化學發光底物（化學發光劑）
在化學發光反應中參與能量轉移并最終以發射光子的形式釋放能量的化合物稱為化學發光劑或發光底物。在發光免疫技術中常用的化學發光底物有以下幾類。 1、氨基苯二酰肼類主要是魯米諾及異魯米諾衍生物，是最常用的一類化學發光劑。魯米諾（luminol，5＇-氨基-2，3-二氫-1，4-酞嗪二酮）的分子結構及化學反應式如下： 魯米諾在免疫測定中既可用作標記物，也可用作過氧化物酶的底物。異魯米諾衍生物ASEI和ABMI等也是常用的標記物。 2、吖啶酯（acridiniumester，AE）類類發光劑不需催化劑的存在，在有過氧化氫的稀堿溶液中即能發光。反應式如下： 電化學發光原理 上式反應迅速，在1～5s內即可完成；具有背景低、信比高的優點，其檢測極限可達5×10-9mol，發光量與AE濃度呈良好的線性反應，是一類的標記物。 3、......閱讀全文
化學發光底物（化學發光劑）
在化學發光反應中參與能量轉移并最終以發射光子的形式釋放能量的化合物稱為化學發光劑或發光底物。在發光免疫技術中常用的化學發光底物有以下幾類。 1、氨基苯二酰肼類主要是魯米諾及異魯米諾衍生物，是最常用的一類化學發光劑。魯米諾（luminol，5＇-氨基-2，3-二氫-1，
什么是底物化學發光？
根過氧化酶使試劑中的發光物(luminol)氧化并發光,而試劑中含有增強劑這使得發光增強了1000倍。在免疫印跡中,將復雜的蛋白混合物經sds-page分離,并轉移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫學檢測,經HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接(標記一抗)或間接(標記二抗)反應。
底物化學發光的用途
非放射性發光系統,用于檢測固定在膜上的蛋白,其敏感性達1-5pg。用x光片可快速地獲得永久的硬拷貝結果。所含獨特的底物足以維持12小時以上的發光,便于反復曝光操作,免疫印跡膜經抗體脫卸處理后可供再次抗體探查使用。適用于痕量蛋白或核酸檢測。
底物化學發光操作注意
1. 試劑每個批號均獨立優化,請不要混用或稀釋試劑以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 適當地封閉和洗滌膜片至關重要;4. 使用前配置化學發光試劑,配置足夠覆蓋膜片即可,棄去使用過的混合試劑;5. 使用干凈取樣頭取用每種試劑;6. 第一張片子建議曝光1分鐘,觀察結果后判斷最佳曝光時間可
底物化學發光使用方法
1. 印跡膜制備 按常規方法完成SDS-PAGE和電轉膜操作,適當的封閉非常重要。可以通過標記一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交聯物。仔細地淋洗對于降低背景非常重要,在與HRP交聯物溫育后,膜片更需仔細洗滌,所有步驟均在室溫下完成。2. 化學發光試劑的配置 在使用前等量混合a液和
化學發光劑必備條件
化學發光劑必須具備下列條件：①發光的量子產率高；②它的物理、化學特性要與被標記或測定的物質相匹配；③能與抗原或抗體形成穩定的偶聯結合物；④其化學發光常是氧化反應的結果；⑤在所使用的濃度范圍內對生物體沒有毒性。
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子。
化學發光劑必須具備哪些條件？
①發光的量子產率高；②它的物理、化學特性要與被標記或測定的物質相匹配；③能與抗原或抗體形成穩定的偶聯結合物；④其化學發光常是氧化反應的結果；⑤在所使用的濃度范圍內對生物體沒有毒性。
直接化學發光常用的發光劑
吖啶酯和三聯吡啶釕。吖啶酯是一類可用作化學發光標記物的化學物質，加入發光啟動試劑后0.4s左右發射光強度達到最大，半衰期為0.9s左右。三聯吡啶釕其標記物的發光原理是，一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應。
化學發光底物檢測方法結果陰性的原因和處理辦法
更換其它二抗,再次進行檢測;再次檢測結果仍為陰性,證明底物喪失活性。
化學發光底物檢測方法結果陽性的原因和處理辦法
認為二抗及底物活性良好； Western Blot 系統需要進一步優化 優化抗原和抗體濃度的斑點雜交方法:斑 點 雜 交 方 法——優 化 抗 原 和 抗 體 濃 度 對于一個給定的抗原,抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。抗原和抗體濃度可通
化學發光底物檢測方法結果陽性的原因和處理辦法
認為二抗及底物活性良好； Western Blot 系統需要進一步優化 優化抗原和抗體濃度的斑點雜交方法:斑 點 雜 交 方 法——優 化 抗 原 和 抗 體 濃 度 對于一個給定的抗原,抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。抗原和抗體濃度可通
底物因素對化學發光法檢測促甲狀腺激素的影響
在臨床實驗中，要求所有項目均應該嚴格按照標準化操作程序（SOP）進行操作，但實際工作中由于人為或外界因素，實驗進程往往會受到干擾，對結果造成一定影響。促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標，化學發光法因具有快速、準確、靈敏
化學發光免疫分析方法中，化學發光劑的選擇有哪些考量因素？
