基于胚胎干細胞的同源重組技術??介紹
基因改造（包括敲除和敲進）小鼠已經成為現代生命科學基礎研究和藥物研發領域不可或缺的實驗動物模型，在生命科學、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用。今天呢，就給大家介紹最傳統最穩定的基因改造技術：基于胚胎干細胞的同源重組技術。Capecchi和Smithies早在在1989年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），即基因打靶（gene targeting），如果用外源抗性基因將基因上的一段重要序列替換掉，就成功將目的基因實現了基因敲除（gene knockout），利用這種ES的顯微注射就可以制作出基因敲出小鼠（KO Mice: knockout mice）;由于這一工作，Capecchi和Smithies于2007年與Evans分享了諾貝爾醫學獎。 圖片來源[1] 是不是感覺很高級？那么，問題......閱讀全文
基于胚胎干細胞的同源重組技術??介紹
基因改造（包括敲除和敲進）小鼠已經成為現代生命科學基礎研究和藥物研發領域不可或缺的實驗動物模型，在生命科學、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用。今天呢，就給大家介紹最傳統最穩定的基因改造技術：基于胚胎干細胞的同源重組技術。Capecchi和Smithies早在在1989年根據同源重組（homo
同源重組法技術介紹
同源重組法：同源重組（homologous recombination）是將外源基因定位導入受體細胞的染色體上，在該座位因有同源序列，通過單一或雙交換，新基因片段替換有缺陷的片段，達到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁組裝一Neo基因，則在同源重組后，因有Neo基因，可在含有新霉素（neomyci
同源重組技術原理
同源重組技術原理：基因敲除鼠技術是上世紀80年代中后期基于DNA同源重組的原理發展起來的，Capecchi和Smithies在1987年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），這一技術稱為
關于同源重組的基本介紹
同源重組（ homologous recombination）是指發生在兩段同源序列之間的DNA片段交換。兩段同源序列既可以完全相同，也可以存在差異，既可以位于兩個DNA分子上，也可以位于一個DNA分子中。真核生物的同源染色體交換及姐妹染色單體交換、細菌的轉導和轉化、噬菌體的重組都屬于同源重組。
關于同源重組的Holliday模型介紹
Holliday于1964年提m Holliday模型，將同源重組分為四個階段。 1．同源序列配對。 2．形成Holliday結構，即兩段同源序列的單股同源DNA的同一磷酸二酯鍵被水解，同源末端交換，連接，形成Holliday結構（HoIJiday structure，又稱Holliday連
關于同源重組的基本內容介紹
我們可以看到，同源重組一般都在染色體內仍按DNA序列的原來排列次序。但是在所謂位點特異性重組（site-specific recombination）中，DNA節段的相對位置發生了移動，從而得到不同的結果─DNA序列發生重排。位點特異性重組不依賴于DNA順序的同源性（雖然亦可有很短的同源序列），
非同源重組的概念
非同源重組指的是發生在不含同源序列的DNA序列間的重組。這可能導致染色體易位，有時會導致癌癥。
關于同源重組的雙股斷裂修復模型介紹
雙股斷裂修復模型（ double-strand break repaii。mnodel）也將同源重組分為四個階段。 1、同源序列配對。 2、形成3’端突出結構，即配對同源序列之一的DNA雙鏈水解，并由5’外切核酸酶水解，形成3'端突出結構（即3’黏端）（①~②） 3、形成Holli
同源重組的概念和過程
同源重組(Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體(non-sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化,如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
同源重組的原理是什么？
同源重組（Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體（sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化，如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等
DNA－同源重組的關鍵分子機制
蛋白質與植物基因研究國家重點實驗室研究團隊揭示 DNA 同源重組的關鍵分子機制 作為三大DNA代謝途徑（DNA 復制、重組、損傷修復）之一，DNA同源重組（Homologous Recombination）是生命體的基本生物事件。它在細胞生長、減數分裂、配子形成、物種進化、DNA雙鏈斷裂修復、
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不在自
