蛋白質印跡實驗——從SDS凝膠上轉移蛋白質
蛋白質印跡（protein blotting ) 也稱為電泳轉移（electropheretic transfer)，即把從電泳或層析分離的蛋白轉移到固定基質上的過程。固定基質通常是一些紙或膜。最通常的蛋白質印跡是將從聚丙烯酰胺凝膠電泳上分離的蛋白質分子轉移到硝化纖維素膜上。本實驗來源「蛋白質電泳實驗技術」主編：郭堯君。試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟1. 溶液配置(1) 連續緩沖系統甘氨酸 39 mmol/L；Tris 48 mmol/L；SDS 0.0375% ( W/V)；甲醇 20% (V/V)。溶液均需用雙蒸水配置。這個緩沖系統可用作陽極緩沖液，也可用作陰極緩沖液。(2) 不連續緩沖系統陽極緩沖液Ⅰ：0.3 mol/L Tris，pH 10.4，20% 甲醇。陽極緩沖液Ⅱ：25 mmoI/L Tris，pH 10.4，20% 甲醇。陰極緩沖液：4 mmol/L 6-氨基-n-己酸，pH 7.6，20% 甲醇......閱讀全文
蛋白質印跡實驗——從SDS凝膠上轉移蛋白質
蛋白質印跡（protein blotting ) 也稱為電泳轉移（electropheretic transfer)，即把從電泳或層析分離的蛋白轉移到固定基質上的過程。固定基質通常是一些紙或膜。最通常的蛋白質印跡是將從聚丙烯酰胺凝膠電泳上分離的蛋白質分子轉移到硝化纖維素膜上。本實驗來源「蛋白質電泳實
蛋白質印跡實驗——從瓊脂糖凝膠上轉移蛋白質
試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟1. 溶液配置不連續緩沖系統陽極緩沖液Ⅰ：0.3 mol/L Tris，pH 10.4。陽極緩沖液Ⅱ：25 mmol/L Tris，pH 10.4。陰極緩沖液：40 mmol/L 6-氨基-n-己酸，pH 7.6。2. 轉移單元的組成SDS 凝膠轉移單元的
蛋白質印跡實驗——從等電聚焦凝膠上轉移蛋白
試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟1. 溶液配置不連續緩沖系統陽極緩沖液Ⅰ：0.3 mol/L Tris，pH 10.4。陽極緩沖液Ⅱ：0.1 mol/L Tris，pH 10.4。陰極緩沖液：0.1 mol/L 精氨酸，0.01% ( W/V）SDS，pH 10.5。SDS 的存在有利于
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 Tris·ClSDS儀器、耗材 電泳儀離心機真空泵實驗步驟 1. ?按廠商的使用指南用兩塊干凈的玻璃平板和0.75 mm 墊片組裝電泳裝置中的玻璃平板夾層，并固定在灌膠支架上2. ?配置分離膠液體并脫氣，然后加10%的過硫酸銨和TEMED，輕輕攪拌混勻。3. ?用一根巴
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗
Laemmli凝膠電泳法 無尿素條件下用Tris緩沖液分離多肽 連續SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 超薄凝膠的灌制和電泳 均一濃度的微型凝膠電泳 制備多塊梯度膠 ? ? ?
