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    核酸蛋白轉移電泳及雜交(SouthernBlot、NorthernBlot和...2

    (10)倒去預雜交液,加入含探針的雜交液封口,42℃ 6h或過夜。 (11)取出轉移膜,按以下條件洗膜 1×SSC,0.1%SDS室溫2×15分鐘 0.25SSC,0.1%SDS,42℃ 2×15分鐘,氣中干燥。 (12)將雜交后的膜曝光于X光片,暗盒中放射自顯影2~7天,-70℃。 (13)X片顯影、定影,然后讀片 結果分析:此雜交技術可以對基因結構進行分析。雜交陰性帶的大小,分布規律及根據帶條信號強度測量其含量。 二、RNA Northern Blot及雜交 此法是將RNA分子在變性瓊脂糖凝膠中可相互分離,隨后將RNA轉移至硝酸纖維素濾膜上,用放射性標記的探針進行DNA-RNA雜交,此法是研究 RNA(特別是mRNA)的主要方法之一,可測量RNA的含量和大小。 1、配液:Northern 預雜交液:12.5m 1mol/l K3PO4 pH7.4 125ml......閱讀全文

    分子雜交技術(三)

    五、核酸分子雜交的類型  隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板

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    Western Blot實驗技術詳解和常見問題解答

    Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被

    Western Blot詳解

      Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。   本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術:   一、原理   二、分類

    Western blotting蛋白印跡市場概況和主要品牌及產品

    近日,MarketsandMarkets咨詢公司發布了全球western blotting市場的分析報告。據MarketsandMarkets預測,全球western blotting的市場規模將從2016年的5.75億美元增長到2021年的7.31億美元,復合年均增長率達4.9%。另一家Futur

    核酸蛋白轉移電泳及雜交

    一、DNA Southern Blot及雜交 本技術可用于基因組DNA特定序列定位,尤其可分析某些基因的限制性內切酶長度多態性,對遺傳性疾病的早期基因診斷、產前診斷或基因變異等方面的研究有應用價值,其過程包括:樣品DNA內切酶水解、水解片斷的瓊脂糖凝膠電泳分離、分離后水解片斷的轉移(固定)

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    Western bloting 綜述

    摘要:本文主要是針對Western bloting的原理及操作進行了簡單的闡述,Western印跡法是利用抗原抗體的免疫反應,先將蛋白通過SDS-PAGE電泳分離開來,然后再利用電場力的作用將膠上的蛋白轉移到固相載體(NC膜)上,然后再加抗體形成抗原抗體復合物,利用發光或顯色原理將結果顯示到膜或底片

    RNAi技術專有名詞(2)

    21.Homologous Chromosome:同源染色體一對染色體,分別來自父本和母本,染色體上有著相同的線性基因序列。 22.Recombinant Clone:重組克隆將不同來源的DNA片段合成在一個DNA分子中,這種技術稱為重組,得到的分子為重組克隆。 23.Ribonucleic

    RNAi相關術語

    1.RNAi :(RNA interference)RNA干擾一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達,促使mRNA降解,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型,稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi ,也譯作RNA干預或者干涉)。它也是體內抵御外在感

    Western Blot操作步驟

      背景:   蛋白質印跡的發明者是斯坦福大學George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被稱為Western Blot。最開始做印跡的是一個叫Southern的科學家,但印跡的對象是DNA鏈,他把這種技術稱為Southe

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