在化學發光免疫分析方法中，選擇化學發光劑時通常需要考慮以下因素：發光效率：發光劑的發光效率越高，產生的信號越強，檢測靈敏度就可能越高。穩定性：化學發光劑在儲存和反應過程中應保持穩定，不易分解或變質，以確保檢測結果的重復性和準確性。水溶性：良好的水溶性有助于與免疫反應體系中的其他成分均勻混合，提高反應
化學發光法的發光劑及原理
化學發光是某種物質分子吸收化學能而產生的光輻射。任何一個化學發光反應都包括兩個關鍵步驟，即化學激發和發光。因此，一個化學反應要成為發光反應，必須滿足兩個條件：第一：反應必須提供足夠的能量（170 ～ 300KJ / mol），第二，這些化學能必須能被某種物質分子吸收而產生電子激發態，并且有足夠的
蛋白質免疫印跡（Western－Blot－）底物化學發光－ECL－法
蛋白質免疫印跡（Western Blot ）可以：（1）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA 相互作用后續分析。實驗方法原理———底物化學發光 ECL 法Western 免疫印跡（Western B
化學發光儀器
化學發光分析儀是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化， 形成一個激發態的中間體， 當這種激發態中間體回到穩定的基態時， 同時發射出光子（hM）, 利用發光信號測量儀器測量光量子產額。
化學發光儀器
電化學發光儀是用于檢測人體內分泌激素的醫學儀器。該儀器由日本日立公司生產出品，采用瑞士羅氏公司全套進口試劑，應用國際領先的電化學發光技術，檢測多項內分泌激素。其特點是快速、微量、準確。為內分泌疾病的準確診斷、治療提供重要依據。
化學發光技術
放射免疫分析法有很高的靈敏度，但存在著放射性防護和同位素污染等問題。近年來，許多非放射性同位素標記的免疫分析方法相繼出現。其中，在化學發光反應及抗原-抗體特異性識別基礎上建立起來的一種新的非放射免疫分析技術--化學發光免疫分析法，由于這種方法具有靈敏度高，特異性強，精密度好，線性范圍寬，儀器設備簡單
化學發光原理
化學發光的原理是,激發態的分子經過結合、光解和重新結合的化學反應,能量從激發態轉變到基態,從而發出光。關于化學發光檢測原理，化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析,是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析儀器。在這種反應中,激發態的分子可以通過自發熒光,吸收光能,再釋放出大量的可見光來實現發光。
化學發光特點
極高的靈敏度，熒光蟲素（LH2）（luciferin）、熒光素酶（luciferase）和磷酸三腺苷（ATP）的化學反應可測定2×10-17?mol/L的ATP，可檢測出一個細菌中的的ATP含量。?2.由于可以利用的化學發光反應較少，而且化學發光的光譜是由受激分子或原子決定的，一般來說也是由化學反應
蛋白質免疫印跡（Western－Blot，WB－）——底物化學發光ECL法
蛋白質免疫印跡可應用于：（1）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。實驗方法原理Western免疫印跡，是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體
化學發光定氮儀的化學發光技術解析
??電化學發光是通過對電極施加一定的電壓進行電化學反應而發光，通過測量化學發光光譜和強度來測定物質含量的一種痕量分析方法。它將電分析化學手段和化學發光方法相結合，具有獨特的優點，如重現性和靈敏度進一步提高，在多種組份同時存在時，可施加不同波形、不同電壓的信號進行選擇性測量等，是潛在的分析手段之一。化
化學發光法和電化學發光哪個準確
化學發光法：其是利用化學反應產生的能量進行激發發光，其具有儀器簡單、檢測限低、線性范圍寬等優點，在化學分析方面應用廣泛。與熒光法相比，化學發光法不需要外來的光源，從而減少了光散射，降低了噪音信號的干擾，提高了檢測的靈敏度，擴大了線性動態范圍。其缺點是選擇性差，會對一個系列的化合物做出反應，而不是針對
實驗室分析儀器化學發光免疫分析儀的底物
HRP 標記的CLEIA常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲酰肼) , 是一類重要的發光試劑。其結構如圖4 所示。魯米諾的氧化反應在堿性緩沖液中進行,在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) ,
凝膠/化學發光成像系統的化學發光檢測方法概念
化學發光檢測方法的簡單性使得它的應用很簡單并且完全可以自動化。但是它的靈敏度又是怎么樣的呢？化學發光有如下兩個內在的優勢：1．絕大多數的樣品沒有“背景”信號，如它們自身不發光。2．化學發光的檢測不是一個比例測試，這是與熒光和吸收或比色測試不同的。在熒光測試中，具有小的Stokes Shift的熒光基
凝膠/化學發光成像系統描繪化學發光檢測線性
線性描述的是信號與分析檢測物濃度范圍之間的關系。理想的比例因子是常數；信號點與分析檢測物是一條直線關系。標準曲線可以不是直線，如s形，仍是有用的。
化學發光免疫分析
英文名稱：(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發展起來的一項最新