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    酵母準備

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    酵母DNA的快速分離

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    畢赤酵母表達(pichia pastoris expression )實驗手冊(4)

    三.主要試驗環節的操作3.1 酵母菌株的分離純化接種GS115于5ml YPD液體培養基,30℃,200rpm振蕩過夜,涂布 YPD平板,30℃培養48 小時,用 YNB基本培養基和含His的補充培養基作點種分離純化,挑選在補充培養基生上生長而在基本培養基上不生長的單菌落劃YPD平板,4℃保存。3.

    酵母DNA的快速分離

    實驗方法原理 根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。實驗材料 酵母細胞試劑、試劑盒 乙醇酚氯仿醋酸鈉STES 緩沖液TE儀器、耗材

    酵母DNA的快速分離

    根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據該方案制備的酵母 DNA 可

    酵母β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑盒產品使用...

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    色譜法分離釀酒過程中被修飾的麥芽蛋白

    釀造幾乎是一個盡人皆知的簡單過程,看過張藝謀《紅高粱》的觀眾一定會對影片中所描繪的家庭式釀酒作坊中幾十號人汗流浹背、忙碌穿梭的鏡頭記憶憂新。但家庭釀造與商業釀造有明顯不同,前者中使用了麥精(malt extract)。工業生產中,釀酒師常常自己提取糧谷,以便能夠對發芽(malting)過程進行控制。

    大麥演主角 而且想單飛

      在給啤酒增加風味上,大麥一直扮演著僅次于啤酒花和酵母的角色。現在這種谷物卻準備要單飛了。  近日,由美國俄勒岡州立大學科研人員主導的兩項研究發表在美國釀造化學家協會雜志上。他們發現,來自不同大麥品種的啤酒麥芽,對啤酒風味、品質影響顯著且各異。  俄勒岡州立大學大麥育種專家Pat Hayes介紹,

    酵母蛋白的提取方法

    1 準備SD/-Leu或是YPD 培養基20ml,酵母過夜培養,30℃,230rpm。2 測OD600 約1.0。3 100ml過夜培養物,1000g,離心,5min,4℃。4 棄上清,重懸于80ul抽提buffer:0.1M Tris-Cl(PH7.5),0.2M NaCl,0.01Mβ-ME,2

    真菌/酵母樣品細胞細胞周期碘化丙啶紅色熒光流式細胞

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    分子生物學實驗基礎知識

    分子生物學是在生物化學基礎上發展起來的,以研究核酸和蛋白質結構、功能等生命本質的學科,在核酸、蛋白質分子水平研究發病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程(基因技術,基因重組)是目前分子生物學研究熱點,這些技術可以改造或擴增基因和基因產物,使微量的研究對象達到分析水平,是研究基因調控和表達的方法,也

    細菌培養及CaCl2法制備感受態細胞-1

    實驗目的:明確培養基的配制原理;通過對LB培養基的配制,掌握配制培養基的一般方法和步驟;掌握細菌的接種、培養的無菌操作方法和步驟。實驗原理:重組DNA分子(質粒、噬菌體、粘性質粒)必須導入宿主菌中,通過細菌培養來擴增所需的重組DNA。大腸桿菌與其它微生物一樣,都具有穩定遺傳性和變異性、遺傳性,保證微

    正交試驗法在微生物培養條件優化選擇中的應用

    一.目的要求對于一個生物作用過程,其結果或產物的得到受到多種因素的影響。如發酵中,菌種的生物活性、酶的濃度、底物濃度、溫度、pH 值、菌種生長環境中的氧氣、二氧化碳濃度、各種營養成分的比例等。對于這種多因素的實驗,如何合理地設計實驗,提高效率,以達到所預期的目的是需要進行認真考慮和周密準備的。本

    快速了解土壤凍干法

      凍干保藏法,是指冷凍干燥保藏法的簡稱。液體樣品在凍結狀態下因水分升華,最后達到干燥的保藏方法,是菌種保藏中最有效的方法之一,適用于各類微生物的保藏。其優點是保存時間長,一般可達10年以上;存活率高,變異小,安瓿管體積小,便于大量保藏。缺點是操作復雜,設備昂貴,推廣應用尚有一定困難。  凍干保藏法

    酵母雙雜交實驗

    實驗概要本實驗構建了Bait載體和prey載體,酵母雙雜交后,應用CPRG法定量測試了蛋白質相互作用。實驗步驟1. Bait載體的構建將高保真PCR擴增的OsCCTlb(引物為OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物為OsCNTlb  

    酵母三雜交系統檢測和分析RNA-蛋白相互作用

    一、引入 RNA 質粒和 cDNA 文庫通常首先將 RNA 質粒轉化到宿主菌株-L40coat 內,得到包含 RNA 質粒的細胞,再轉化一個融合了轉錄激活區的 cDNA 文庫(雜交 RNA 對宿主細胞幾乎沒有毒性,與用于雙雜交篩選的一些雜交蛋白

    植物原位接種介導的小麥高效農桿菌轉化方法實驗

    試劑、試劑盒:緩釋肥                                        

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    真菌/酵母樣品細胞細胞周期碘化丙啶紅色熒光流式細胞分析試劑盒使用說明真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒產品說明書(中文版)主要用途YIJI真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑是

