含尿嘧啶的單鏈噬菌體M13DNA制備實驗
試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 乙醇 氯化鈉 苯酚 醋酸鈉 TE 瓊脂糖凝膠 原始的重組 M13 噬菌體 單鏈 DNA YT 培養基 儀器、耗材 Corex 離心機管 巴斯德滴管 柱層析樹脂 大腸桿菌菌株 CJ236 大腸桿菌菌株 TG1 JM109 或相當的菌株 實驗步驟 ......閱讀全文
含尿嘧啶的單鏈噬菌體－M13－DNA－制備實驗
試劑、試劑盒 緩沖液和溶液乙醇氯化鈉苯酚醋酸鈉TE瓊脂糖凝膠原始的重組 M13 噬菌體單鏈 DNAYT 培養基儀器、耗材 Corex 離心機管巴斯德滴管柱層析樹脂大腸桿菌菌株 CJ236大腸桿菌菌株 TG1JM109 或相當的菌株實驗步驟 材料緩沖液和溶液各種貯存液，緩沖液和試劑成分請參閱附錄 1。
含尿嘧啶的單鏈噬菌體－M13－DNA－制備實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 乙醇 氯化鈉 苯酚 醋酸鈉 TE 瓊脂糖凝膠 原始的重組 M13 噬菌體
含尿嘧啶的單鏈噬菌體－M13－DNA－制備實驗
經典的 Kunfcel 寡核苷酸指導的誘變方法利用大腸桿菌中的尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (glycosylase) 特異地篩除去含尿嘧啶堿基的 DNA 的選擇性作用（請參考寡核苷酸誘變信息欄）。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒緩
M13噬菌體
·?????????M13 Phage?(Michael Blaber)Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phag
M13噬菌體鋪平板
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。
M13噬菌體鋪平板
M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆
M13噬菌體鋪平板
實驗方法原理 M13 噬菌斑是由單個病毒感染單個細菌后形成的。子代病毒顆粒感染鄰近細菌, 然后又產生下一代病毒顆粒，細菌在半固體培養基（如含瓊脂或瓊脂糖）上生長時，子代病毒顆粒的擴散受到一定限制。實驗材料 M13 噬菌體原種噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株制備的主培養物試劑、試劑盒 IPTG 溶液
M13噬菌體與其他噬菌體相比的優點
噬菌體展示技術的應用中，M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點？M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體，它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟，只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開。而其他用于噬菌體展
重組M13噬菌體克隆分析
在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌
M13噬菌體載體的克隆
實驗方法原理 雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。而且，當用“正向”或“反向”通用測序引物進行 DNA
M13噬菌體載體的克隆
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。
M13噬菌體載體的克隆
雖然理論上 M13 重組噬菌體所能攜帶的外源 DNA 片段沒有限制，但實際上是有限的：長片段的外源 DNA 比短片段的更易發生缺失和重排。因此如果可能，最好克隆至 M13 噬菌體的 DNA 片段不要大于 1000 堿基。而且，當用“正向”或“反向”通用測序引物進行 DNA 測序時，大片段的中心區域可
概述M13噬菌體的－構建
單鏈 DNA 的酶切和連接是比較困難的，因此 M13 噬菌體在用作載體時是利用其雙鏈 RF DNA。RF DNA 很容易從感染細胞中純化出來，可以象質粒一樣進行操作，并可通過轉化方法再次導入細胞。 （1）載體的插入位點 在 M13 噬菌體基因組中絕大多數為必需基因，只有兩個間隔區可用來插入外
M13噬菌體液體培養
M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌體原種通常采
重組M13噬菌體克隆分析
