干細胞領軍人物Cell子刊重大突破
日本神戶理化學研究所進化生物學中心的干細胞生物學家Yoshiki Sasai近年來成為干細胞研究領域的領軍人物。Sasai曾成功地將神經干細胞誘導生成精細結構,并利用干細胞培育出視杯、大腦皮層精細組織層和初級的生成激素的垂體。布魯塞爾自由大學干細胞科學家Luc Leyns評價他的一系列論文是近年來最令人著迷的干細胞論文。 近日Sasai領導他的研究小組再度取得重大的突破性成果,成功地利用人類胚胎干細胞生成的第一個視網膜組織。相關論文發表在《細胞干細胞》(Cell stem cell)雜志上。 Sasai和同事們曾經開發出一種新型的細胞培養方法,將胚胎干細胞進行懸浮而非貼壁培養。在這樣的條件下,當給予適當的生長因子組合時,培育的胚胎干細胞會自身形成復雜的三維結構。 在去年的Nature雜志上,Sasai研究小組報告稱以這種方式培育的小鼠胚胎干細胞重演了發育機制,自動形成了稱作視杯的杯狀分層結構,這......閱讀全文
胚胎干細胞培養
Media and Solution required for ES Cell Culture?(Bowtell Lab)???Routine Culturing of ES Cells?(Bowtell Lab)??Routine Splitting and freezing of cells?(
胚胎干細胞培養技術大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干細胞培養實驗
實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)并最終分化在第5步。細胞全程培養在37℃,5%CO2,100%濕度條件下。一般體外誘導向神經細胞方向分化,也可以采用低濃度的RA進
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態 培養基 細胞復蘇 凍存細胞 明膠包被 細胞傳代 體外分化 培養基 包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片) 體外分化方法 注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
1、一般培養——保持胚胎干細胞處于未分化狀態?培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代?2 、體外分化?培養基:包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)?體外分化方法?注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的pr
胚胎干細胞所發育感光細胞可融入視網膜
據《自然—生物技術》上一項研究報告顯示,在皮氏培養皿中培養小鼠胚胎干細胞所產生的感光細胞能與患有視網膜疾病的成年小鼠的視網膜相融合。這意味著,通過細胞療法來矯正因視網膜疾病或損傷造成的失明的研究又邁進了一步。 在與年齡相關的黃斑退化和各種遺傳視網膜疾病中,視網膜的功能會因為一種被稱為“感
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(四)
第3步--ITSFn培養基在最少量培養基中選擇神經前體細胞1.在胚狀體接種在組織培養皿一天后將培養基換成ITSFn培養基2.并非所有胚狀體在這一時期都已經發生粘附,因此在移除培養基時要小心謹慎以使大部分胚狀體留在培養皿內。3.保持細胞在ITSFn中培養大約10天,根據需要更換培養基--大約每隔一天。
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(一)
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代體外分化培養基包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)體外分化方法注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的protocol,需要用專用
