免疫學技術:鐵蛋白免疫電鏡技術
一、 原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。二、材料與試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必須特別清潔,配制后放置4℃數天,以不出現沉淀為準。如出現沉淀XC的多聚體形成,應重配。5.0.30Mol/L pH 9.5硼鹽酸緩沖液6.0.1Mol/L硫酸銨液7.0.05Mol/L pH 7.4 PBS液三、操作方法1.鐵蛋白的提取① 配制2%硫酸銨液,并以1Mol/L的NaOH或HCl調pH值,正好為5.85。取1g鐵蛋白溶于100ml的2%硫酸銨液中。② 加入20%硫酸鎘,使最終濃度為5%,混勻,4℃過夜。③ 1 500g離心(4℃)2h,去上清。仍加2%硫......閱讀全文
免疫學技術:鐵蛋白免疫電鏡技術
一、 原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。二、材料與試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將
鐵蛋白免疫電鏡技術
(一)??原理?免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。(二)材料與試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸鹽
鐵蛋白免疫電鏡技術
一、 原理 免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。 二、材料與試劑 1.馬脾鐵蛋白 2.硫酸銨 3.硫酸鎘 4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5
免疫鐵蛋白電鏡技術
1.基本原理 鐵蛋白的分子量460kD,為一種含鐵(約占23%)的蛋白質。直徑10―12nm。目前常用的間接免疫染色技術是應用低分子量的雙功能試劑將第二抗體與鐵蛋白相連,制備標記抗體。此復合物既保留了抗體的免疫活性,又因鐵蛋白含有2000―3000個鐵原子的致密鐵離子核心,形成四個圓形致密區,所以
免疫學技術專題:非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素,通過一系統的非標記抗體的免疫學反應,對組織中的
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。主要試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。主要試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
免疫電鏡技術
近年來,免疫學方法與電鏡技術相結合,形成了一種免疫電鏡技術(Immunoelec-tronmicroscopy,IEM),使抗原定位達到了亞細胞水平。該技術由以下環節組成:(一) 組織準備 用于免疫電鏡檢測的組織多種多樣,所以各自在組織制備時都具有其特點。一般講,組織力新鮮并進行無活動力狀態處理,例
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物,在不改變抗原抗體的免疫反應特異性,亦不降低酶活性條件下,與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫鐵蛋白技術
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術,鐵蛋白免疫電鏡技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。主要試劑1. 馬脾鐵蛋白2. 硫酸銨3. 硫酸鎘4. 雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫鐵蛋白技術
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術,鐵蛋白免疫電鏡技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。主要試劑1. 馬脾鐵蛋白2. 硫酸銨3. 硫酸鎘4. 雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫鐵蛋白技術
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
鐵蛋白免疫電鏡技術原理、材料試劑和操作方法
(一) 原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。(二)材料與試劑1.馬脾鐵蛋白2.硫酸銨3.硫酸鎘4.雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante ,XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸鹽緩沖液
免疫電鏡相關技術實驗—病毒顆粒免疫電鏡技術
病毒是極微小的生物體,用電鏡觀察時,由于其變形、損傷或雜質的存在,以及標本中病毒的數量有限,只靠其形態特點較難確切辨認。為了提高辨認的準確性,可應用特異性抗體,使其與病毒結合,在電鏡下可清晰地辨認特異性抗體及其結合的病毒。這種將免疫學檢測方法應用于電鏡檢查的技術就是免疫電鏡技術 (Immunoele
免疫鐵蛋白技術的技術特點
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
免疫鐵蛋白技術的技術特點
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
鐵蛋白免疫電鏡實驗
鐵蛋白免疫可應用于:(1)檢測抗原;(2)定位細胞內鐵蛋白抗體位置。實驗方法原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。實驗材料馬脾鐵蛋白試劑、試劑盒硫酸銨硫酸鎘雙異氰酸鎘二甲苯硼鹽酸緩沖液硫酸銨液?PBS蒸餾水儀器、耗材
鐵蛋白免疫電鏡實驗
實驗方法原理 免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體,再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查,觀察到鐵蛋白抗體所在的位置,即抗原所在。實驗材料 馬脾鐵蛋白試劑、試劑盒 硫酸銨硫酸鎘雙異氰酸鎘二甲苯硼鹽酸緩沖液硫酸銨液 PBS蒸餾水儀器、耗材 離心機顯微鏡微孔濾膜實驗步驟 一、材料與試劑準備?1. ?馬
酶免疫電鏡技術
(一)??原理?酶免疫電鏡技術是利用酶的高效率的催化作用對其底物的反應形成不同的電子密度,借助于電子顯微鏡觀察,證明酶的存在,從而對抗原進行定位。(二)材料與試劑1.PBS液? 取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1 000ml即可。2.DAB溶液? 取5m
免疫細胞電鏡技術
免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻,但由于光學分辨率的限制,不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此,Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法,為在細胞超微結構水平研究抗原?抗體反應提供了可能。在此基礎上,相繼發展了雜交抗
掃描免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了掃描免疫電鏡技術的具體操作步驟,掃描免疫電鏡技術可為研究細胞或組織表面的三維結構與抗原組成的關系提供可能性。實驗原理免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物,是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類:一類是免疫凝集電鏡技術,即采用抗原抗體凝集
掃描免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了掃描免疫電鏡技術的具體操作步驟,掃描免疫電鏡技術可為研究細胞或組織表面的三維結構與抗原組成的關系提供可能性。實驗原理免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物,是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類:一類是免疫凝集電鏡技術,即采用抗原抗體凝集
免疫電鏡相關技術實驗——膠體金標記免疫電鏡技術
實驗材料病毒試劑、試劑盒膠體金儀器、耗材電子顯微鏡實驗步驟免疫膠體金標記技術又稱免疫金染色技術 (immunogold staining technique), 是 Faulk 和Taylor 于 1971 年發現直徑為 5~50nm 的膠體金 (colloidal gold) 在電鏡下具有很高的電
免疫電鏡相關技術實驗
實驗方法原理 該方法是用電鏡直接觀察病毒抗原與相應抗體結合后形成的大分子復合物。實驗材料 病毒試劑、試劑盒 抗體儀器、耗材 電子顯微鏡實驗步驟 直接將病毒抗原與對應抗體孵育后上電子顯微鏡觀察即可。具有簡單易行,抗原和抗體用量少在該時間內即可得到結果等優點,可用于檢出病毒或進行病毒分型,并已用于臨床診
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗原理?冷凍蝕刻法(Freeze Ftching),也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture),是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是將樣品在液氮中冷凍,然后放到真空噴鍍儀中切斷,切斷后的切面上有細胞器,其間還有凍成洋的水分。再加熱使冰升華
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了冷凍蝕刻免疫電鏡技術,包括:冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術和斷裂—標記免疫電鏡技術。實驗原理冷凍蝕刻法(Freeze Ftching),也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture),是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是
免疫學實驗免疫濁度技術介紹
免疫濁度技術介紹: 免疫濁度技術早期主要用于血清、尿和腦脊液中蛋白質含量的測定。免疫濁度技術是利用可溶性抗原、抗體在液相中特異結合,形成一定大小的抗原抗體復合物,使反應液出現濁度。當反應液中保持抗體過剩時,形成的復合物隨抗原量增加而增加,反應液的濁度亦隨之增加,與一系列的標準品對照,即可計算出
免疫鐵蛋白技術的技術特點和原理
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
免疫鐵蛋白技術的定義
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
免疫鐵蛋白技術的定義
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接,利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)