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實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 NaCl 洗液Laemmli 上樣緩沖液ATP磷酸肌酸無菌蒸餾水尿素緩沖液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液鏈親和素瓊脂糖凝膠封閉緩沖液NP-40儀器、耗材 鏈親和素瓊脂糖凝膠Dounce 玻璃勻漿器微量透析杯透析袋實驗步驟 一、材料與設備1. AAS 法純化 RNP緩沖液應新鮮配制并預冷至 4°C，Pefaloc（Boehringer 公司）及 DTT 在用前加入緩沖液中。(1) 生物素化的 2'-O-甲基 RNA 寡核苷酸可在普逋 DNA 合成儀上合成，在實驗中也可以采用 2'-O-烯丙基 RNA 寡核苷酸代替 2'-O-甲基 RNA 寡核苷酸，這可以降低它與非特異性蛋白質的結合。(2) 鏈親和素瓊脂糖凝膠。(3) 細胞核提取物最好從新鮮培養的 Hela 細胞制備，也可直接從購買的凍存細胞制備。(4) Dounce 玻璃勻漿器，A 型及 B 型研杵。(5) 1 ......閱讀全文
? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 NaCl 洗液 Laemmli 上樣緩沖液
實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 NaCl 洗液Laemmli 上樣緩沖液ATP磷酸肌酸無菌蒸餾水尿素緩沖液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液鏈親和素瓊脂糖凝膠封閉緩沖液NP-40 儀器、耗材 鏈親和素瓊脂糖凝膠Dounce 玻璃勻漿器微量透析杯透析袋
實驗材料 HeLa 細胞 試劑、試劑盒 NaCl 洗液Laemmli 上樣緩沖液ATP磷酸肌酸無菌蒸餾水尿素緩沖液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液鏈親和素瓊脂糖凝膠封閉緩沖液NP-40 儀器、耗材 鏈親和素瓊脂糖凝膠Dounce 玻璃勻漿器微量透析杯透析袋 實驗步驟 一、材料與設備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 細胞裂解緩沖液 NaOH Tris-緩沖鹽溶液 TBS Triton X-100
本節介紹一種利用結合細菌蛋白質的基質去除粗制免疫球蛋白中與細菌編碼蛋白質發生反應成分的方法（de Wet et al.1984)。該方法也適用于利用培養的細胞或組織抽提物去除交叉反應抗體。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。 試劑
試劑、試劑盒 緩沖液和溶液細胞裂解緩沖液NaOHTris-緩沖鹽溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制備用于文庫篩選的抗體大腸桿菌培養液 儀器、耗材 離心和轉子親和層析柱溴化氫活化的 Sepharose 4B 實驗步驟 材料 緩沖液和溶液 貯存液，緩
步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DN
實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講，該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑，但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估，或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測
核酸親和柱的應用極大地促進了核酸結合調節蛋白特性的研究，這些蛋白質涉及基因表達、染色體修復和復制、基因重組等的調控。核酸結合蛋白可以結合單鏈 DNA、雙鏈 DNA 或 RNA。DNA 結合蛋白結合 DNA 可以是序列特異的，也可以是非特異的。此外，含有特異寡核苷酸的親和樹脂能用于某些酶的分離，這些
核酸親和層析 實驗材料 樣品蛋白質 試劑、試劑盒 平衡緩沖液（Tris-HClKClEDTA）非特異 DNA 實驗步驟 在上樣品液到核酸親和柱之前，建議首先采用其他的純化方法，如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物，