高通量植物(轉)基因檢測的利器——植物材料直接PCR技術
摘要: 北京百泰克生物技術有限公司暨推出通用植物總RNA提取試劑盒(RP3301)成功解決了各種難提植物RNA的問題后,新近又針對高通量植物DNA的提取擴增推出了最新產品——植物直接PCR試劑盒(PR7501),該試劑盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要鋼珠破碎,更不借助任何特殊的儀器設備,方法及其方便快捷。 眾所周知,在正向遺傳學的基因定位,植物品質和品種鑒定,或者是植物有效成分檢測,以及轉基因檢測等,都需要高通量植物的DNA提取,然后PCR檢測。尤其是在基因圖位克隆中,需要構建一個大的群體(少則幾千株,多則上萬株),然后提取DNA,PCR方法篩選性狀的連鎖標記(SSR,RAPD等),最后測序克隆基因。傳統方法在DNA提取中,都要液氮研磨樣品,然后氯仿抽提,最后再PCR。上千株系DNA的提取就需要幾周的時間。一些公司進行改進,開發了相對簡單些的方......閱讀全文
高通量植物(轉)基因檢測的利器植物材料直接PCR技術
摘要: 北京百泰克生物技術有限公司暨推出通用植物總RNA提取試劑盒(RP3301)成功解決了各種難提植物RNA的問題后,新近又針對高通量植物DNA的提取擴增推出了最新產品——植物直接PCR試劑盒(PR7501),該試劑盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要鋼珠破碎,更不借助任何特殊的儀器設備,方法及
高通量植物(轉)基因檢測的利器——植物材料直接PCR技術
摘要: ?北京百泰克生物技術有限公司暨推出通用植物總RNA提取試劑盒(RP3301)成功解決了各種難提植物RNA的問題后,新近又針對高通量植物DNA的提取擴增推出了最新產品——植物直接PCR試劑盒(PR7501),該試劑盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要鋼珠破碎,更不借助任何特殊的儀器設備,方法及其
高通量植物(轉)基因檢測的利器植物材料直接PCR技術
高通量植物(轉)基因檢測的利器---植物材料直接PCR技術 摘要: 北京百泰克生物技術有限公司暨推出通用植物總RNA提取試劑盒(RP3301)成功解決了各種難提植物RNA的問題后,新近又針對高通量植物DNA的提取擴增推出了最新產品——植物直接PCR試劑盒(PR7501),該試劑盒不需要
植物組織直接PCR
實驗概要本實驗以擬南芥葉片為試材介紹了一個不用提取DNA直接進行PCR的簡單方法。主要試劑0.25N?? NaOH0.25N??? HClNP-40緩沖液:0.5N Tris-HCI, pH8.0 ,25% NP-40實驗步驟1. 取面積約為lmm2的植物葉片放在500ul離心管中,加入40ul的0
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法(三)
將純化定量的水稻品種(93-11)基因組DNA標準樣品(0.5~8 ng)與1.0 μL本方法制備的水稻品種(02428)基因組DNA混合作為模板,用InDel 標記引物(表1)進行PCR擴增和PAGE檢測。箭頭指某反應(或2個反應之間)其02428與93-11條帶的信號值大致相等(即DNA
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法(四)
2.3 ?高通量的分子標記檢測?本方法制備的DNA濃度雖然低,用96針復制器加入0.5~1 μL模板進行33~35個PCR循環就可獲得足夠濃度的產物,并不需要加入特別多的Taq酶(甚至使用量為每45~50 μL PCR反應液1 U也能擴增分子標記)。該方法已對數萬份水稻樣品進行了分子標記(S
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法(一)
摘? 要:制備大量生物樣品的模板DNA用于PCR檢測是費時費人工的工作。本文介紹一種高通量的植物基因組DNA(gDNA)快速制備及其用于PCR基因型檢測的操作方法。將一小段單子葉植物苗葉片(長度約30 mm或40 mm,與96方孔板的孔深大致相同) 或一小塊(約2~4 mg)雙子葉植物葉片放入9
高通量的PCR模板植物基因組DNA制備方法(二)
1.2? 植物材料 ?1.2.1 水稻秧苗。將1.6-mL 96方孔板底部用6 mm電鉆頭打穿,或將舊96孔PCR板的底部剪去約4 mm。使用時將方孔板壓入少量泥巴。每孔放入1粒萌動的水稻種子,在自然日光下(或人工氣候箱)生長至3~4片葉。其他植物小苗也可用類似方法種植。?1.2.2 水稻大植株的鮮
