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2. 轉化子、表達子的篩選轉化子的篩選，由于許多質粒是穿梭質粒，因此大多具有E.coli中的抗性篩選標記，篩選起來是很方便的（當然，我不清楚細胞方面的篩選，一般使用病毒載體吧，希望高手們介紹一下）。但是轉化成功的并不意味著能夠成功表達目的蛋白了，因此還需要“表達子”的篩選，尤其是整合入基因組的片斷（E.coli一般是游離質粒表達，好像不用再篩選了，有就有，沒有就沒有了）。我做的是畢赤酵母(GS115,pPIC9k)，在篩選過程中遇到了不小的問題，一般如果目的蛋白有些容易檢測的特殊活性（比如抑菌活性），則篩選起來是比較容易的。但是如果沒有，由于酵母是整合入基因組表達的，就不太好說了，我用原位點雜交的方法篩選過，效果不好，但篩選量倒挺大；還有就是5ml小量發酵篩選，工作量就比較大了，而且篩了400-500個也沒有。還有就是發現不同的篩選方法獲得的陽性菌株好像不是很平行，將上述篩到的菌株放大到100ml時就沒有了。請教師兄，他說有可能......閱讀全文
2. 轉化子、表達子的篩選轉化子的篩選，由于許多質粒是穿梭質粒，因此大多具有E.coli中的抗性篩選標記，篩選起來是很方便的（當然，我不清楚細胞方面的篩選，一般使用病毒載體吧，希望高手們介紹一下）。但是轉化成功的并不意味著能夠成功表達目的蛋白了，因此還需要“表達子”的篩選，尤其是整合入基因組的片斷（
4. 菌種的保存、退化一般來說是加甘油20%左右，-70保存；或制成干粉保存。但是在做甲醇酵母時發現了個問題，就是重組工程菌的退化現象比較嚴重，一般都是學生做得好好的，但是畢業以后下面的師弟一接手，蛋白就不表達了，或表達量非常的低。連續好幾個師兄的結果都是如此，很是奇怪。我猜測可能是由于整合入基因組
異源蛋白的表達是個很復雜的問題，有許許多多的影響因素，而且由于蛋白本身千差萬別，很難有一個很完善或很標準的流程方法。另外，表達的宿主也是多種多樣，目前比較常用的包括E.coli，酵母（以甲醇酵母居多），昆蟲細胞，哺乳動物細胞等，各自有著其本身的特點，優缺點各異。1. 宿主的選擇。表達宿主雖眾多，但比
**瘙癢是**不適中很常見的一種表現，對女性的生活和工作有一定影響。試想一下，女性朋友在非私密空間工作時如果出現了**瘙癢，這種想撓不能撓的狀態多么尷尬。 **瘙癢是什么原因引起的呢？**騷癢常見原因： 1、因為**屬肝，所以**癢主要責在于肝。引起**癢的主要原因為氣滯血瘀和氣血不足
哈哈,深蒙各位俠士對于兄弟的厚愛和信賴,恐怕我會令大家失望真正做western我也做的不多,不過由于效果都不是很差,所以就對于整個過程中的某些參數對于結果的影響沒有深究,正所謂真正經歷實驗失敗的人才會對具體細節理解深刻一樣,但是從關于western方面的文獻和資料來看,有關各個參數對于結果的影響是有
液相色譜柱使用經驗談色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性
靜脈血栓以紅血栓（或稱凝固性血栓）最常見。血栓形成后可向主干靜脈近端和遠端滋長和蔓延；其后在纖維溶解酶的作用下血栓可溶解消散，或血栓與靜脈壁粘連并逐漸纖維機化；最終形成邊緣毛糙、管徑粗細不一的再通靜脈。同時因靜脈瓣膜的破壞，造成繼發性深靜脈瓣膜功能不全。腫瘤外科因其疾病特殊性，患深靜脈血栓風險更高，
對于大多數生物學過程來說，所見即所得。由于病毒在感染性疾病中的作用，許多生物學家希望能夠實時觀察病毒的活動。要觀察病毒感染細胞和病毒裝配的過程，熒光成像是少數幾種非介入性的途徑之一。進行這樣的研究需要帶靈敏相機的高質量顯微鏡，能支持每秒多次成像。還需要確認熒光標簽和實驗設置不會干擾到我們想要研究
色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。1、樣品的前處理：
1）檢測RNA溶液的吸光度 280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0時，我們認為RNA中蛋白或者時其他有機物的污染是可以容忍的，不過要注意，當你用Tris