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  • 分子標記——AFLP原理和操作步驟

    一、原理AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順序和接頭順序就作為以后PCR反應的引物結合位點。實驗中,根據需要通過選擇在末端上分別填加了1~3個選擇性核苷的不同引物,可以達到選擇性擴增的目的。這些選擇性核苷酸使得引物能選擇性地識別具有特異配對順序的內切酶片段,進行結合,導致特異性擴增。二、實驗試劑Taq酶、EcoRI/ MseIEcoRI/MseI接頭、E+A引物M+C引物、T4DNALigaseE和M引物、瓊脂、過硫酸胺、丙烯酰胺、尿素、硝酸銀、甲酰胺、 dNTPs、 二甲苯青、冰醋酸、玻璃硅烷、50bpMark三、操作步驟(一) 基因組DNA提取和純化A 、參考實驗一的大量提......閱讀全文

    分子標記

    內容:一、遺傳標記?二、DNA分子標記?三、染色體原位雜交?四、DNA分子標記的應用?長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如產量等;或多基因控制的質量性狀,如抗性等

    分子標記的概念

      分子標記(Molecular Markers),是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是DNA水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態學標記、生物化學標記、細胞學標記相比,DNA分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的性狀的選擇十分便利;基因組變異極其

    分子標記的簡介

      分子標記(Molecular Genetic Markers)是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是 DNA 水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態標記、同工酶標記、細胞標記相比,DNA 分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的農藝性狀的選擇十分便

    分子標記的概述

      分子標記的概念有廣義和狹義之分。廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。狹義分子標記是指能反映生物個體或種群間基因組中某種差異的特異性DNA片段。  分子標記(Molecular Markers),是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是DNA水平遺傳多態性的直接的

    AFLP分子標記實驗

    其基本原理是:以PCR(聚合酶鏈式反應)為基礎,結合了RFLP、RAPD的分子標記技術。把DNA進行限制性內切酶酶切,然后選擇特定的片段進行PCR擴增(在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭”,用與接頭互補的但3-端有幾個隨機選擇的核苷酸的引物進行特異PCR擴增,只有那些與3-端嚴格配對的片

    分子標記的技術展望

      分子標記技術已飛速發展,并被廣泛應用于動植物的遺傳研究中。分子標記中的已在玉米、大豆、雞、豬等動植物育種和生產中有許多應用研究,主要集中在基因定位、輔助育種、疾病治療等方面的應用研究工作,取得了一些應用成果。分子標記技術的開發是分子生物學領域研究的熱點。隨著分子生物學理論與技術的迅猛發展,必將研

    常用的幾種分子標記

    RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。?SSR 真核生物

    分子生態學顯性標記

    中文名稱:顯性標記學? ? ? ?科:生物學解? ? ? ?釋:分子標記中,顯性和共顯性,對等位基因而言,即指所擴增的PCR產物(DNA片段)。像RAPD、ISSR等顯性標記,PCR產物無法確切確定,因而無法區分雜合體(heterozygosity),只能按有帶無帶進行分析,記錄為0/1;而SSR等

    分子標記基于圖譜克隆基因

      圖位克隆(Map—bascd cloning))是近幾年隨著分子標記遺傳圖譜的相繼建立和基因分子定位而發展起來的一種新的基因克隆技術。利用分子標記輔助的圖位克隆無需事先知道基因的序列,也不必了解基因的表達產物,就可以直接克隆基因。圖位克隆是最為通用的基因識別途徑,至少在理論上適用于一切基因。基因

    分子間相互作用分析:熒光標記VS無標記

    同無標記技術相比,利用熒光技術檢測分子間相互作用的實驗成本較低,例如熒光共振能量轉移和凝膠遷移實驗,無需昂貴的儀器便可完成結合分析。然而,基于熒光標記的檢測技術也存在自己的局限性,像凝膠遷移實驗就只能用來檢測蛋白和核酸間的相互作用。那么在具體的實驗中,研究人員該如何選擇合適的檢測技術呢?不要著急,下

    分子生態學詞匯標記基因

    中文名稱:標記基因外文名稱:labelled gene專屬名詞:基因工程廣泛應用:分子生物學、細胞生物學選擇基因:選擇標記基因定義:標記基因,原本是基因工程的專屬名詞,但是它已經成為一種基本的實驗工具,廣泛應用于分子生物學、細胞生物學、發育生物學等方面的研究。標記基因是一種已知功能或已知序列的基因,

    分子遺傳學詞匯標記基因

    中文名稱:標記基因外文名稱:labelled gene定義:標記基因,原本是基因工程的專屬名詞,但是它已經成為一種基本的實驗工具,廣泛應用于分子生物學、細胞生物學、發育生物學等方面的研究。標記基因是一種已知功能或已知序列的基因,能夠起著特異性標記的作用。在基因工程意義上來說,它是重組DNA載體的重要

    分子生態學詞匯標記基因

    中文名稱:標記基因外文名稱:labelled gene專屬名詞:基因工程廣泛應用:分子生物學、細胞生物學選擇基因:選擇標記基因定義:標記基因,原本是基因工程的專屬名詞,但是它已經成為一種基本的實驗工具,廣泛應用于分子生物學、細胞生物學、發育生物學等方面的研究。標記基因是一種已知功能或已知序列的基因,

    分子遺傳學詞匯標記獲救

    中文名稱:標記獲救英文名稱:marker rescue定  義:帶突變標記的噬菌體和正常噬菌體感染宿主細胞,裂解產生的子代噬菌體中大多數為正常噬菌體,少數噬菌體則由于突變基因摻入了正常噬菌體的基因組而使突變標記得到保留,稱為標記獲救。應用學科:遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)

    分子標記—AFLP原理和操作步驟

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順序和接頭順序就作為以后

    理想的分子標記有哪些要求?