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。 實驗材料
重組M13噬菌體克隆分析
實驗方法原理 在本方案中，當外源 DNA 大于 200~300 個核苷酸時，用重組 M13 噬菌體克隆感染細菌后釋放至周圍培養基中的單鏈 DNA 進行凝膠電泳分析即可鑒定。實驗材料 重組 M13 噬菌體單鏈 DNAM13 噬菌體重組噬菌斑M13 噬菌體非重組載體噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株試劑
M13噬菌體液體培養
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。
M13噬菌體液體培養
實驗方法原理 M13 噬菌體原種通常采用液體培養，感染細胞并不裂解而是緩慢生長形成稀懸液。接種幾乎總是用一個新挑取的噬菌斑或單個噬菌斑獲得的噬菌體顆粒懸液。感染細胞含 200 拷貝以上雙鏈 RF DNA，每代分泌數百個噬菌體顆粒。實驗材料 M13 噬菌斑大腸桿菌 F' 菌株儀器、耗材 LB
M13噬菌體載體的構建
在IS區內插入LacZ基因 ⑵在標記基因區內組裝MCS區段所以能通過a互補在X-Gal/ IPTG平板上識別重組體。這類載體包括了 M13mp8、9 和 M13mp18 、 19等這類載體的突出優點在于其既可以提供單鏈DNA，也可以提供雙鏈的DNA。其最大的不足在于插入大的DNA片段后表現不穩定，在
絲狀噬菌體M13噬菌體的生物學特性
⑴是單鏈閉合環狀噬菌體只能感染雄性細菌，外形成絲狀，基因組DNA長約6.4kb，可分為10個區和507 bp基因間隔區（IS區），該區可以接受外源DNA的插入而不會影響到噬菌體的活力。這是該噬菌體能用于單鏈DNA載體的重要前提。⑵復制與增殖（圖）
M13－噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技
M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 羧芐青霉素 氯霉素 大腸桿菌 CJ2
M13噬菌體衍生載體的制備實驗
載體衍生法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 質粒 試劑、試劑盒
M13噬菌體單鏈DNA的制備
M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌
關于M13噬菌體的優缺點介紹
1、優點 （1）有MCS，便于克隆不同的酶切片段。 （2）Xgal顯色反應，可供直接選擇。 （3）無包裝限制，克隆能力大。 （4）可以克隆雙鏈DNA分子中的每一條鏈（子代M13噬菌體中包含的是單鏈+DNA）。 2、缺點 （1）插入外源DNA后，遺傳穩定性顯著下降。 （2）實際克隆能
M13噬菌體單鏈DNA的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。
M13噬菌體單鏈DNA的制備
實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。實驗材料 M13 單鏈噬菌體載體感染 M13 噬菌體的大腸桿菌培養物未感染的大腸桿菌的培養
關于M13噬菌體載體的基本介紹
M13噬菌體是一類特異的雄性大腸埃希菌噬菌體，基因組為一長度6.4kb的且彼此同源性很高的單鏈閉環DNA分子。只感染雄性大腸埃希菌，但M13噬菌體DNA可以轉傳導進入雌性大腸埃希菌。M13子代噬菌體通過細胞壁擠出，并不殺死細菌，但細菌生長速度緩慢。 該類噬菌體作為克隆載體，可以通過質粒提取技術
M13噬菌體衍生載體的制備實驗
實驗材料?質粒試劑、試劑盒?YT培養基儀器、耗材?離心機分光光度計搖床實驗步驟 1.? 將來自一個單菌落的過夜培蕎新鮮菌液按1 ：50稀釋，在含有適當抗生素的2×YT培養液（1~5 ml）中，于37℃培養至OD600=0.1。2.? 按1，10，20，50 MOI感染細胞，于37℃劇烈振蕩下培養4.
來自噬菌體的驚喜——－M13－Antibody－(HRP)
前言2018年10月諾貝爾化學獎的一半頒發給了美國科學家George P. Smith和英國科學家Gregory P. Winter, 兩人獲獎的原因是多肽和抗體的噬菌體展示技術。噬菌體展示技術在生物醫藥研發中有著十分廣泛的應用，是生物新藥研發的源頭技術，M13噬菌體則被廣泛地應用于噬菌體展示技
關于M13噬菌體的宿主菌的介紹
由于 M13 噬菌體通過 F 質粒編碼的性纖毛進入宿主細胞內，故只能用雄性細菌來增殖病毒。 Messing 及其同事已經構建了許多攜帶 F' 質粒并便于 M13 載體進行基因操作的多種大腸桿菌菌株，其中最重要的遺傳標志有： （1） lacZ D Ml5 lacZ 基因缺失突變體。 （