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    組織固定

    一、固定的目的和意義活體組織一旦停止血液循環和物質代謝就會因物質代謝障礙產生一系列的生物化學和組織化學改變,并導致形態學上可見的細胞器變化和細胞組織的形態改變直至腐 敗自溶。固定的目的就是要通過使用化學和物理的方法,盡可能地保存組織細胞離體時具有的生理和病理形態結構及生物化學和免疫化學成分。良好的固定是制作優秀病理切片的基礎,也是特殊染色、組織化學、免疫組織化學和組織原位分子雜交等技術方法賴以成功的基礎。因此,在病理技術工作中必須高度重視固定的質量。二、組織固定的注意事項1.及時取材:由于甲醛對組織的平均穿透速度只有0.8 mm/h,因此手術切除的送檢標本應及時切開進行取材,以便保證重要的鏡檢部位能及時地得到固定。2.及時固定:完成取材的組織塊應立即投入固定液以便盡可能地保存組織細胞的形態結構和抗原性。3.液量充分:一般情況下要求固定液的量應為組織體積的6~10倍。4.適度固定:現代固定的要求是,在良好保存組織細胞形態結構的......閱讀全文

    組織標本的處理

     取 材 取材是制作切片程序中的首要步驟,取材不當,將直接影響病理診斷和科研工作的效果。組織標本的選用非常重要,不能隨意的切取組織來制作組織切片,否則病理檢驗的結果是不會令人滿意的。一、取材工具:取材刀具必須鋒利。切取標本不應該擠壓和揉擦,不應使用有鉤鑷子或血管鉗等手術

    IHC全攻略3:固定劑的選擇

      IHC/ICC實驗中使用的所有樣本必須經過固定,以維持組織形態,并保留目的分子的抗原性。固定改變了組織的化學組成,因此往往需要在維持組織結構和保留表位之間進行折衷。細胞或組織的不完全固定(固定不足)可能造成組織內目的蛋白的快速水解,并降低了特異的免疫反應性。然而,過度的固定(固定過度)可能導致表

    IHC/ICC/IF實驗前需要知道的幾個要點~!

      IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它們都是用于定位檢測抗原表達的免疫檢測技術,由于技術相對簡單且直觀,在科研和臨床上都得到了大量使用。但是影響最終檢測效果的變量非常多;每一個具體的檢測都會遇到多個需要調整的變量。具體到選擇何種方法來保存組織樣本;固定標本該用醇還是醛;如何選擇最合適的一抗;抗

    IHC/ICC/IF實驗前需要知道的幾個要點

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    免疫組化實驗原理和步驟

      實驗原理:   抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原

    光鏡與電鏡技術--我的一點實驗心得

      一般生物體是不透明的,不能直接在顯微鏡下觀察其內部結構?        經過特殊的手段,減少體積和厚度,使光線能透過。?        基本原則:保持其原有的組織結構和相互關系。   

    顯微標本制作技術

    一、實驗原理 顯微標本的制作技術是組織學,胚胎學,生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態變化的一種主要方法。大多數的生物材料,在自然狀態下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內部結構。因為材料較厚,光線不易透過,以致不易看清其結構,另外細胞內的各個結構,由于其折射率相差很小,即

    顯微標本制作技術

    一、實驗原理 顯微標本的制作技術是組織學,胚胎學,生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態變化的一種主要方法。大多數的生物材料,在自然狀態下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內部結構。因為材料較厚,光線不易透過,以致不易看清其結構,另外細胞內的各個結構,由于其折射率相差很小,即

    免疫組化實驗原理和步驟(三)

    免疫組化技術的關鍵問題1.組織處理恰當的組織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內部因素,在組織細胞材料準備過程中,不僅要求保持組織細胞形態完整,更要保持組織細胞的抗原性不受損戒彌漫,防止組織自溶。如果出現自溶壞死的組織,抗原已經丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術,也很難檢出所