      理想的分子標記必須達以下幾個要求:⑴ 具有高的多態性;⑵ 共顯性遺傳,即利用分子標記可鑒別二倍體中雜合和純合基因型;⑶ 能明確辨別等位基因;⑷ 遍布整個基因組;⑸ 除特殊位點的標記外,要求分子標記均勻分布于整個基因組;⑹ 選擇中性(即無基因多效性);⑺ 檢測手段簡單、快速(如實驗程序易自動化);

    分子標記——AFLP原理和操作步驟

    一、原理AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順

    分子標記—AFLP原理和操作步驟

    AFLP可用于:(1)構建遺傳連鎖圖譜;(2)利用AFLP快速鑒別與目的基因緊密連鎖的分子標記;(3)AFLP輔助的輪回選擇育種;(4)研究基因表達與調控;(5)分類和進化研究;(6)甲基化研究等。實驗方法原理AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行

    分子標記的概念和方法特點

    分子標記(Molecular Genetic Markers)是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是 DNA 水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態標記、同工酶標記、細胞標記相比,DNA 分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的農藝性狀的選擇十分便利;

    分子標記——AFLP原理和操作步驟

    一、原理AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘末端順

    微衛星DNA分子標記及其應用

      微衛星(Microsatellite,MS)又稱短串聯重復(Short Tandem Repeats,STR)或簡單序列重復(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因組中以少數幾個核苷酸(多數為2-4個)為單位多次串聯重復組成的長達幾十個核苷酸的序列。其中最常見的是雙核苷酸

    PNAS揭示丙型肝炎標記分子

      生物通報道 來自美國國家衛生研究院的科學家們在丙型肝炎病毒感染者體內鑒別出了一些標記分子,基于這些標記分子研究人員或可預測疾病是否會從初期感染異常迅速地發展為嚴重肝臟疾病,如肝硬化。了解患者疾病是否有可能會迅速惡化可以幫助醫生確定最佳的治療過程。這一研究成果發布在《美國科學院院刊》(PNA

    綠色熒光蛋白分子標記的研究

      分子標記  作為一種新型的報告基因,GFP已在生物學的許多研究領域得到應用。利用綠色熒光蛋白獨特的發光機制,可將GFP作為蛋白質標簽(protein tagging),即利用DNA重組技術,將目的基因與GFP基因構成融合基因,轉染合適的細胞進行表達,然后借助熒光顯微鏡便可對標記的蛋白質進行細胞內

    分子生態學詞匯?遺傳標記

    遺傳標記是指在遺傳分析上用作標記的基因,也稱為標記基因。在重組實驗中多用于測定重組型和雙親型。作為標記基因,其功能不一定研究得很清楚但因突變性狀是明確的,所以容易測定。對于微生物雖多用與生化性狀有關的基因,但對高等生物則多用與形態性狀有關的基因。也有用著絲粒作為遺傳標記的。在微生物遺傳學中遺傳標記還

    分子生態學詞匯共顯性標記

    中文名稱:共顯性標記英文名稱:co-dominant marker定  義:同時能檢測出顯性和隱性等位基因,能夠區分純合和雜合基因型的遺傳標記。應用學科:生態學(一級學科),分子生態學(二級學科)

    分子標記方法:AFLP原理和操作步驟

    AFLP原理:AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的粘

    微衛星DNA分子標記及其應用(一)

    微衛星(Microsatellite,MS)又稱短串聯重復(Short Tandem Repeats,STR)或簡單序列重復(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因組中以少數幾個核苷酸(多數為2-4個)為單位多次串聯重復組成的長達幾十個核苷酸的序列。其中最常見的是雙核

    分子雜交技術的核酸探針標記法

    核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA

    微衛星DNA分子標記及其應用(二)

    3. 微衛星分子標記技術的應用 微衛星DNA 作為遺傳標記具有很大的優越性。近年來隨著研究的不斷深入,對微衛星標記的研究不僅具有重要的理論意義, 而且還具有較好的應用前景。3.1 微衛星多態性分析在自然界中,生物個體表現出來的各種遺傳變異,在本質上就是DNA 的差異,因此通過研究DNA的變異來分

    RAPD分子標記的實驗原理及操作流程

    RAPD標記RAPD技術的全稱是隨機擴增多態性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技術建立于PCR基礎之上,使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機引物,對基因組的DNA全部進行PCR擴增,以檢測多態性。由于整個基因組存在眾多反向重復序列,因此須對每一隨機

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