磷酸鈣沉淀法的方法和應該特點
磷酸鈣-DNA 共沉淀法(calcium phosphate-DNA coprecipitation),簡稱磷酸沉淀法,能把外源基因與入噬菌體DNA 的重組子導人大腸桿菌和哺乳動物細胞。磷酸鈣沉淀法因為試劑易取得、價格便宜而被廣泛用于瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將DNA和CaCl2混合,然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣沉淀,最后把含有沉淀的混懸液加到培養的細胞上,通過細胞胞膜的內吞作用攝入DNA。磷酸鈣似乎還通過抑制血清中和細胞內的核酸酶活性而保護外源DNA免受降解.......閱讀全文
磷酸鈣沉淀法的方法和應該特點
磷酸鈣-DNA 共沉淀法(calcium phosphate-DNA coprecipitation),簡稱磷酸沉淀法,能把外源基因與入噬菌體DNA 的重組子導人大腸桿菌和哺乳動物細胞。磷酸鈣沉淀法因為試劑易取得、價格便宜而被廣泛用于瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將DNA和CaCl2混合,然后加入到P
磷酸鈣沉淀法的方法原理
核酸以磷酸鈣-DNA共沉淀物的形成出現時,可使DNA黏附在細胞表面,利于細胞吞入攝取,或通過細胞膜脂相收縮時裂開的空隙進入細胞內,進入細胞的DNA僅有1%-5%可以進入細胞核中,其中僅有不到1%的DNA可以與細胞DNA整合,在細胞中進行穩定表達,基因轉導的頻率大約為10,這項技術能用于任何DNA導入
概述磷酸鈣沉淀法的應用
1、配液: 2× HBS1.63gNaCl;1.19g Hepes;0.023gNa2PO4.2H2O;加水至100ml(pH7.1),過濾,
磷酸鈣沉淀法的應用介紹
此方法對于貼壁細胞轉染是最常用并首選的方法。1、配液:2× HBS1.63gNaCl;1.19g Hepes;0.023gNa2PO4.2H2O;加水至100ml(pH7.1),過濾,
簡述磷酸鈣沉淀法的形成原理
核酸以磷酸鈣-DNA共沉淀物的形成出現時,可使DNA黏附在細胞表面,利于細胞吞入攝取,或通過細胞膜脂相收縮時裂開的空隙進入細胞內,進入細胞的DNA僅有1%-5%可以進入細胞核中,其中僅有不到1%的DNA可以與細胞DNA整合,在細胞中進行穩定表達,基因轉導的頻率大約為10,這項技術能用于任何DNA
基因轉染(磷酸鈣-DNA共沉淀法)
基因轉染技術可以應用于:基因組功能研究(基因表達調控,基因功能,信號轉導和藥物篩選研究)和基因治療研究。實驗方法原理核酸以磷酸鈣-DNA 共沉淀物的形式出現時,可使DNA 附在細胞表面,利于細胞吞入攝取,或通過細胞膜脂相收縮時裂開的空隙進入細胞內,進入細胞的DNA 僅有1%~5%可以進入細胞核中,其
基因轉染(磷酸鈣-DNA共沉淀法)
實驗材料?細胞樣品試劑、試劑盒?HBSCaCl2TEG418(新霉素G418)液G418選擇培養基儀器、耗材?培養瓶
基因轉染(磷酸鈣-DNA共沉淀法)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 核酸以磷酸鈣-DNA 共沉淀物的形式出現時,可使DNA 附在細胞表面,利于細胞吞入攝取,或通過細胞膜脂相收縮時裂開的空隙進入細胞內,進入細胞的DNA 僅有1%~5%可以進入細胞核中,其中僅有不到1%的DNA 可以與細胞D
磷酸鈣沉淀法將DNA導入細胞
實驗概要本實驗利用磷酸鈣沉淀法將DNA導入細胞。有助于了解細胞轉染技術原理和基本方法及磷酸鈣沉淀法的基本技術要點。實驗原理磷酸鈣沉淀法是基于磷酸鈣-DNA復合物的一種將DNA導入真核細胞的轉染方法,磷酸鈣被認為有利于促進外源DNA ? 與靶細胞表面的結合。磷酸鈣-DNA復合物粘附到細胞膜并通過胞飲作
磷酸鈣法的特點和應用介紹
磷酸鈣法是磷酸鈣共沉淀轉染法,因為試劑易取得,價格便宜而被廣泛用于瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將DNA和氯化鈣混合,然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣沉淀,最后把含有沉淀的混懸液加到培養的細胞上,通過細胞胞膜的內吞作用攝入DNA。磷酸鈣似乎還通過抑制血清中和細胞內的核酸酶活性而保護外源DNA免受