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選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個物相中，如鹽析，有機溶劑提取，層析和結晶等；二是將混合物置于單一物相中，通過物理力場的作用使各組分分配于來同區域而達到分離目的，如電泳，超速離心，超濾等。在所有這些方法的應用中必須注意保存生物大分子的完整性，防止酸、鹼、高溫，劇烈機械作用而導致所提物質生物活性的喪失。蛋白質的制備一般分為以下四個階段：選擇材料和預處理，細胞的破碎及細胞器的分離，提取和純化，濃細、干燥和保存。微生物、植物和動物都可做為制備蛋白質的原材料，所選用的材料主要依據實驗目的來確定。對于微生物，應注意它的生長期，在微生物的對數生長期，酶和核酸的含量較高......閱讀全文
1蛋白質提取與制備蛋白質提取與制備蛋白質種類很多，性質上的差異很大，既或是同類蛋白質，因選用材料不同，使用方法差別也很大，且又處于不同的體系中，因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質的分離。但多數分離工作中的關鍵部分基本手段還是共同的，大部分蛋白質均可溶于水、稀鹽、稀酸或稀堿溶液中，少數與脂類結合
一、前沿生物技術主題 1.蛋白質測序新技術新裝備及配套試劑國產化 (1)陣列毛細管柱蛋白質分離-陣列點樣裝置 研制二維陣列毛細管分離新裝置，第一維分離柱可分離48個餾分,第二維維陣列毛細管分離柱可同時分離48個流份；開發陣列紫外檢測器； 研制多柱點樣頭并行點樣器和流份收集器；開發
實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進
實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗 實驗步驟 一、層
預計在新奇的一級分子和生物仿制藥實體方面將會有突出的增長。一些進步的是改良的分析、開發和相互作用。現在已有許多用于去除關的方法，包括凍干、反向萃取、溶質析出，precipitation、透析(溶劑交換） 、超濾和層析技術。值得注意的是，在眾多微和設備發展的支持下，小型化和高通量的蛋白質分析取得了極大
一，蛋白質（包括酶）的提取 大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液，少數與脂類結合的蛋白質則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中，因些，可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。（一）水溶液提取法 稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑，通常用量是原材料體積的1
淺述蛋白質分離純化的新技術摘 要： 本文主要介紹了濁點萃取法、置換色譜法、親和層析法、親和色譜法、凝膠電泳、雙水相萃取等蛋白質的最新分離純化技術，綜和近年來國內外的一些研究結果，結合實際應用的例子，分析了各種分離純化方法的優點，同時指出其不足之處。文章最后展望了蛋白質分離純化技術的發展趨勢。&nbs
選擇材料及預處理 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到
四、細胞裂解的流程、試劑和技巧下文所述的以細胞提取物的產品質量為出發點的各種策略和指導方針適用于大多數下游純化及分析過程。盡管介紹的重點是在小規模或較大的實驗室規模的大腸桿菌裂解上，但是一些技術還是可以用于其他來源的細胞裂解和細胞內蛋白質提取，并且是可以放大的。廣泛的蛋白質純化方面的文獻為這里列出的
定量蛋白試劑盒 在蛋白分析相關的試劑消耗品方面，Thermo Fisher Scientific都是直接在儀器上開發的。由于試劑和儀器時配套的，從而能夠提高分析效率。例如細胞培養氨基酸穩定同位素標記技術（SILAC）和串聯質譜標簽（tandem mass tag）試劑盒。 細胞培養氨基酸穩定
表2－1 室溫下由S1提高到S2時每升加固體硫酸銨的克數 0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242
作為中國領先的生物制藥技術推廣平臺，由中國生物工程學會《生物產業技術》雜志社主辦，北京中航環宇國際文化交流中心承辦的“CBPT生物制藥分離純化技術論壇”在生物醫藥行業專家領導和朋友們的支持下，已連續成功舉辦了兩屆。是生物醫藥技術領域規模最大、學術水平最高、科研成果最新和專業性最強的年度行業盛會，
