GSTpulldown技術
實驗概要本實驗詳細介紹了GST-pull down 技術的操作流程，主要包括：GST蛋白的大量制備，谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的處理，GST蛋白的結合，細胞裂解液的預清除及細胞裂解液的探測。實驗步驟1. 大量制備GST蛋白 1) 活化凍存菌種GST和GST-X：按1：50比例將表達蛋白的凍存菌液加入5ｍｌＬＢ（Ａｍｐ＋），37℃，140~150rpm培養過夜 2) 將過夜培養物按1：100比例接入200mlＬＢ（Ａｍｐ＋），220rpm，30℃培養至OD600=0.4-0.6 3) 以預實驗確定的最佳IPTG濃度、時間和溫度誘導表達靶蛋白。（IPTG 0.5mM，20℃，150rpm培養10~16小時） 4) 誘導適當時間后，4℃，5000g離心10min后棄上清。（如需要該步沉淀能保存在-80℃） 5) 重懸沉淀：......閱讀全文
GSTpull－down－技術
實驗概要本實驗詳細介紹了GST-pull down 技術的操作流程，主要包括：GST蛋白的大量制備，谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的處理，GST蛋白的結合，細胞裂解液的預清除及細胞裂解液的探測。實驗步驟1. 大量制備GST蛋白?? 1) 活化凍存菌種GST和GST-X：按1：50比例將表達蛋白的凍存菌液加入5
GSTpull－down－技術
實驗概要本實驗詳細介紹了GST-pull down 技術的操作流程，主要包括：GST蛋白的大量制備，谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的處理，GST蛋白的結合，細胞裂解液的預清除及細胞裂解液的探測。實驗步驟1. 大量制備GST蛋白?? 1) 活化凍存菌種GST和GST-X：按1：50比例將表達蛋白的凍存菌液加入5
?Touchdown－PCR技術的概況和特點
1、定義：又稱降落PCR.即選定一個溫度范圍，如50-35℃，每降1-2 ℃進行1-2個循環，然后在50度下進行15個循環。2.原理：隨著退火溫度的降低，特異性逐步降低，但特異性條帶在溫度較高時已經擴增出來，其濃度遠遠超過非特異性條帶，隨著退火溫度的降低，特異性條帶優先被擴增。? ??3.選擇初始復
免疫共沉淀和GST－pull－down技術各有何優勢
免疫共沉淀的話蛋白質是處于天然狀態，可以分離得到天然狀態下相互作用的蛋白復合體。GST pull-down是將GST融合蛋白作為探針固化到凝膠柱上，與溶液中的目的蛋白結合。可以用來確定融合（或探針）蛋白與未知（或靶）蛋白間的新的相互作用。一、免疫共沉淀是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋
如何診斷Down綜合征？
染色體核型分析和FISH技術：該病的特殊面容、手的特點和智能低下雖然能為臨床診斷提供重要線索，但是診斷的建立必須有賴于染色體核型分析，因此染色體核型分析和FISH技術是唐氏綜合征的主要實驗室檢查技術。這兩項檢查還對唐氏綜合征嵌合型的預后估計有積極意義，由于嵌合畸形患兒的表型差異懸殊，可從正常或接
怎樣預防Down綜合征？
目前尚無有效治療方法。最好手段是在孕媽媽生產前終止妊娠。孕婦產前預防內容如下： 1.遺傳咨詢 孕婦年齡愈大，風險率愈高。標準型唐氏綜合征的再發風險率為1%。易位型患兒的雙親應進行核型分析，以便發現平衡易位攜帶者：如母方為D/G易位，則每一胎都有10%的風險率；如父方為D/G易位，則風險率為4
分析Down綜合征的病因
1866年，Dr.JohnLangdonDown第一次對唐氏綜合征的典型體征包括這類患兒具有相似的面部特征進行完整的描述并發表，因此，這一綜合征以其名字命名為唐氏綜合征（Down綜合征）。1959年證實了唐氏綜合征是由染色體異常而導致的。現代醫學證實，唐氏綜合征發生率與母親懷孕年齡有相關，系21
關于Down綜合征的預后介紹
嬰幼兒時期常反復患呼吸道感染，伴有先心者常因此早期死亡。肌張力隨年齡增長逐漸改善，而生長發育進度與正常兒差距逐漸加大。15歲時已停止長高，身材矮，智商低，嵌合型者可達50%以上。嬰兒時期表現為“乖孩子”，兒童時期情緒多表現愉快，對人親切，但情感調控能力差，波動較大，有時相當固執和調皮。要采用綜合
GST－pulldown－assay實驗操作流程
