底物化學發光操作注意
1. 試劑每個批號均獨立優化,請不要混用或稀釋試劑以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 適當地封閉和洗滌膜片至關重要;4. 使用前配置化學發光試劑,配置足夠覆蓋膜片即可,棄去使用過的混合試劑;5. 使用干凈取樣頭取用每種試劑;6. 第一張片子建議曝光1分鐘,觀察結果后判斷最佳曝光時間可從30秒至2小時不等;7. 除了放射自顯影片曝光和洗片處理外,所有步驟均不必在暗室中操作;8. 膜片可經適當方法洗脫原有抗體,再次印跡使用,在此情況下,此試劑更為理想;9. 因為它不象生色物質需要從膜片上清除底物。10. nan3能抑制HRP活性,應避免使用nan3。......閱讀全文
底物化學發光操作注意
1. 試劑每個批號均獨立優化,請不要混用或稀釋試劑以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 適當地封閉和洗滌膜片至關重要;4. 使用前配置化學發光試劑,配置足夠覆蓋膜片即可,棄去使用過的混合試劑;5. 使用干凈取樣頭取用每種試劑;6. 第一張片子建議曝光1分鐘,觀察結果后判斷最佳曝光時間可
化學發光底物（化學發光劑）
在化學發光反應中參與能量轉移并最終以發射光子的形式釋放能量的化合物稱為化學發光劑或發光底物。在發光免疫技術中常用的化學發光底物有以下幾類。 1、氨基苯二酰肼類主要是魯米諾及異魯米諾衍生物，是最常用的一類化學發光劑。魯米諾（luminol，5＇-氨基-2，3-二氫-1，
什么是底物化學發光？
根過氧化酶使試劑中的發光物(luminol)氧化并發光,而試劑中含有增強劑這使得發光增強了1000倍。在免疫印跡中,將復雜的蛋白混合物經sds-page分離,并轉移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫學檢測,經HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接(標記一抗)或間接(標記二抗)反應。
底物化學發光的用途
非放射性發光系統,用于檢測固定在膜上的蛋白,其敏感性達1-5pg。用x光片可快速地獲得永久的硬拷貝結果。所含獨特的底物足以維持12小時以上的發光,便于反復曝光操作,免疫印跡膜經抗體脫卸處理后可供再次抗體探查使用。適用于痕量蛋白或核酸檢測。
底物化學發光使用方法
1. 印跡膜制備 按常規方法完成SDS-PAGE和電轉膜操作,適當的封閉非常重要。可以通過標記一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交聯物。仔細地淋洗對于降低背景非常重要,在與HRP交聯物溫育后,膜片更需仔細洗滌,所有步驟均在室溫下完成。2. 化學發光試劑的配置 在使用前等量混合a液和
HRP底物歸類以及操作流程
二氨基聯苯胺／金屬鹽 DAB是辣根過氧化物酶最比較敏感、常見的底物。它造成明顯的深棕色物質，在水和醇中不融解。大部分狀況下，強烈推薦在DAB中添加不一樣的金屬正離子。當添加金屬鹽如鈷、鎳至底物液中，辣根過氧化物酶能夠更為比較敏感。該類反映物質呈暗灰藍色至灰黑色，且在水及醇中平穩。DAB／金
HRP底物分類及其操作步驟
底物范圍較廣，包括二氨基聯苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基聯苯胺／金屬鹽?DAB是辣根過氧化物酶最敏感、常用的底物。它產生強烈的棕色產物，在水和醇中不溶解。多數情況下，推薦在DAB中加入不同的金屬離子。當加入金屬鹽如鈷、鎳至底物液中，辣根過氧化物酶可以更加敏感。此類反應產物呈暗藍灰色至黑
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子
化學發光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些應用
化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。作為直接化學發光免疫分析的化學發光劑，用于抗原、抗體、蛋白質等的檢測分析。檢測分析過程中無需附加催化劑，DMAE-NHS在堿性介質中被H2O2氧化時，經過一個二氧化酮的中間體，產生電激發的N-甲基吖啶酮，其返回基態時，在430nm處釋放光子。
化學發光底物檢測方法結果陰性的原因和處理辦法
更換其它二抗,再次進行檢測;再次檢測結果仍為陰性,證明底物喪失活性。
化學發光底物檢測方法結果陽性的原因和處理辦法
認為二抗及底物活性良好； Western Blot 系統需要進一步優化 優化抗原和抗體濃度的斑點雜交方法:斑 點 雜 交 方 法——優 化 抗 原 和 抗 體 濃 度 對于一個給定的抗原,抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。抗原和抗體濃度可通
化學發光底物檢測方法結果陽性的原因和處理辦法
認為二抗及底物活性良好； Western Blot 系統需要進一步優化 優化抗原和抗體濃度的斑點雜交方法:斑 點 雜 交 方 法——優 化 抗 原 和 抗 體 濃 度 對于一個給定的抗原,抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。抗原和抗體濃度可通
底物因素對化學發光法檢測促甲狀腺激素的影響