    畢赤酵母LiCl 轉化方法

    實驗概要本文介紹了畢赤酵母LiCl 轉化方法。該程序是電轉化的替代方法。轉化效率為102-103cfu/ug線性化DNA。主要試劑溶液準備:不能用醋酸鋰,一定要用氯化鋰1. 用無菌去離子蒸餾水配制1M LiCl,過濾除菌,用無菌水稀釋2. 用無菌去離子蒸餾水配制50%PEG(3350),過濾除菌,存

    目的基因的亞克隆-1

    所謂亞克隆就是對已經獲得的目的DNA片段進行重新克隆,其目的在于對目的DNA進行進一步分析,或者進行重組改造等。亞克隆的基本過程包括:(1)目的DNA片段和載體的制備;(2)目的DNA片段和載體的連接;(3)連接產物的轉化;(4)重組子篩選。 一、試劑準備 1.LB液體培養基:胰化蛋白胨(細

    培養嗜酸乳桿菌的器材和詳細的方法步驟

    儀器及器皿THZ-C恒溫震蕩器,LRH-250生化培養箱,LDZX-50FB立式電熱壓力蒸汽滅菌器,SW-CJ-1F潔凈工作臺,百分之一電子天平,生物顯微鏡, 18×150試管,90mm培養皿,500ml三角瓶,10ml刻度吸管,1ml移液槍,吸耳球,玻璃珠(直徑4-6mm),pH試紙(5.5-9.

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗

                實驗方法原理 剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分,最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體

    大腸桿菌感受態細胞的制備

    實驗原理感受態就是細菌吸收轉化因子的生理狀態,只有發展為感受態的細胞才能穩定攝取外來的DNA分子。受體細胞經過一些特殊方法(如:電擊法,CaCl2等化學試劑法)的處理后,細胞膜的通透性發生變化,成為能容許帶有外源DNA的載體分子進入的感受態細胞。 目前常用的感受態細胞制備方法有CaCl2

    細胞培養箱內的支原體怎么檢測

    可用直接培養法檢測細胞培養箱內的支原體污染。培養基準備: 基本配方為Difco PPLO broth(60%),馬血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x儲存液(10%)。由于培養時間長,可加50u/ml青霉素至10x儲存液 或加入乙酸鉈(1:2000)至培養基中以防止其他細菌的污染。 1

    創新參選:從酵母中提取gDNA的方法改進

      2012實驗室創新技術大獎”評選活動開展以來,生物通已經陸陸續續收到不少項目,這些項目中有的能減少實驗步驟,有的能降低實驗成本,還有一些改進了實驗設備,讓我們的實驗過程更加輕松。   生物通將會陸續公布一些項目,以便大家分享這些創新技術。同時為了感謝這些分享實驗技巧的參選者,生物通也準備了一些

    酵母三雜交系統檢測和分析RNA-蛋白相互作用實驗

    實驗方法原理 酵母三雜交系統(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白質與 RNA 間的相互作用。在酵母三雜交系統中,RNA 蛋白質相互作用導致報道基因的轉錄,可以通過細胞生長、克隆顏色或特異的酶活性檢測蛋白質與 RNA 的相互作用。試劑、試劑盒 YPD 和 SD 培養基鮭

    λ噬菌體DNA提取試劑制備、操作步驟和注意事項

    λ噬菌體是最早使用的克隆載體,λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子,它在宿主細胞有兩種生活途徑:其一是裂解生長,環狀DNA 分子在細胞內多次復制,合成大量噬菌體基因產物,裝配成噬菌體顆粒,裂解宿主菌再進行下一次感染;其二是溶源性生長,即感染細胞內λ噬菌體DNA整合到宿主菌染色體D

    目的基因的亞克隆(subcloning)-1

    所謂亞克隆就是對已經獲得的目的片段進行重新,其目的在于對目的進行進一步分析,或者進行重組改造等。亞的基本過程包括:(1)目的片段和載體的制備; (2)目的片段和載體的連接;(3)連接產物的轉化;(4)重組子篩選。一、試劑準備1.LB液體培養基:胰化蛋白胨(細菌培養用)10g,酵母提取物(細菌培養用)

    堿裂解法提取質粒DNA

    實驗目的      1、掌握最常用的提取質粒DNA的方法和檢測方法;       2、了解制備原理及各種試劑的作用。      實驗原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA

    植物原位接種介導的小麥高效農桿菌轉化方法實驗(一)

    試劑、試劑盒 緩釋肥乙酰丁香酮儀器、耗材 盆缽植物支撐器LB 培養基通用型試管YEP 固體培養基TSIM 培養基實驗步驟 一、材料1. 母體植株的生長( 1 ) 將母體植株種植于 12 , 7F ( 直徑為 13 cm) 的盆缽中,每盆 4 株。( 2 ) 用 Levingtons  M2

    畢赤酵母電轉化

    實驗概要本實驗介紹了畢赤酵母電轉化方法。該方法無需產生去壁細胞,是產生畢赤酵母重組子的簡便方法。與去壁細胞效率相似。實驗步驟1. 細胞準備:   1) 在含5mlYPD 的50ml 離心管中,培養畢赤酵母,30 度過夜。   2) 取0.1-0.5ml 過夜培

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