實驗目的：體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用，或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。實驗原理：利用重組技術將探針蛋白與GST（Glutathione S transferase）融合，融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH（Glutathione）親和結合。因此，
GSTpulldown操作流程
利用重組技術將探針蛋白與GST（Glutathione S transferase）融合，融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH（Glutathione）親和結合，已廣泛應用于分子生物學（1）證實兩種蛋白可能有相互作用（2）尋找能與已知蛋白發生相互作用的未知蛋白。實驗方法原理利用重組技術將探針蛋
簡述Down綜合征的臨床表現
1.患兒具明顯的特殊面容體征，如眼距寬，鼻根低平，眼裂小，眼外側上斜，有內眥贅皮，外耳小，舌胖，常伸出口外，流涎多。身材矮小，頭圍小于正常，頭前、后徑短，枕部平呈扁頭。頸短、皮膚寬松。骨齡常落后于年齡，出牙延遲且常錯位。頭發細軟而較少。前囟閉合晚，頂枕中線可有第三囟門。四肢短，由于韌帶松弛，關節
Oligopull－down結合質譜、蛋白解構技術等研究實體瘤膀胱癌
m5C修飾是mRNA上分布廣泛的堿基修飾形式之一，但對于進入細胞質內的含有m5C修飾的mRNA的命運決定及其在生理和病理中的調控作用目前尚不清楚。中國科學院北京基因組研究所楊運桂團隊聯合中山大學腫瘤醫院周芳堅團隊、謝丹團隊和中科院生物化學與細胞生物學研究所黃旲團隊合作研究，發現m5C通過細胞質內
關于Down綜合征的基本信息介紹
唐氏綜合征即21-三體綜合征，又稱先天愚型或Down綜合征，是由染色體異常（多了一條21號染色體）而導致的疾病。60%患兒在胎內早期即流產，存活者有明顯的智能落后、特殊面容、生長發育障礙和多發畸形。
熒光原位雜交法檢查Down綜合征
以21號染色體的相應部位序列作探針，與外周血中的淋巴細胞或羊水細胞進行雜交，唐氏綜合征患者的細胞中可呈現3個21號染色體的熒光信號。若選擇唐氏綜合征核心區的特異序列作為探針，進行FISH雜交分析，可以對21號染色體的異常部位進行精確定位，提高檢測21號染色體數目和結構異常的精確性。
GST－pulldown－assay的基本原理
基本原理是將靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巰基轉移酶）融合蛋白親和固化在谷胱甘肽標記的磁珠上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液與之孵育,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結合物后通過SDS-PAGE電泳分析
Down綜合征的羊水細胞染色體檢查
羊水細胞染色體檢查是唐氏綜合征產前診斷的一種有效方法，唐氏篩查結果為“高危”的孕婦需要確診胎兒是否為唐氏綜合征患兒。目前產前診斷最常用的技術是羊膜腔穿刺技術，即在B超引導下，將針通過孕婦腹部刺入羊水中，抽取羊水，對胎兒細胞進行染色體分析。適宜孕16～20周的孕婦。除羊膜腔穿刺術外，進行產前診斷的
染色體異常的Down綜合征的介紹
（Down’ssyndrome）的臨床特征如下：⑴Down綜合癥患兒出生時即有某些病理特征，隨年齡增長癥狀變得明顯。顱面部表現為圓頭低鼻梁上頜骨發育不全可致面部扁平，嘴呈微張狀舌體肥大有深裂，常伸出口外故稱伸舌樣癡呆。內眥贅皮常遮蓋部分，內眥患者瞼裂可輕微向上向外傾斜形成蒙古樣，面容耳朵位置低呈
磁珠法RNA－pulldown－的經典操作流程
采用鏈霉親和素磁珠（PuriMag G-strep 貨號PMG015）進行RNA pull-down?RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads??1.?RNA pull-down 第一天——生物素探針標記RNA1）前期準備：取出Pie
產前篩查血清標志物檢查Down綜合征的介紹
采用測定孕婦血清絨毛膜促性腺激素（HCG）、甲胎蛋白（AFP）、游離雌三醇（FE3）進行唐氏綜合征篩查的探索已有多年，這是一種懷孕中期指標（13周以后）。 根據這3項（也可測定HCG和AFP兩項）血清學指標以及孕婦年齡、體重來推算懷有唐氏綜合征患兒的風險率，根據風險率的高低再進一步進行確診檢查