在臨床實驗中，要求所有項目均應該嚴格按照標準化操作程序（SOP）進行操作，但實際工作中由于人為或外界因素，實驗進程往往會受到干擾，對結果造成一定影響。促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標，化學發光法因具有快速、準確、靈敏
在化學發光酶標儀的操作中應注意以下事項
化學發光酶標儀既可以使用和分光光度計相同的單色器，也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。和光電比色計一樣，使用濾光片作過濾裝置時，將濾光片設計到微孔板的前面和后面效果是一樣的。 化學發光酶標儀的工作原理及結構 由酶聯免疫吸附實驗法可知，酶標儀應該用比色法來分析抗原或抗體的含量，即它應依照比色原理進
在化學發光酶標儀的操作中應注意以下事項
化學發光酶標儀既可以使用和分光光度計相同的單色器，也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。和光電比色計一樣，使用濾光片作過濾裝置時，將濾光片設計到微孔板的前面和后面效果是一樣的。 化學發光酶標儀的工作原理及結構 由酶聯免疫吸附實驗法可知，酶標儀應該用比色法來分析抗原或抗體的含量，即它應依照比色原理進
蛋白質免疫印跡（Western－Blot－）底物化學發光－ECL－法
蛋白質免疫印跡（Western Blot ）可以：（1）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA 相互作用后續分析。實驗方法原理———底物化學發光 ECL 法Western 免疫印跡（Western B
化學發光探針技術的操作
利用化學發光雜交保護分析的原理檢測空腸彎曲菌、單核細胞增生性李斯特氏菌、大腸桿菌O157和金黃色葡萄球菌4種致病菌特異性RNA序列，這種方法無需物理分離，利用吖啶酯標記DNA探針，通過核酸雜交保護分析法，即應用人工合成的靶DNA保守區的寡 核苷酸，在合成時引入一個烷氨基的手臂，經活化后接上吖啶酯
化學發光實驗的操作步驟
1、將A和B兩種試劑在保鮮膜上等體積混合；1min后，將膜蛋白面朝下與此混合液充分接觸；1min后，將膜移至另一保鮮膜上，去盡殘液，包好，放入X-光片夾中。2、在暗室中，將1×顯影液和定影液分別倒入塑料盤中；在紅燈下取出X－光片，用切紙刀剪裁適當大小（比膜的長和寬均需大1cm）；打開X-光片夾，把X
化學發光實驗的操作步驟
1、將A和B兩種試劑在保鮮膜上等體積混合；1min后，將膜蛋白面朝下與此混合液充分接觸；1min后，將膜移至另一保鮮膜上，去盡殘液，包好，放入X-光片夾中。2、在暗室中，將1×顯影液和定影液分別倒入塑料盤中；在紅燈下取出X－光片，用切紙刀剪裁適當大小（比膜的長和寬均需大1cm）；打開X-光片夾，把X
蛋白質免疫印跡（Western－Blot，WB－）——底物化學發光ECL法
蛋白質免疫印跡可應用于：（1）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。實驗方法原理Western免疫印跡，是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體
實驗室分析儀器化學發光免疫分析儀的底物
HRP 標記的CLEIA常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲酰肼) , 是一類重要的發光試劑。其結構如圖4 所示。魯米諾的氧化反應在堿性緩沖液中進行,在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態氧(1O 2 ) ,
底物的定義
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。
什么是底物？
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。
底物的定義
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。
什么是底物？
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，經酶作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。在異裂反應中，底物即為親電試劑或親核試劑進攻的物質特定的底物會在特定的酶作用下，合成或分解。
化學發光免疫分析試劑標準操作規范
一、?????試劑盒的保存1.???????保存條件：1.1??????試劑盒應放置于2～8℃冰箱中存放。1.2??????試劑盒在取用過程中禁止顛倒，以避免試劑被污染。1.3??????有特殊要求的試劑應嚴格按照操作說明書要求的保存條件保存。2.????????保存時間：2.1???未開封試劑盒于
什么是假底物？
假底物是可以特異地結合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物結合的物質。
底物溶液的配制
pH 5.0磷酸-檸檬酸緩沖液加入鄰苯二胺1mg/ml，再加入30%的H2O2 (1μl/ml)溶解后即為ELISA底物液，臨用前配制，避光保存。
什么是自殺底物？
自殺底物是一類酶的天然底物的衍生物或類似物，在它們的結構中含有一種化學活性基團，當酶把他們作為底物結合時，其潛在的化學基團能被解開或激活，并與酶的活性部位發生共價結合，使結合物停留在某種狀態，從而不能分解成產物，酶因而致“死”，此過程稱為酶的自殺，這類底物稱為自殺底物(suicide substra