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
【干貨】拯救你受傷的DNA-NHEJ與HR生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極
重組－DNA－技術介紹
中文名稱重組 DNA 技術英文名稱recombinant DNA technique定 義在體外將兩個或多個不同的DNA片段全部或部分構建成一個DNA分子的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
RNA為模板－首次實現植物同源重組修復
中國農業科學院作物科學研究所作物轉基因技術與應用創新團隊與美國加州大學圣地亞哥分校合作,使用核糖核苷酸（RNA）作為同源重組修復（HDR）的模板，成功獲得后代無轉基因成分的抗ALS抑制劑類除草劑水稻植株。這是在植物中首次成功利用RNA作為脫氧核糖核酸（DNA）同源重組修復模板。相關研究論文北京時
研究揭示植物調控同源重組修復的新機制
近日，華中農業大學生命科學技術學院教授嚴順平團隊在國際學術期刊PNAS在線發表成果。該研究不僅揭示了植物調控同源重組修復的新機制，也為利用同源重組修復機制提高植物基因打靶效率提供了新思路。同時，該研究還首次揭示了植物調控SOG1蛋白穩定性的機制，具有重要的科學意義。所有生物都需要把正確的遺傳信息（D
遺傳發育所解析同源重組保障的新機制
減數分裂過程中，性母細胞會主動產生DNA雙鏈斷裂（double-strand break, DSB），起始同源重組。同源重組正常發生在同源DNA之間，若在非同源DNA之間發生重組，則會導致后代基因組的紊亂。為此，生物體進化出了一套完善的體系，避免在序列相似的非同源DNA之間發生重組。但是目前對該
基因敲除技術概述（一）
1．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成
遺傳發育所在同源重組機制研究中取得進展
減數分裂是維持生物體染色體數恒定，導致遺傳重組產生的基礎。減數分裂缺陷是導致不孕、不育和出生障礙的主要原因。絕大多數減數分裂基因在不同物種中有著高度保守的功能。HEI10基因最初在人類體細胞中分離，并證明有調控細胞周期的功能。在小鼠中的研究表明，HEI10基因的突變會導致減數分裂異常并最終導致不
通過自殺質粒同源重組構建細菌突變株
自殺性質粒載體：一般用于基因突變。將突變的目的基因克隆到自殺性質粒載體上，通過接合等使其進入宿主，由于在宿主菌中不存在復制基因啟始所需的復制蛋白（如Pi蛋白等），其無法復制，在外界選擇性壓力的作用下,自殺性質粒載體所攜帶的突變基因就與宿主染色體上的野生型發生基因發生二次同源重組，產生了帶有突變的突變
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA?同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA 同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
專訪張博：兩篇Nature子刊技術論文開創同源重組新方法
2011年在我們還不是十分熟悉它的名字的時候，它被評為了當年Nature Methods雜志的年度技術，2012年在這種技術已成功應用于人類體外培養細胞、酵母、線蟲、斑馬魚、植物、大小鼠等多個領域之后，它又入選了Science十大科學突破。這就是TALEN (Transcription
基因敲除的實驗步驟
構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染色體靶位
《自然》：基因重組可制造“類胚胎干細胞”
科學家有望擺脫對卵子和晶胚的依賴，干細胞個體治療獲得希望 由于胚胎干細胞可以發展成任何種類的身體組織，因此一直受到科學家的高度重視。最近，三個獨立的科研小組的研究成果表明，對正常小鼠細胞進行基因重組改造，能夠成功制造出“胚胎干細胞”，幾乎與源于晶胚的胚胎干細胞沒有區別。這一技術有望使科學家擺脫了對
基因敲除技術的研究歷史
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的，是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞（EmbryonicStem cell，ES）是從著床前胚胎（孕3—5天）分離出的內細胞團（Inner cellmass，ICM）細胞，它具有向各種組織細胞分化的多分化
基因敲除的實驗步驟
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
基因靶向的基因敲除
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
基因敲除技術的研究進程
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的，是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞（EmbryonicStem cell，ES）是從著床前胚胎（孕3—5天）分離出的內細胞團（Inner cellmass，ICM）細胞，它具有向各種組織細胞分化的多分化