2毫升溶液，裝入分析池，以幾小時的分析離心，就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析，亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小，作樣品純度檢定和不均一性測定，以組分的相對含量測定。
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置，核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統（根據需要選配）和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于
硫酸銨沉淀法 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同
實驗目的：測定蛋白質亞基的分子量及純度 實驗原理：在樣品介質和聚丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強還原劑后，蛋白質亞基的點泳遷移率主要取決于亞及分子量的大小，而電荷因素可以被忽略。當蛋白質的分子量在15KD到200KD之間時，電泳遷移率與分子量的對數呈線性關系，可以用來測定蛋白質亞基的分子量。
抗血清的制備 【原理】：用抗原刺激機體可以產生抗體，抗原的性質、純度和活性影響其免疫動物后獲得的抗體的的特異性和效價。在體外有目的的制備抗原，經初次、再次免疫的過程可以獲得高質量的抗體。 【注意事項】 ①制備佐劑時，一定要順著同一方向用勁磨。 ②檢查油包水的方法：培養皿內加水，滴入混勻液
實驗概要本實驗用福林酚法(Folin—酚試劑法)測定了蛋白質的含量。實驗原理Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Folin—酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