慢病毒載體相關知識問答大總結
慢病毒包裝技術專題Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒載體 (Lenti vector)是用于感染細胞以實現穩定導入基因或siRNA的病毒載體系統，其感染效率可以達到100%。慢病毒和細胞結合后通過包裝蛋白將含有目的基因或者干擾序列釋放到細胞內。慢病毒RNA通過逆轉錄酶轉錄為DNA。DNA整合前復合體進入細胞核并整合到靶細胞的染色體DNA。由于靶基因或基因干擾序列整合到染色體上并且伴隨著細胞分裂時DNA的復制一起復制，基因的導入能夠獲得穩定的表達。慢病毒的顯著優勢在于其可以整合到非分裂細胞，而其他載體(如非病毒載體、腺病毒載體、腺相關病毒載體)不具備整合到靶細胞染色體的特性，或者只能整合到分裂細胞的染色體(如常規的逆轉錄病毒)。目前我們使用的慢病毒載體是基于HIV-1改造而來，該載體使用最為廣泛，經過科學家的多次改造在包裝滴度和使用安全性等方面都非常理想。在實際的使用中我們可以用來表達目的基因或目的基因加上報告基因，近年來隨著R......閱讀全文
慢病毒載體相關知識問答大總結
慢病毒包裝技術專題Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒載體 (Lenti vector)是用于感染細胞以實現穩定導入基因或siRNA的病毒載體系統，其感染效率可以達到100%。慢病毒和細胞結合后通過包裝蛋白將含有目的基因或者干擾序列釋放到細胞內。慢病毒RNA通過逆轉錄酶轉錄為DNA。DNA整合前復合
病毒包裝技術——慢病毒載體構建及包裝流程
一、實驗流程（1和2為并列步驟）慢病毒過表達質粒載體的構建設計上下游特異性擴增引物，同時引入酶切位點，PCR(采用高保真KOD酶，3K內突變率為0%)從模板中（CDNA質粒或者文庫）調取目的基因CDS區（coding sequence）連入T載體。將CDS區從T載體上切下，裝入慢病毒過表達質粒載體。
高滴定度慢病毒載體產物實驗
實驗材料 293T細胞 試劑、試劑盒 杜氏改良培養基TE 緩沖液CaCl22 X HeBSPBS漂白劑 儀器、耗材 乙醇噴壺組織培養皿培養箱滅菌離心管過濾器組織培養瓶 實驗步驟 展開
高滴定度慢病毒載體產物實驗
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本載體轉染 293T 細胞實驗步驟實驗材料293T細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒杜氏改良培養基 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
高滴定度慢病毒載體產物實驗
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本載體轉染 293T 細胞實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 293T細胞
人感染豬流感相關知識問答
人感染豬流感相關知識問答(供參考) 什么是豬流感? 豬流感是由A型流感病毒引起的豬的呼吸道疾病，是一種感染率高而死亡率低的動物傳染病。豬流感通常只引起豬發病，但有時也能突破種間屏障而感染人。人感染豬流感，通常與接觸豬有關，但目前墨西哥、美國發生的人感染豬流感已證實人與人之間可傳播。
輪狀病毒防治基本知識問答
1．什么是輪狀病毒？輪狀病毒于1973年最早由Bishop用電鏡從澳大利亞腹瀉兒童腸活檢上皮細胞內發現，形如車輪狀，故命為“ 輪狀病毒”。 目前，輪狀病毒分為7組，即A～G組。A、B、C三組能引起人畜共患的腹瀉，其他各組主要引起動物腹瀉。A組輪狀病毒主要引起嬰幼兒腹瀉，發病高峰在秋冬季節，故
病毒包裝技術3——慢病毒載體構建及包裝流程介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上，37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落，挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液，則需取庫存質粒進行轉化，然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單
化合物活性預測相關知識問答
Docking相關 A:新手想問一下，docking結果怎么判斷小分子和蛋白產生了結合呀，形成了疏水鍵或氫鍵嗎? B:打分越低越好，一般會設置一個已知的配體用來做參照，或者說用來檢驗參數是否合理。 A:我是選擇了有配體的蛋白，處理了蛋白和分子后進行docking，得到這個結果。
使用串聯切向流過濾高效濃縮慢病毒載體
簡介VSV-G-假型自我滅活慢病毒載體是不可或缺的生物實驗工具之一，與之前的γ-逆轉錄病毒載體不同的是，慢病毒載體可轉導非分裂細胞，并可攜帶更多的轉基因盒，在細胞中的轉基因表達時間也更長，即可獲得更高的滴度，而其遺傳毒性相對較低。一般情況下產毒細胞上清液中的載體滴度足以轉導常規細胞系，但原代細胞較難