轉基因植物的直接轉入法
這是將裸露的DNA直接導入植物細胞,然后將這些細胞在體外培養再生出植株。裸露的DNA的轉化效率較低,因而要輔之以高效率的組織培養系統。 植物細胞有一層很厚的細胞壁,因此需先去除植物細胞壁,使之成為原生質體,然后用來直接轉入外源DNA。當然,也可用機械的方法將DNA直接注入植物細胞而毋須去除細胞
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合的轉基...(一)
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合的轉基因片段實驗實驗材料?核苷酸試劑、試劑盒?冰水8-羥基喹啉秋水仙素固定劑酶解緩沖液儀器、耗材?載玻片玻璃蓋玻片解剖針及鑷子實驗步驟 原位雜交的基本操作方法(圖 14 .2 ) 演化自 Southern 雜交:標底是玻片上的染色體和細胞核,探針是帶標記的待測
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合的轉基...(二)
3.2 染色體制備無論是熒光染色還是 FISH,分裂期和分裂間期的染色體制備均于載物片上進行。建議使用蛋白水解酶對材料進行預處理,以去除細胞壁和細胞質,再將樣品置于載玻片上,滴上乙酸,然后蓋上玻片壓片。所有操作均于室溫下進行,除非是特殊說明。在洗滌和材料準備時使用小培養皿,方法見 2. 2 節。(
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合的轉基...(三)
3.5 雜交混合變性和雜交( 1 ) 離心管中準備雜交液,見表14. 1,充分混合。?( 2 ) 在離心管中加入 34 μl 雜交液、2 μl 轉基因探針、1 μl 指示探針或對照探針,蒸餾水補齊至 40 μl,作為探針混合液。( 3 ) 探針變性,放入 70°C 水浴鍋 10 min , 然后置冰
植物轉基因技術
1)農桿菌介導轉化法 將外植體放入含有外源基因的農桿菌(Agrobacteriumtume/ociens)菌液中浸泡,然后轉入共培養基,再轉入篩選培養基誘導抗性愈傷組織和抗性芽,生根后的抗性植株移栽至營養缽生長。(2)基因槍法 又稱微彈轟擊法。其基本原理是將外源DNA黏附在微小的金粒或鎢粒表面,然后
植物基因轉化技術
相關知識植物基因轉化技術是指將外源基因導入植物細胞或組織,獲得轉基因植物的技術。植物基因轉化技術總體上可分為兩大類:1 以生物體為介導的基因轉移法;2 DNA直接導入法。前者如農桿菌介導法,植物病毒介導法;后者如基因槍法、電擊法、聚乙二醇法、脂質體法及花粉管通道法。其中應用最廣的是根癌農桿菌介導法。
PCR技術目的基因的直接克隆介紹
與常規的基因克隆方法相比,PCR的優點是快速,簡單,但是用PCR克隆目的基因的限制是必須知道側接靶序列的核苷酸序列,以制備引物。因而該法具有很大的局限性。 可直接利用具有平端的PCR產物進行克隆,但利用合適的引物,在待克隆的目的基因二側引入不同的限制性酶切點,則可將擴增之后的目的基因定向克隆到
轉基因植物產品數字PCR檢測方法
前言? ? ? ?本標準按照GB/T 1.1-2009給出的規則起草。? ? ? ?本標準由全國生化檢測標準化技術委員會(SAC/TC 387)提出并歸口 。? ? ? ?本標準主要起草單位 : 中國檢驗檢疫科學研究院、廣西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 、中國農業大學 、中國農業科學院油菜作物研
轉基因植物產品數字PCR檢測方法
轉基因植物產品數字PCR檢測方法?前言本標準按照GB/T 1.1-2009給出的規則起草。本標準由全國生化檢測標準化技術委員會(SAC/TC 387)提出并歸口 。本標準主要起草單位 : 中國檢驗檢疫科學研究院、廣西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 、中國農業大學 、中國農業科學院油菜作物研究所。本
轉基因植物產品數字PCR檢測方法
轉基因植物產品數字PCR檢測方法?前言? ? ? ?本標準按照GB/T 1.1-2009給出的規則起草。? ? ? ?本標準由全國生化檢測標準化技術委員會(SAC/TC 387)提出并歸口 。? ? ? ?本標準主要起草單位 : 中國檢驗檢疫科學研究院、廣西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 、中國農
國家植物基因研究中心植物激素檢測平臺舉辦技術講座
