高錳酸鉀(potassium permanganate)可以與脂類反應,增強膜結構的反差。可以保存DNA和糖原,但有一定的抽提作用,幾乎無法固定細胞內的顆粒性或纖維狀結構,可能會引入一些假象。穿透性強,適用于有厚細胞壁或蠟質層包被的植物及昆蟲樣品。使用時可以不加緩沖液,固定時間不宜太長,,0.5-1.0%高錳酸鉀溶液固定30分鐘到2小時。......閱讀全文
高錳酸鉀(potassium permanganate)可以與脂類反應,增強膜結構的反差。可以保存DNA和糖原,但有一定的抽提作用,幾乎無法固定細胞內的顆粒性或纖維狀結構,可能會引入一些假象。穿透性強,適用于有厚細胞壁或蠟質層包被的植物及昆蟲樣品。使用時可以不加緩沖液,固定時間不宜太長,,0.5-1
甲醛分子中只有一個碳原子,含有一個醛基,分子式為$CH_2O$,分子量為30。市面上雖然有多種形式的甲醛溶液出售,但它們含有少量的甲酸和甲醇,對被固定的樣品產生不良影響,適合電鏡固定使用的只有通過由多聚甲醛(paraformaldehyde)新鮮制備的甲醛溶液。甲醛溶液的毒性很大,即使是稀釋液也要格
醋酸鈾(uranyl acetate)}既是一種固定劑又是一種染色劑。它可以與磷酸基團反應,從而固定DNA和RNA,以及含有磷酸基團的磷脂,從而對膜結構的保存有幫助。另外,它可以與蛋白中的酸性基團(如天冬氨酸殘基、谷氨酸殘基)和堿性基團(如賴氨酸殘基)反應,從而起固定蛋白的作用。但醋酸鈾不能很好得保
重鉻酸鉀(potassium dichromate)在固定中有兩種作用,一是緩沖作用,二是固定作用,幫助保存脂類和糖類。在處理神經組織樣品時,因為重鉻酸鉀能很好地保存髓磷脂,可與四氧化鋨配合使用,作為第二重固定劑。但需要注意的是,重鉻酸鉀是一種致癌物質,應小心操作。
甲醛作為固定劑有如下特點:由于甲醛的分子量小,它的穿透能力比戊二醛強,反應溫和,可用于細胞組織化學研究的前固定。而且它不象戊二醛有兩個醛基,引入較少的游離醛基到組織細胞中,因而在一些細胞組織化學研究中更有利。但它的反應是部分可逆的,對細胞基質保存差,脫水后大部分基質丟失,所以不少實驗室不單獨使用甲醛
戊二醛是一種五碳醛,含有兩個醛基。分子式為$C_5H_8O_2$,分子量為100。電鏡固定通常用市售的25%的戊二醛水溶液稀釋成需要的濃度。其pH為4.0$\sim$5.0。氧氣、高溫、中性或堿性pH均能使戊二醛發生聚合失去醛基,并降低交聯效力,所以平時這種原液應保存在低溫處。此外戊二醛存放時間過長
丙烯醛(acrolein)是一種三碳醛,含有一個醛基和一個雙鍵。它比甲醛和戊二醛活潑,滲透組織的速度也比甲醛和戊二醛快。它可以很好地保存蛋白和磷脂,最好作為甲醛或戊二醛固定液的添加劑使用。通常使用市售密封的100%丙烯醛液體,固定時使用的濃度小于1%。它溶于水的速度慢,毒性很大,著火點低,儲存和使用
丹寧酸(Tannic acid)是一種從植物中提取的物質,泛指五倍子酸(gallic acid)糖苷或多聚糖苷。大分子很難滲透到組織中,因此電鏡中使用低分子量的丹寧酸。丹寧酸既是一種強的固定劑,能固定許多蛋白以及糖類衍生物,又是一種媒染劑,能增強對重金屬(如鈾、鉛)的吸收,從而增強樣品反差,特別是細
四氧化鋨(Osmium tetroxide)四氧化鋨是一種很強的氧化劑,呈淺黃色結晶,分子量254,飽和水溶液的濃度為7.24%,它的水溶液為中性,有極大毒性。市售有密封的四氧化鋨晶體和四氧化鋨水溶液兩種。四氧化鋨晶體溶于水的速度很慢,必要時可以使用超聲波設備來加速溶解。市面上也有已經配制好的2%四
1、酒精(ethyl,alcohol)常用95%酒精及純酒精。酒精穿透力強,固定時間常在1小時以內。高濃度酒精有使材料收縮的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必須要用普通酒精即95%的酒精,絕不可用純酒精。酒精為還原劑,不能與鉻酸、鋨酸、重鉻酸鉀等氧化劑配合。酒精可使核酸,蛋白質及肝醣等發生