TUNEL細胞凋亡試劑盒內容及操作步驟
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法（TUNEL法）細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用下，與生物素或地高辛標記的核苷酸結合，最終借助與卵白素或抗地高辛抗體結合的熒光素或HRP，使凋亡細胞被特異性地標記和顯示出來。TUNEL細胞凋亡試劑盒由美國羅氏公司提供試劑1： 酶濃縮溶液（Enzyme Solution） 試劑2： 標記溶液（Lable Solution） 試劑3： 轉化劑-POD（Converter-POD） 酶標記抗熒光素抗體（即用型）試驗所需其它試劑： 非石蠟切片: ·沖洗緩沖液:磷酸鹽緩沖液（PBS） ·阻斷溶液:0.3%H2O2甲醇溶液 ·固定溶液:4%多聚甲醛（溶劑pH7.4新鮮配制的PBS溶液） ·......閱讀全文
細胞凋亡檢測實驗——TUNEL法
實驗方法原理脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下，過氧化物酶可產生很強的顏色反應，特異準確
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒說明
TUNEL?(TdT?mediated?dUTP?Nick?End?Labeling)是檢測細胞凋亡的經典方法。本試劑盒采用TUNEL法，應用高活性的基因重組末端脫氧核糖核苷酸轉移酶（Terminal?Deoxynucleotidyl?Transferase,?TdT）在凋亡細胞斷裂的DNA?3’-
細胞凋亡（TUNEL，TUNEL染色）檢測技術
細胞凋亡是指為維持內環境穩定，??生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下，其死亡途徑被激活，并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程。細胞凋亡是程序性死亡過程的一種主要形式，它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞聯系中斷、內質網與細胞膜融合，最終細胞片段化形成許多
TUNEL細胞凋亡試劑盒內容及操作步驟
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法（TUNEL法） 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
TUNEL細胞凋亡試劑盒內容及操作步驟
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用
TUNEL細胞凋亡試劑盒內容及操作步驟
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法)?細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下，與生物素或
TUNEL細胞凋亡試劑盒內容及操作步驟
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法（TUNEL法）細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是；細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用
2－TdT原位凋亡檢測(TUNEL法)試劑盒說明
DNA斷裂是細胞凋亡的重要特征，在凋亡初期，DNA可斷裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段；晚期則可進一步在核小體間斷裂，形成180-200bp的DNA斷裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling，末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUT
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
? ? ? ?細胞凋亡中染色體DNA的斷裂是個漸進的分階段的過程，染色體DNA首先在內源性的核酸水解酶的作用下降解為50-300kb的大片段。然后大約30?﹪的染色體DNA在Ca?2?和Mg2?依賴的核酸內切酶作用下，在核小體單位之間被隨機切斷，形成180～200bp核小體DNA多聚體。??????
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
原理 在細胞凋亡的過程中，基因組DNA會斷裂產生雙鏈、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，這些DNA鏈的缺口可以利用沒標記法來識別。試劑盒就是通過催化DNA斷端，來標記缺口。酶底物顯色后，可以光鏡檢查被染色的細胞。
hoechst－和tunel法檢測細胞凋亡的區別
hoechst法看凋亡，主要是看sub-G1期的細胞數量。原理就是凋亡的細胞，由于DNA正在降解，所以含量比正常細胞要少。在以PI熒光強度（代表DNA量）為橫坐標的柱狀圖上，一般會有2個峰，G1和G2，G1就是正常細胞，G2是正在分裂的2倍體。2者間是S期細胞。如果有凋亡的細胞，在G1前會有細胞出現
TUNEL細胞凋亡檢測程序
實驗概要本實驗用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒檢測了組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。實驗原理其原理是熒光素（fluorescein）標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