植物激素是植物體內合成的一系列天然微量有機物小分子化合物, 調控著植物生長發育過程中重要的生理反應,但其定量分析檢測一直是限制研究深入的瓶頸問題。為了解決這一難題,國家植物基因研究中心(北京)從2007年開始致力于植物激素測定平臺的建設,經過不斷努力探索,目前已經建立了穩
植物轉基因技術的特點
利用植物來生產疫苗的最大優點是他可以作為食品直接口服。通過各種植物轉基因技術將多臺疫苗基因轉入植物,從而得到表達多肽疫苗的轉基因植物。隨著抗體基因工程能將抗體基因(從小的活性單位到完整抗體的重、輕鏈基因)從單抗雜交瘤中分離出來,人們就開始想辦法利用轉基因植物來表達這些抗體。 1989年Hiat
植物細胞的微核檢測技術材料、原理和步驟
一、原理: 微核(micronuclei)簡稱MCN,是真核類生物細胞中的一種異常結構,往往是細胞經輻射或化學藥物的作用而產生的。在細胞間期,微核呈圓形或橢圓形,游離于主核之外,大小應有主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性質和主核一樣,也具合成DNA的能力。一般認為微核是由有絲分裂后期喪
植物組織pcr
直接PCR(Direct PCR)使用未純化的樣本進行PCR擴增,無需核酸純化步驟,為DNA擴增帶來前所未有的便捷。如果您研究領域涉及基因分型、轉基因、質粒檢測、基因敲除分析、DNA來源鑒定、物種鑒定、SNP分析等,請看完下面的介紹吧。 直接PCR需要的試劑 樣本裂解液 樣本裂解液可自
轉基因植物NPTⅡ基因PCR檢測試劑盒流程步驟
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。 2. 為避免RNA降解,樣本處理過
多糖多酚植物RNA提取的利器
眾多文獻報道,許多植物由于未能有效地分離純化出其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面的研究進展。比如Northern雜交分析,體外翻譯分析或建cDNA文庫,RT-PCR及差異顯示分析等研究,都需要高質量的RNA。因此,提取純度高、完整性好的RNA是順利進行上述研究的關鍵所在。RNA提取的常見難
高通量小型植物光合表型測量系統的技術原理
葉綠素a熒光作為光合作用研究的探針,是研究各種逆境脅迫(干旱、高溫、低溫、營養缺失、污染、病害等)對植物影響的強大工具,亦被廣泛用于篩選同一植物品種的不同基因型。葉綠素a熒光不僅能反映光能吸收、激發能傳遞和光化學反應等光合作用的原初反應過程,而且與電子傳遞、質子梯度的建立及ATP合成和CO2固定
高通量植物表型平臺簡介
高通量植物表型平臺是植物表型組學、植物功能基因組學、現代遺傳育種研究的強大工具。利用高通量植物表型平臺可以快速獲取大量植株的各種信息。現代農業育種的一個主要方向就是性狀改良,獲得更大的果實/種子,更高的含油量(油料作物),更發達的根系等等。通過高通量植物表型平臺可以快速獲取大量植物表型信息。
特異性PCR檢測技術可高效準確鑒別植物線蟲
近日,陜西省生物農業研究所科研人員研究開發了一種特異性PCR(聚合酶鏈反應)檢測技術,能夠高效精確地從土壤樣品中鑒別出腐爛莖線蟲和鱗球莖莖線蟲。該技術將有助于縮短相關植物線蟲的檢測周期,提高檢測準確度,為植物線蟲的田間精準防控提供依據。植物線蟲是導致植物病害的四大病原之一,危害幾乎所有的糧食和經濟作
轉基因植物TETR基因PCR檢測試劑盒樣品DNA的制備
1.用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。。也可以選購本公司的一管式病毒DNAOUT或其升級版柱式病毒 DNAOUT。本試劑盒免費贈送15次DNA病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAOUT的成分)。稀釋陽性對照(以10E2-10E7這6個10倍稀釋度為例。由于標
高通量小型植物光合表型測量系統的技術參數
成像面積:24 cm x 24 cm 光照面積:30 cm x 30 cm 相機傳感器類型:CCD 相機分辨率:600萬像素,即2440 x 2440像素 光譜范圍:350-950 nm 鏡頭類型:高質量百萬像素鏡頭 光纖濾光片輪:6種高質量光學干涉濾光片,步進電機驅動 直角坐標機
植物病毒的電鏡技術法檢測
從20 世紀40 年代建立電子顯微鏡技術以來, 經過不斷的改進和提高, 采用電子顯微鏡技術檢測植物病毒已成為比較重要的病毒鑒定和檢測手段。電子顯微鏡以電磁波為光源, 將感病植物組織制成檢測樣本, 利用短波電子流, 在電子顯微鏡下觀察, 可根據病毒的形態、大小、內含體以及染病組織超微結構等診斷病毒的種