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(三)
ITSFn and N3(分化培養基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分裝在15ml 離心管中,(稀釋為1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm濾膜過濾,貯存在-20℃。將該溶液加入DMEM/F12中制備培養基,貯存于4℃。 貯存液??????????DMEM(高
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(二)
Geltin(明膠)包被準備500ml 0.1%geltin溶液1.將0.5 g明膠溶解在500ml無鈣鎂的PBS中(50-65℃水浴15~30分鐘)。2.最好在溶液沒有冷卻的情況下通過0.22 μm濾膜過濾,貯存在4℃。包被培養板或培養皿1.加入足量的明膠溶液覆蓋培養平面(15 cm培養皿加2ml
胚胎干細胞培養標準操作規程(SOP)
一、細胞多能性胚胎干細胞產生于小鼠胚泡1.表達綠色熒光蛋白(EGFP)的B5-ES細胞。由Dr. Nagy的實驗室制備。 2.D3-ATCC; CRL-1934. 我們得到時大約傳了17代。 3.J1-由Dr. Jaenish的實驗室友情提供。我們得到時大約傳了7-9代。 4.J1rtTA-r
小鼠胚胎干細胞培養實驗——體外分化法
小鼠胚胎干細胞培養可以:(1)細胞保種;(2)用于干細胞研究;(3)用于細胞生理學、形態學等研究;(4)動物克隆。實驗方法原理胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)并最終分化在第5步
一種新的人胚胎干細胞培養方法
為了能夠適用于醫學移植,人類胚胎干細胞(hESCs)需要保持一種“未分化”狀態,即它們沒有變換成其他類型的細胞。為了確定培養hESCs的最好方法能使它們保持未分化狀態,也能生長、增殖和存活,研究人員經常使用動物來源的血細胞“飼養層”,通常來自于小鼠(小鼠胚胎成纖維細胞MEFs)。然而,這種方法存
干細胞領軍人物Cell子刊重大突破
日本神戶理化學研究所進化生物學中心的干細胞生物學家Yoshiki Sasai近年來成為干細胞研究領域的領軍人物。Sasai曾成功地將神經干細胞誘導生成精細結構,并利用干細胞培育出視杯、大腦皮層精細組織層和初級的生成激素的垂體。布魯塞爾自由大學干細胞科學家Luc Leyns評價他的一系列論
干細胞領軍人物Cell子刊重大突破
日本神戶理化學研究所進化生物學中心的干細胞生物學家Yoshiki Sasai近年來成為干細胞研究領域的領軍人物。Sasai曾成功地將神經干細胞誘導生成精細結構,并利用干細胞培育出視杯、大腦皮層精細組織層和初級的生成激素的垂體。布魯塞爾自由大學干細胞科學家Luc Leyns評價他的一系列論
歐陽宏偉小組實現用胚胎干細胞培養修復肌腱
后腿膝蓋部髕肌腱斷裂的小白鼠,通過植入從胚胎干細胞分階段分化而來的肌腱后,又恢復了正常的活動能力。浙江大學醫學院歐陽宏偉教授帶領課題組完成的這項研究成果,為應用胚胎干細胞治療肌腱等軟組織損傷提出了一條現實的實現途徑。相關論文近日發表在目前干細胞領域最高影響因子的雜志《干細胞》(STEM CELL
科學家利用胚胎干細胞培養出“體外卵泡”
在繁殖過程中,卵泡為卵母細胞提供了一個充滿液體的囊性生殖環境,并提供生殖細胞所需的減數分裂和生長信號。近年來,使用多能干細胞重建生殖細胞發育即體外配子技術,已在哺乳動物物種(包括小鼠和人類)中得到應用。在小鼠中從多能干細胞衍生的原始生殖細胞樣細胞 (PGCLC)培育出功能性卵母細胞,這對于應用于
科學家利用胚胎干細胞培養出“體外卵泡”
在繁殖過程中,卵泡為卵母細胞提供了一個充滿液體的囊性生殖環境,并提供生殖細胞所需的減數分裂和生長信號。近年來,使用多能干細胞重建生殖細胞發育即體外配子技術,已在哺乳動物物種(包括小鼠和人類)中得到應用。在小鼠中從多能干細胞衍生的原始生殖細胞樣細胞 (PGCLC)培育出功能性卵母細胞,這對于應用于