    電鏡固定(電鏡,戊二醛,灌流,多聚甲醛)

    問:做電鏡灌流,用2%多聚甲醛+2%戊二醛灌流固定,結果配成1%多聚甲醛+1%戊二醛了,這兩個濃度對電鏡的固定有影響嗎?我怕固定得不好,修完組織塊兒后放在2.5%的戊二醛里固定5小時,這樣可以嗎?答:沒問題的,我們不灌流,取完了放2.5%的戊二醛也沒問題。這個要看你做那部分組織,如果是腦組織,那么灌

    免疫組化技術規范

       歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標

    組織固定固定液的選擇

    影響標本固定的因素很多,如組織與固定液的比例、固定時間、固定溫度等;除此之外,固定液本身也很重要,若所選固定液不當,細胞內蛋白質、脂類、核 酸等成 分將會有不同程度地損失。固定劑最好隨配隨用,并注意其濃度和酸堿度。因此根據實際工作的目的,選用合適的固定液非常重要。下面是一些常用固定液的配制方

    組織和細胞的固定方法

     組織和細胞的固定方法 固定 的目的是用人為的方法盡可能使組織細胞的形態結構和化學成分保持生活狀態,防止組織細胞死后發生自溶和組織腐敗。固定還能增加組織塊硬度,使其更容易切片,使不同的結構更容易染色。 固定方法有物理固定和化學固定兩類,物理固定可采用空氣干燥(血涂片)、

    組織和細胞的固定方法

    組織和細胞的固定方法 固定 的目的是用人為的方法盡可能使組織細胞的形態結構和化學成分保持生活狀態,防止組織細胞死后發生自溶和組織腐敗。固定還能增加組織塊硬度,使其更容易切片,使不同的結構更容易染色。 固定方法有物理固定和化學固定兩類,物理固定可采用空氣干燥(血涂片)、驟冷(在液氮

    AAF固定液(酒精醋酸福爾馬林混合固定液)使用說明

    AAF固定液說明關鍵詞:固定液,緩沖液,生化溶液,喬羽生物試劑簡介: 固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質內部結構發生改變,從而使酶失活。固定劑對細胞核細胞外成分發生物

    石蠟切片制作基本技術

    石蠟切片  石蠟切片(paraffin section) 組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。教學中,光鏡下觀察切片標本多數是石蠟

    常規切片制備的注意事項(一)

    1 . 取材 取材的好壞,直接影響切片的質量。醫生在取材時,首先要有一把鋒利的取材刀,在切割組織時要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,一般厚度以0.2 ~0.3cm為適,較容易發脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結、大塊癌組織等可適當厚一點,而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等

    石蠟包埋組織DNA提取的基本方法

    石蠟包埋組織的DNA提取蠟包埋組織DNA提取的基本方法影響DNA提取質量的因素提高DNA提取質量的方法  近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和

    石蠟包埋組織的DNA提取

    近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。

    石蠟包埋組織的DNA提取方法

    近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。

    石蠟包埋組織的DNA提取及其應用

    近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。

    免疫細胞化學常用試劑介紹

    一、固定劑  大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽

    免疫細胞化學常用試劑介紹

    一、固定劑  大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽

    DNA提取方法 影響提取質量的因素 提高提取質量的方法

    一、石蠟包埋組織DNA提取的基本方法從石蠟包埋組織中提取DNA的基本步驟,是在常規DNA提取方法的基礎上改良和演變而業。Goelz等(1985)最先提出的石蠟包埋組織DNA提取技術,是用機械的方法破碎組織,切除多余的石蠟,進入含SDS和高濃度蛋白酶K(1mg/ml)的提取緩沖液加溫孵育,然后進行苯酚

    石蠟包埋組織DNA提取方法

    近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義

    免疫細胞化學常用試劑

    一、固定劑大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽類)

    免疫組化技術規范(一)

    歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標準化,

    透射電鏡超薄切片和染色實驗

    實驗方法原理 實驗步驟 1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細

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