TUNEL－法測凋亡技術操作步驟
一、TUNEL檢測原理??????TUNEL?細胞凋亡檢測試劑盒是采用非同位素方法來檢測細胞在凋亡過程中DNA?的斷裂情況，可在原位快速準確地檢測單個凋亡細胞。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細胞樣本（細胞涂片）的凋亡原位檢測。?????其原理是細胞凋亡發生時，內源性核酸酶激活，
TUNEL－法測凋亡技術操作步驟
TUNEL 法測凋亡操作步驟 一、TUNEL檢測原理 TUNEL 細胞凋亡檢測試劑盒是采用非同位素方法來檢測細胞在凋亡過程中DNA 的斷裂情況，可在原位快速準確地檢測單個凋亡細胞。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細胞樣本（細胞涂片）的凋亡原位檢測。
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和經驗總結
一、TUNEL法的實驗原理細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端，從而可進行凋亡細胞的檢測，這類方法稱為脫
羅氏TUNEL細胞凋亡檢測程序
一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素（fluorescein）標記的 dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的（1）石蠟包埋的組織切片預處理：將組織切片置于染色缸中,用二甲苯洗兩次,每次5min.用無水乙醇洗兩次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室溫水解15min,去除組織蛋白.用蒸餾水洗4
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的（1）石蠟包埋的組織切片預處理：將組織切片置于染色缸中,用二甲苯洗兩次,每次5min.用無水乙醇洗兩次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室溫水解15min,去除組織蛋白.用蒸餾水洗4
羅氏公司TUNEL細胞凋亡檢測程序
（In situ cell death detection kit-POD法）一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素（fluorescein）標記的dU
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的
TUNEL染色凋亡細胞是什么顏色的（1）石蠟包埋的組織切片預處理：將組織切片置于染色缸中,用二甲苯洗兩次,每次5min.用無水乙醇洗兩次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室溫水解15min,去除組織蛋白.用蒸餾水洗4
Tunel－Procedure－in－Bovine－Embryos－牛胚胎TUNEL檢測凋亡
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution:?Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go highe
一步法TUNEL細胞凋亡檢測技巧及常見問題分析
1. 對于貼壁細胞或細胞涂片： a. PBS或HBSS洗滌一次。b. 如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。c. 用碧云天生產的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定細胞30分鐘。d. 用PBS或HBSS洗滌一次。e. 加入碧云天生產的免疫染色強力通透液或含0.3% Triton X-100的PB
凋亡聚焦：選擇合適的TUNEL分析
考慮檢測方法 TUNEL分析一般采用顯色法或熒光檢測法。每一種都有其各自的優缺點，因此選擇哪一種取決于您的需求。熒光檢測感更為靈敏，但難以保留信號。由于成像時的光漂白，且隨著時間的流逝，熒光信號會逐漸喪失。熒光信號也會有更高的背景問題，這要取決于組織類型。顯色分析適用于組織切片，因為可以使
流式細胞儀檢測實驗用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
流式細胞儀檢測實驗_用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
流式細胞術定量檢測細胞凋亡3種方法的比較研究
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
流式細胞術定量檢測細胞凋亡的3種方法研究比較
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
ELISA法測細胞凋亡
細胞凋亡時，Ca2+,Mg2+離子依靠的內源性核酸內切酶將雙鏈DNA從各核小體間連接區裂斷，發生單或寡合苷酸小體，各核小體的DNA與核組蛋白H2A,H2B,H3,H4構成嚴密的復合物而對內源性核酸酶有抵抗使之不被內源性核酸酶裂解。主要運用單克隆抗DNA抗體和抗組蛋白抗體直接檢測DNA和組蛋白。愈加安
ELISA法檢測細胞凋亡
（一）?原理細胞凋亡的發生，是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結構，可特
定量分析晚期細胞凋亡中DNA片段的直接方法
多細胞生物是由高度組織化的細胞群落組成的，為了這個細胞群落的茁壯成長，重要的是1.通過復雜的細胞過程，如細胞增殖和凋亡，2.建立穩態。這兩個過程中任何一個過程的不適當轉變都會導致疾病。例如，神經元凋亡活性的增加是各種神經退行性疾病如阿爾茨海默氏癥和帕金森氏癥的根源。相反，凋亡機制的喪失會導致細胞過度