靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異性親和素與生物素間的結合具有極高的親和力,其反應呈高度專一性。因此,BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時,并不增加非特異性干擾。而且,BAS結合特性不會因反應試劑的高度稀釋而受影響,使其在實際應用中可最大限度地降低反應試劑的非特異作用。穩定性親和素結合生物素的親和常數可為抗原-抗體反應的百萬倍,二者結合形成復合物的解離常數很小,呈不可逆反應性;而且酸、堿、變性劑、蛋白溶解酶以及有機溶劑均不影響其結合。因此,BAS在實際應用中,產物的穩定性高,從而可降低操作誤差,提高測定的精確度。普適性生物素-結合素系統的多功能性還能提供一套統一的......閱讀全文
靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異
實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原
檢測未知抗原 檢測未知抗體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。
實驗方法原理 包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液將已知的抗原作適當稀釋,于聚苯乙烯酶標板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗滌緩沖液洗3次,每次3 min。 ? 加樣:加適當稀釋的待檢樣品(未知抗體)于反應孔中,同時作空白、陰性和陽性對照孔。37 ℃
實驗方法原理親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,對生物素有非常高的親和力(結合常數高達1015M-1)。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原(
生物素-親和素系統(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素(biotin,B)
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 生物素熒光染料鏈親和素儀器、耗材 離心機搖床實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片,放入玻片盒中(每邊放6片),或故濕盒中(載玻片勿相互接觸)。?2. ?待載玻片達室濕且未干時,鋪加PBS于切片上(勿溢出玻片)。?3.
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法,在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術(immunofluorescence technique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異性親和
本法可使抗體或其它蛋白質的ε-氨基通過手臂與酰化的生物素共價結合。其后,生物素化的分子可應用酶標-親和素或熒光染料-鏈霉親和素復合物來檢測。小分子的水溶性生物素對細菌蛋白鏈霉親和素具有高度親和力是本法的設計基礎。NHSB:N-羥基琥珀酰亞胺生物素(有商品供應)0.1 mol/L 碳酸氫鈉緩沖液,pH