Phosphorylation－of－MEK1－by－cdk5/p35－down－regulates－the－MAP－kinase－pathway
Map kinases transduce responses to extracellular signals by a variety of routes, and communicate with other pathways through extensive crosstalk netwo
中科院團隊研究發現TopDown質譜表征新方法
近日，中國科學院大連化學物理研究所研究員王方軍團隊與中國科學技術大學黃光明教授團隊合作，發展了胞內蛋白極紫外激光解離Top-Down質譜表征（UVPD-TDMS）新方法，為細胞內蛋白質原位質譜表征和變體構象異質性解析提供了創新性分析技術。相關成果發表在《美國化學會志》上。細胞內柔性蛋白質通常同時存在
西北大學團隊“topdown”質譜法|－單日分析上千個單細胞
西北大學研究團隊開發出一種基于電荷檢測質譜技術的自頂向下（top-down）的單細胞蛋白質組學方法。該方法在本月發表于BioRxiv預印本上，科學家們用此方法可以每天檢測1000多個單細胞中的完整蛋白質。雖然該技術的開發仍處于早期階段，但是西北大學生命過程化學研究所主任、論文的通訊作者Neil Ke
Down綜合征的對外周血細胞染色體核型分析檢查介紹
細胞遺傳學研究發現，在21號染色體長臂21q22區帶為三體時，該個體具有完全類似唐氏綜合征的臨床表現，相反，該區帶為非三體的個體則無此典型癥狀。由此推論，21q22區可能是唐氏綜合征的基因關鍵區帶，又稱為唐氏綜合征區。按染色體核型分析可將唐氏綜合征患兒分為三型： （1）標準型占全部病例的95%
西北大學團隊“topdown”質譜法每天可分析1000個以上單細胞
西北大學研究團隊開發出一種基于電荷檢測質譜技術的自頂向下（top-down）的單細胞蛋白質組學方法。該方法在本月發表于BioRxiv預印本上，科學家們用此方法可以每天檢測1000多個單細胞中的完整蛋白質。雖然該技術的開發仍處于早期階段，但是西北大學生命過程化學研究所主任、論文的通訊作者Neil
CASMS分論壇：Topdown蛋白質組學和原位質譜新進展
分析測試百科網訊 美國東部時間2021年8月9日-13日，首屆美國華人質譜學會（CASMS）學術研討會暨展覽會在Gather.Town隆重舉行。在12日“New Advances in Top-down Proteomics and Native Mass Spectrometry”分論壇中，加
西北大學團隊的“topdown”質譜法每天可分析上千個單細胞
西北大學研究團隊開發出一種基于電荷檢測質譜技術的自頂向下（top-down）的單細胞蛋白質組學方法。該方法在本月發表于BioRxiv預印本上，科學家們用此方法可以每天檢測1000多個單細胞中的完整蛋白質。雖然該技術的開發仍處于早期階段，但是西北大學生命過程化學研究所主任、論文的通訊作者Neil
關于染色體異常的其他輔助檢查
孕婦行羊膜囊穿刺可發現羊水細胞染色體異常可以早期篩查Down綜合征患兒及其他染色體發育不全。 染色體檢查可用熒光原位雜交技術（fluorescentinsituhybridizationtechnique)檢測患者羊水細胞或染色體，如Down綜合征可發現21號染色體為三倍體。
染色體異常的輔助檢查
孕婦行羊膜囊穿刺可發現羊水細胞染色體異常可以早期篩查Down綜合征患兒及其他染色體發育不全。 染色體檢查可用熒光原位雜交技術（fluorescentinsituhybridizationtechnique)檢測患者羊水細胞或染色體，如Down綜合征可發現21號染色體為三倍體。
染色體畸形的檢查及鑒別診斷
檢查 孕婦行羊膜囊穿刺可發現羊水細胞染色體異常，可以早期篩查Down綜合征患兒及其他染色體發育不全。 染色體檢查可用熒光原位雜交技術(fluorescentinsituhybridizationtechnique)檢測患者羊水細胞或染色體。 主要根據患兒的特征性癥狀、體征及染色體檢查。檢出
2010年6月實施的食品行業相關國標
2010年6月實施的食品行業相關國家標準 新發布的GB 4789-2010系列食品安全國家標準共10個，將于2010年6月1日起實施： GB4789.1-2010 食品微生物學檢驗 總則 http://down.foodmate.net/standard/sort/3/21