高效液相色譜儀基本原理、應用及常見故障
1、高效液相色譜儀的系統組成、工作原理 高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。 2、高效液相色譜儀的應用 高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相......閱讀全文
液相色譜質譜儀液相部分的維護
液相部分的維護??要求使用220V單相交流電。如發生斷電，不管任何原因造成的，首先關閉儀器面板左下角的開關，等待供電恢復10分鐘以上再開啟電源，否則有可能燒毀電路板。??儀器運行時需提供純度>99%的氮氣作為噴霧與干燥氣，輸出壓力為0.6～0.7MPa。??實驗開始前先檢查液氮罐液體存量是否充足。?
高效液相和超高效液相的區別
超高效液相系統耐壓更高，可以以更高的流速進行分析，并且在高流速下仍能保持很好的理論塔板數。高效指的就是效率更高，即在同樣的時間內可以分析更多的樣品。高效液相色譜是相對經典液相色譜來說的，高效液相色譜具有更細的流動相傳輸管路，內徑更細的色譜柱，從而使死體積變小，理論塔板數更高，分析時間更短。超高效就是
什么是氣相－液相
氣相屬于分配層析或吸附層析，僅適用于分析分離揮發性和低揮發性物質。固定相是在惰性支持物（如磨細的耐火磚）上覆蓋一層高沸點液體，如硅油、高沸點石蠟和油脂、環氧類聚合物。液相：均勻的溶液也是一個相，稱為液相。液相是物質呈現液體的狀態，且在這個系統里只有液體，沒有固相（即固體），也沒有氣體（即氣相：通常任
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能，在泵中產生氣泡使流速不穩，氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰，降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大，使紫外檢測器基線增高，低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
液相色譜流動相小議
一、液相色譜流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料（固定相）后，強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少，相應的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加，相應的容量因子k升高。因此，k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流
正相液相色譜方法
正相液相色譜方法建立的一般模式與反相液相色譜類似。正相液相色譜的色譜柱選擇范圍較寬，氰基柱通常是首選；與氰基柱相比，硅膠柱可獲得更大的值，適合于異構體和疏水性溶質的分離，但分析時必須嚴格控制流動相中水含量，也不適于梯度分離:二醇基柱和氨基柱穩定性較差，僅在其他類型正相色譜柱無法完成分離時采用；氧化鋁
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能，在泵中產生氣泡使流速不穩，氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰，降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大，使紫外檢測器基線增高，低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
什么是氣相－液相
氣相屬于分配層析或吸附層析，僅適用于分析分離揮發性和低揮發性物質。固定相是在惰性支持物（如磨細的耐火磚）上覆蓋一層高沸點液體，如硅油、高沸點石蠟和油脂、環氧類聚合物。液相：均勻的溶液也是一個相，稱為液相。液相是物質呈現液體的狀態，且在這個系統里只有液體，沒有固相（即固體），也沒有氣體（即氣相：通常任
什么是氣相、液相
氣相屬于分配層析或吸附層析，僅適用于分析分離揮發性和低揮發性物質。固定相是在惰性支持物（如磨細的耐火磚）上覆蓋一層高沸點液體，如硅油、高沸點石蠟和油脂、環氧類聚合物。液相：均勻的溶液也是一個相，稱為液相。液相是物質呈現液體的狀態，且在這個系統里只有液體，沒有固相（即固體），也沒有氣體（即氣相：通常任
液相流動相的使用
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力b、流動相具有一定惰性，與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。c、流動相的黏度要盡量小d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應e、流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行。f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。對于一根特定的色譜柱，要追求最佳柱效，最
液相色譜流動相脫氣
流動相的脫氣HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化，對分
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能，在泵中產生氣泡使流速不穩，氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰，降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大，使紫外檢測器基線增高，低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
液相色譜在液相檢驗中的應用方法
??? 液相色譜法是一種以液體為流動相的色譜法，液相色譜法是現在應用十分廣泛的一種液相色譜法，這種方法是20世紀60年代興起的，經過不斷的完善和發展，現已被應用于各個領域。在醫藥分析領域，液相檢驗的應用已經普及，而液相色譜法作為液相檢驗中的一種重要手段，也得到了大力的推廣與應用，目前實驗室常用的P2
液質流動相與液相流動相有什么不同
液質的流動相要求不能含有不揮發性的鹽類，如果非要加入的話，質譜要及時清洗。使用液相是因為要進行物質的結構確證。?
制備液相和一般液相的區別
制備液相主要特點1、 比玻璃柱安全迅速，分離速度高10倍，時間少于30min，換柱只須30秒；2、 使用40mm或80mm柱子制備量大，分離純度高，普通為0-50g；3、 成本低，流動相不需要前處理，樣品可固體上樣，耗品少，維修少；4、 重現性高，放大方便，可以達到公斤級；一般液相特點：1．高壓：一
高效液相色譜之高效反相液相色譜（二）
附：色譜柱操作說明，（以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例）1. 色譜柱常規參數訂貨號：Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如，Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
高效液相色譜之高效反相液相色譜（一）
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色
液相色譜的分類和高效液相色譜用途
制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊，沒有統一、明確的標準。 1、快速色譜 柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對于那些容易分離的簡單混
高效液相色譜之高效排阻液相色譜
高效液相色譜（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高壓、高速、近代液相色譜，通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法，到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面，現已成為分離純化蛋白質非常有效的方
液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中，溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中，溶劑的強度隨極性的增強而增加；在反相色譜中，溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑，如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
液相色譜流動相的貯存
流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液
做氣相液相的危害
作分析實驗相對來說主要的危害在于所處的環境，實驗室環境危害比較大，主要是前處理階段，酸堿鹽、有機溶劑接觸比較多，加上室內通風以便都比較差，帶來很大危害，也是有職業病：有機溶劑主要危害肝臟、肺。操作氣相色譜危害小點，但ecd注意最好少用，懷孕或生小孩子哺乳的不要用分析儀器，畢竟污染多，做完實驗離開實驗
液相色譜流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化，對分離或分析結果
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1）由強到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或緩沖溶液）進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍規則：每減少10％的有機溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加３倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況
液相色譜流動相不過濾
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
氣相色譜PK液相色譜
氣相和液相是有機檢測的兩大基本儀器，占據著有機實驗室的統治地位，雖然同做有機檢測，但就兩個儀器本身也有著較大區別，小析姐從以下5個方面進行了比較。 氣相色譜是二十世紀五十年代出現的一項重大科學技術成就。這是一種新的分離、分析技術，它在工業、農業、國防、建設、科學研究中都得到了廣泛應用。同為色譜技
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點： （1）流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 （2）流動相與樣品不產生化學反應 （3）流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的
氣相色譜PK液相色譜
氣相和液相是有機檢測的兩大基本儀器，占據著有機實驗室的統治地位，雖然同做有機檢測，但就兩個儀器本身也有著較大區別，小析姐從以下5個方面進行了比較。氣相色譜是二十世紀五十年代出現的一項重大科學技術成就。這是一種新的分離、分析技術，它在工業、農業、國防、建設、科學研究中都得到了廣泛應用。同為色譜技術之一