細胞凋亡(Apoptosis),又稱細胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。細胞凋亡概念提出至今還不到30年的時間,但由于它在保證多細胞生物的健康生存過程中扮演著關鍵角色,對個體的正常發育及細胞凋亡紊亂在病理學研究中的重要作用,引起了人們對其機制和組分的廣泛而深入地研究,成為目前生命科學界最為熱門話題之一,也是生命科學界乃至社會各界爭相投入的研究領域。從近年的SCI排名中我們可以看到,信號傳導方面的文章遠遠超過位于第二位的人類基因組方面的,而信號傳導中一個重要的前沿領域就是細胞凋亡的研究。隨著這方面研究的持續升溫,涌現出了大量新的技術和方法對細胞凋亡進行檢測,其中不少已經有商品化的產品出現,大大加速了研究的進程。具體來說,針對凋亡的不同階段有以下一些方法。 1......閱讀全文
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法[1]。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法[1]。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜 不
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色:如果
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下,
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)
流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法)細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的
一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相關
一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點:1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相
前言:細胞凋亡是細胞程序性死亡中最具特征性的一種。它在生物發展,體內平衡,甚至在不同的疾病,例如:癌癥,的發病機制都扮演著重要的角色。在過去的幾十年里,科學家們對細胞凋亡進行了廣泛的研究。細胞凋亡的過程中,細胞會有不同的形態變化。同時,細胞膜(plasma membrane),線粒體(mitocho
一、概述1 當前細胞培養和觀察的常用方法十九世紀起,當顯微鏡出現后,人們就開始嘗試對細胞結構進行觀察,并在二十世紀發展出細胞的培養技術。單層細胞的培養相對方便,而且商業化的顯微鏡非常適合于平面的、薄樣品的觀察,所以,在二十世紀的中后期,人們普遍采用 2D 的細胞培養方法,進行生物學的研究,以及進
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測
細胞凋亡(apoptosis)是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式。其發生誘因及形態學特征均有別于壞死,與人類免疫系統的發生發展、神經組織發育、器官的形成、腫瘤的發生發展等諸多生物學現象之間有著密切聯系,并且是免疫應答過程中免疫細胞的殺傷機制之一。細胞凋亡的檢測技術已成為免疫學檢測的一個重要內容。凋
摘要:隨著科技水平的不斷深入,科研設備的不斷更新,國家對科研投入的不斷增多,植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術,對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
(一)細胞膜蛋白分子的檢測原理:細胞膜表面的抗原或受體可特異地與相應的抗體或配體結合,將針對細胞表面抗原的抗體或配體用不同的熒光素標記,根據不同熒光物質的最大激發和發射波長的不同,即可準確定量每種熒光物質的強度,從而推出相應細胞表面抗原表達量1 直接法:細胞+熒光素標記的抗CD分子的抗體→4oC反應
摘要:隨著科技水平的不斷深入,科研設備的不斷更新,國家對科研投入的不斷增多,植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術,對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
1 流式細胞儀的概念及其發展歷史1.1 流式細胞儀的基本概念 流式細胞儀(flow cytonletry,FCM)是對高速直線流動的細胞或生物微粒進行快速定量測定和分析的儀器,主要包括樣品的液流技術、細胞的計數和分選技術,計算機對數據的采集和分析技術等。流式細胞儀以流式細胞術為理論基礎,是流體力學、
2、RT-PCR法檢測細胞bcl-2 mRNA的表達:(1)總RNA提取:為了獲得高質量的真核細胞mRNA,必須使用RNA酶抑制劑。操作過程中應避免RNA酶污染器材和試劑,因此所有剝離、塑料器材先用0.1%DEPC水溶液浸泡12h,然后用無菌的新鮮蒸餾水淋洗數次,塑料器材應采用高壓蒸汽滅菌。玻璃器材
自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。 在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導
自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。 在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導
一、分析系統的組成1.自動染色體核形分析系統:karyotyping2.熒光原位雜交圖像分析系統:FISH 3.多色熒光原位雜交系統:mFISH/mBAND4.比較基因組雜交定量分析:CGH5.彗星分析:Comet imager6.自動掃描系統:Metafer二、各系統的原理一)染色體核