RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 cDNA 序列或預測的基因序列設計引物，用反轉錄-PCR ( RT- PCR) 方法擴增 cDNA 上的一部分序列。如果沒有目的基因的基因組序列，可以用其他物種中基因的序列去搜索已知序列的 cDNA。如果目的基因是多基因家族的成員，就需要與家族成員進行多重比較以指導 PCR 引物的設計。要擴增的基因區域以及它與其他基因的相似性決定了該 RNAi 載體靶向單個 mRNA 還是多個相關基因的轉錄產物。( 2 ) 擴增編碼區和非編碼區（UTR ) 都能獲得好的沉默效果。由于沉默機制依靠序列同源性，因此相關的 mRNA 序列有可能被交叉沉默。如果沒有特殊要......閱讀全文
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DNA 模板 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒d
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 cDNA 序列
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料 pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材 PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟 一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 c
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾（RNA interference, RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。目前主要用于（1）特異性剔除或關閉特定基因的表達 （2）探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療 （3）使
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsR
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析,所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析,來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA沉默的作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄;?而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RNA沉
RNA沉默的作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄; 而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RNA沉
RNA沉默的分類
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類:以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS);以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(trans
RNA－沉默的概念
RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是廣泛存在于植物、動物、線蟲和真菌等真核生中的一種高度保守的、序列特異的 RNA 降解機制. RNA 沉默對于調控發育、維持基因組的穩定性以響應生物和非生物脅迫等具有重要作用.
簡述RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必
小干擾RNA轉錄后基因沉默的介紹
siRNA誘導的轉錄后基因沉默始于RNA誘導的沉默復合物（RISC）的組裝。該復合物通過切割編碼靶基因的mRNA分子來沉默某些基因表達。為了開始該過程，兩條siRNA鏈中的一條（引導鏈）將被裝載到RISC中，而另一條鏈即過客鏈被降解。某些Dicer酶可能負責將引導鏈加載到RISC中。然后，siR
基因敲除，rna干擾，基因沉默有什么關系
基因敲除一般指永久的、不可逆轉的敲除/失活靶基因，目前其中一種熱門的，常見的基因敲除方法是CRISPR/Cas9，利用gRNA靶向靶基因并指導cas9切割基因雙鏈，形成移碼突變或片段敲除來完成基因敲除。基因沉默與基因敲除不同的地方在于，沉默可以是暫時性的、可逆轉的失活基因/抑制基因表達，基因可以是存
關于RNA沉默的簡介
基因沉默是指在真核生物（植物、動物、真菌）中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。 RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是廣泛存在于植物、動物、線蟲和真菌等真核生中的一種高度保守的、序列特異的 RNA 降
簡述RNA沉默的作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄； 而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RN
RNA沉默的功能作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄;而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RNA沉默
RNA沉默的應用特點
RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是廣泛存在于植物、動物、線蟲和真菌等真核生中的一種高度保守的、序列特異的 RNA 降解機制. RNA 沉默對于調控發育、維持基因組的穩定性以響應生物和非生物脅迫等具有重要作用.
RNA沉默的作用機制
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄;?而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RNA沉
PNAS驚人發現：沉默基因的RNA可直接遺傳
近年來人們發現，父母的生活經歷會對后代產生顯著的影響。營養不良、接觸毒素或罹患疾病會改變父母的基因表達模式，這種改變在某些情況下能傳遞給下一代。然而，這種非基因遺傳機制一直是一個謎。 十月十七日馬里蘭大學的研究人員在美國國家科學院院刊PNAS雜志上發表文章指出，非基因遺傳機制其實可能非常簡單。
關于RNA沉默的分類介紹
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類: 以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS)； 以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(t
細胞化學詞匯RNA沉默
中文名稱：基因沉默外文名稱：RNA silencing定?????? 義：基因沉默是指在真核生物（植物、動物、真菌）中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
小環狀干擾－RNA－(sciRNA)－作為基因沉默的有效治療平臺
為了實現由RNA干擾(RNAi)途徑介導的有效的治療性基因沉默，小干擾RNA (sirna)必須經過化學修飾。一些具有在代謝上穩定sirna潛力的超rna結構已被評估其誘導基因沉默的能力，但所有這些結構都有局限性或尚未在治療相關的背景下進行探索。共價閉合環狀RNA轉錄本普遍存在于真核生物中，有潛
植物中的RNA沉默的分類
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類: 以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS); 以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(tra
植物中的RNA沉默額定分類
植物中的RNA沉默根據作用靶標可以分為兩類:?以RNA為靶標, 使其降解或抑制蛋白翻譯, 稱為轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS);?以染色質為靶標, 使其基因啟動子或組蛋白甲基化從而抑制 RNA 轉錄的起始, 稱為轉錄基因沉默(tra
基因沉默的概念
基因沉默是指在真核生物（植物、動物、真菌）中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
冷泉港實驗室：劃算的基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主Craig Mello和Andrew Fire發現，他們能夠將短RNA分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。 為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的
基因沉默的主要類型
基因沉默，主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類：TGS是指由于DNA修飾或染色體異染色質化等原因使基因不能正常轉錄；PTGS是啟動了細胞質內靶mRNA序列特異性的降解機制。有時轉基因會同時導致TGS和PTGS。
RNAi基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現，他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的RNA