一、 中藥產業化形勢及應用新技術的意義 中藥為我國傳統醫藥，用中藥防病治病在我國具有悠久的歷史。由于化學藥品的毒副作用逐漸被人們所認識及合成一個新藥又需巨大的投資，西醫西藥對威脅人類健康的常見病、疑難病的治療藥物還遠遠不能滿足臨床的需要，因此，全世界范圍內掀起了中醫中藥熱。面
2014年3月12日，由廣東省對外科技交流中心、國藥勵展展覽有限責任公司、廣東國際科技貿易展覽公司主辦的廣州國際分析測試及實驗室設備展覽會暨技術研討會(China Lab 2014)在廣州保利世貿博覽館盛大開幕。12日上午召開的中國(廣州)分析測試論壇主會場共邀請到諸位專家學者就蛋白質的
隨著分子生物學的發展，越來越多的科研人員熟練掌握了分子生物學的各種試驗技術，并研制成套試劑盒，使基因克隆表達變得越來越容易。但分子生物學的上游工作往往并非是最終目的，分子克隆與表達的關鍵是要拿到純的表達產物，以研究其生物學作用，或者大量生產出可用于疾病治療的生物制品。相對與上游工作來說，分子克隆的下
蛋白質沉淀技術 實驗步驟 一、AS 沉淀
利用核苷酸交換和剪切技術進行DNA碎裂和定向進化 實驗材料 T4 DNA 連接
實驗步驟一、親和介質的選擇親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標，既保證較弱的非特異性吸附，又可以在整個過程中維持良好的流動特征。優選介質應具備便宜、易獲取和使用簡便的特點。
隨著分子生物學的發展，越來越多的科研人員熟練掌握了分子生物學的各種試驗技術，并研制成套試劑盒，使基因克隆表達變得越來越容易。但分子生物學的上游工作往往并非是最終目的，分子克隆與表達的關鍵是要拿到純的表達產物，以研究其生物學作用，或者大量生產出可用于疾病治療的生物制品。相對與上游工作來說，分子克隆
Part 1 —— 前 言 | 組織gDNA提取和純化是分子生物學的基本實驗技術，其原理和操作絕大數生物學相關的研究人員都有接觸。困擾實驗人員的是當樣本量過大時，以1.5ml離心管為基本體系的組織核苷酸提取模式，同時操作20個以上的樣品有非常繁瑣的實驗過程和樣品間有錯亂
實驗步驟 一、親和介質的選擇 親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標，既保證較弱的非特異性吸附，又可以在整個過
許華林 張曼人類基因組計劃與美國塞萊拉遺傳信息公司于 2001 年在美國《科學》雜志和英國《自然》雜志聯合宣布，他們繪制出了準確、清晰、完整的人類基因組圖譜，至此，人類基因組計劃已基本完成，隨著后基因組時代的到來，蛋白質組學得到了空前的發展，蛋白質組研究旨在揭示基因表達的真正執行生命活動的全部蛋白質
摘要：蛋白質是生物體的重要組成部分，在現代生物制藥領域有著重要的作用，本文介紹了現代生物分離技術反膠束萃取、雙水相萃取和電泳在多肽蛋白質分離中的應用和現狀。關鍵詞：蛋白質 反膠束萃取 雙水相萃取 電泳一、前言隨著基因工程和細胞工程的發
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
摘要：蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異，利用一種同時多種性質差異，在兼顧收率和純度的情況下，選擇蛋白質提純的方法。關鍵詞：蛋白質 分離純化前言 蛋白
摘要：蛋白質的一級、二級、三級和四級結構決定了它的物理、化學、生物化學、物理化學和生物學性質，綜述了不同蛋白質之間的性質存在差異或者改變條件是使之具有差異，利用一種同時多種性質差異，在兼顧收率和純度的情況下，選擇蛋白質提純的方法。關鍵詞：蛋白質 分離純化前言 蛋白
人類基因組計劃與美國塞萊拉遺傳信息公司于 2001 年在美國《科學》雜志和英國《自然》雜志聯合宣布，他們繪制出了準確、清晰、完整的人類基因組圖譜，至此，人類基因組計劃已基本完成，隨著后基因組時代的到來，蛋白質組學得到了空前的發展，蛋白質組研究旨在揭示基因表達的真正執行生命活動的全部蛋白質的
1 植物群體遺傳蛋白質組學 1.l 遺傳多樣性蛋白質研究基于基因組學的一些遺傳標記，如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen
表達載體的構建是生物技術和所需蛋白質產生的基本工具，本文總結了pET-32α（+）載體技術的構建，該技術通常用于研究實驗室。該方法包括獲得用于構建載體的外源DNA片段，將DNA片段亞克隆到pET-32α（+）表達載體中，在大腸桿菌 BL21（DE3）中進行蛋白質表達以及在大腸桿菌中在天然條件下進