科學家首次利用胚胎干細胞培養出人造精子
將為治療男性不育帶來希望,同時也存在巨大的道德和倫理爭議 據國外媒體報道,英國科學家首次利用人類胚胎干細胞造出人造精子,這將為治療男性不育癥帶來希望,不過這一最新成果也帶來了巨大的道德和倫理爭議。 醫學專家估計這項最新科學成就可能最早在5年內就會被用于體外受精診所,屆時可以
protocol:小鼠胚胎干細胞培養實驗方法和操作步驟1
1、一般培養:保持胚胎干細胞處于未分化狀態培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代2 、體外分化培養基包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)體外分化方法注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的protocol,
protocol:小鼠胚胎干細胞培養實驗方法和操作步驟3
體外分化方法第1步:ES培養基在LIF存在的條件下維持細胞培養第2步:EB培養基使用細菌培養皿去除LIF后胚狀體的形成需要4天。1、分散純化細胞(參見上面的細胞傳代部分)2、純化 2小時后將細胞轉入含有ES培養基的50ml Falcon管中,計數細胞取適量體積放入15ml管中離心3分鐘。3、用2ml
protocol:小鼠胚胎干細胞培養實驗方法和操作步驟2
體外向心肌細胞方向分化胚胎干細胞在體外去除LIF情況下會自然向心肌細胞方向分化,小鼠的R1系一般在第7-8天自然出現搏動的心肌細胞,與胚胎發育時間線是完全一致的。培養基:EB 配制一20×不含DMEM,FBS,LIF的溶液(該溶液也能用于ES培養基--見前述)。分裝在50ml 離心管中,(稀釋為
英國干細胞療法助幾近失明的眼睛恢復視力
英國兩名“濕性”老年性黃斑變性患者接受胚胎干細胞療法治療,原本幾近失明的眼睛恢復視力,能夠視物、閱讀,為治療這種常見眼疾帶來希望。 干細胞 (2).jpg 黃斑是視網膜的重要區域。“濕性”老年性黃斑變性患者的視網膜色素上皮細胞因血管滲漏受損,造成視力模糊不清,嚴重時失明。 英國
英國干細胞療法助幾近失明的眼睛恢復視力
英國兩名“濕性”老年性黃斑變性患者接受胚胎干細胞療法治療,原本幾近失明的眼睛恢復視力,能夠視物、閱讀,為治療這種常見眼疾帶來希望。 黃斑是視網膜的重要區域。“濕性”老年性黃斑變性患者的視網膜色素上皮細胞因血管滲漏受損,造成視力模糊不清,嚴重時失明。 英國穆爾菲爾德眼科醫院利用人體胚胎干
英國干細胞療法助幾近失明的眼睛恢復視力
英國兩名“濕性”老年性黃斑變性患者接受胚胎干細胞療法治療,原本幾近失明的眼睛恢復視力,能夠視物、閱讀,為治療這種常見眼疾帶來希望。 黃斑是視網膜的重要區域。“濕性”老年性黃斑變性患者的視網膜色素上皮細胞因血管滲漏受損,造成視力模糊不清,嚴重時失明。 英國穆爾菲爾德眼科醫院利用人體胚胎
胚胎干細胞培養有新法-軟凝膠基質代替硬培養皿
據美國每日科學網12月19日報道,美國研究人員發現,利用軟凝膠基質代替硬培養皿來培養小鼠胚胎干細胞,無需添加昂貴的生長因子,便可讓干細胞培養物長時間維持同質的多能狀態。研究人員表示,這一技術在未來的再生醫學中有著巨大的應用前景。相關論文發表在《公共科學圖書館?綜合》雜志上。 干
笹井芳樹:培養皿中長出視網膜
視網膜 科學家已經可以誘導干細胞形成視網膜,這為很多眼疾患者帶來希望。 在子宮里,一團相同的細胞分化成各種不同的模樣,最終形成高度有序的結構,組裝成人體的全副器官。這個過程依照內在的“生物學藍圖”有條不紊地進行,引導組織產生折疊、皺褶,精確形成適當的外形和大小。 科學家很熟悉這個由簡單到復雜的
一種利用多能干細胞部分恢復視網膜功能的新方法
眼睛中的光感受器退化是導致視力下降的主要原因之一,最終可能導致失明,目前尚無有效治療方法。近期,杜克-新加坡國立大學醫學院與卡羅林斯卡學院等機構的研究人員開發了一種新方法,能夠促進人類胚胎干細胞(hESCs)分化為感光祖細胞,將這些細胞移植到實驗模型中可以部分恢復視網膜功能。研究成果發表在《Mo