蛋白質印跡實驗
試劑、試劑盒?甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟 1. 溶液配置(1) 連續緩沖系統甘氨酸 39 mmol/L；Tris 48 mmol/L；SDS 0.0375% ( W/V)；甲醇 20% (V/V)。溶液均需用雙蒸水配置。這個緩沖系統可用作陽極緩沖液，也可用作陰極緩沖液。(2) 不連續緩沖系統陽
蛋白質印跡實驗
從SDS凝膠上轉移蛋白質 從瓊脂糖凝膠上轉移蛋白質 從等電聚焦凝膠上轉移蛋白 檢測 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒
方案14－電印跡膜上的蛋白質消化實驗
實驗材料含有電泳分離的目標蛋白質的凝膠試劑、試劑盒乙酸胺黑（Amido Black)10B染料（0.1%)的水溶液 乙酸 甲醇消化緩沖液NaOH麗春紅S染料PVP-40儀器、耗材電印記裝置小離心管硝酸纖維膜或 PVDF 膜RP-HPLC 層析柱實驗步驟一、電印跡和染蛋白1.將蛋白質電印跡到硝酸纖維膜
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗——Laemmli凝膠電泳法
電泳可用于分離復雜的蛋白質混合物，研究蛋白質的亞基組成以及證實蛋白質的均一性等，還能純化出蛋白質用于后續的研究工作。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中，凝膠的孔徑，蛋白質的電荷、大小、性質等因素共同決定了蛋白質的電泳遷移率。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒Tris·ClSDS儀器、耗材電泳儀離心機真空泵實驗步驟1.
蛋白質免疫印跡實驗
實驗步驟 操作流程(1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張 (Whatman 3 MM)。(2) 將凝膠在轉印緩沖液中浸泡 30m in，將轉移膜、濾紙和海綿墊也在同樣的緩沖液浸濕。(3) 安裝轉印「夾心三明治」。將凝膠放置在玻璃平板上，然后將一張浸濕的濾紙放在凝膠上，如
蛋白質印跡實驗——檢測
試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟電泳轉移后，小心地從固定化材料上剝離凝膠。如果有小塊凝膠留在膜上，用雙蒸水洗，然后用濕的軟棉花擦去凝膠，殘留在膜上的凝膠會導致染色后在膜上出現 “白點”。膜可以貯存，也可以立即染色或用其他方式檢測。大部分用于電泳的染色方法都可用于膜。主要的限制是背景染色。
蛋白質免疫印跡實驗
這是一個建立在 B urnette 實驗方案基礎上的實驗流程，小于 80k D a 的蛋白質的轉移效果很好并且結果穩定, 重復性好。應用這種膜轉移方法，我們利用多克隆抗體在下面的樣本中檢測目的蛋白：哺乳動物細胞和細菌溶解產物、細胞培養上清、組織提取物以及組織液。雖然下列實驗條件是根據我們自己的實驗需
蛋白質免疫印跡實驗
蛋白質免疫印跡實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 操作流程 (1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗——超薄凝膠的灌制和電泳
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒乙醇儀器、耗材電泳儀墊片樣品梳實驗步驟1. ?用水性實驗室去污劑徹底洗擦制膠用玻璃平板，接著用熱水、去離子水、95%乙酵依次沖洗，晾干。?2. ?用粘膠棒在玻璃平板的底部邊緣擦上一道粘痕，快速地將Gel Bond 膠片以疏水面向下放在平板上，隔著kimswipe紙巾用力壓，
蛋白質單向SDS凝膠電泳實驗——連續SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
電泳可用于分離復雜的蛋白質混合物，研究蛋白質的亞基組成以及證實蛋白質的均一性等，還能純化出蛋白質用于后續的研究工作。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中，凝膠的孔徑，蛋白質的電荷、大小、性質等因素共同決定了蛋白質的電泳遷移率。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS磷酸儀器、耗材電泳儀離心機實驗步驟1. ?按“Laemm
蛋白質印跡(westernblot)
實驗原理印跡法一般由凝膠電泳；樣品的印跡和固定化；各種靈敏的檢測手段如抗體、抗原反應等三大實驗部分組成。生物大分子凝膠電泳分離 蛋白質印跡法的第一步一般是將蛋白質進行SDS聚丙烯酰胺平板凝膠電泳，使待測蛋白質在電泳中按相對分子質量大小在板狀膠上排列。2.分子區帶的轉移和固定 第二步就是反凝膠電泳已分
蛋白質的SDSPAGE實驗
實驗材料蛋白質溶液團粒狀細胞蛋白試劑、試劑盒4X濃縮膠緩沖4X分離膠緩沖10X電泳緩沖液2XSDS-PAGE上樣緩沖液正丁醇甲醇SDS儲存液儀器、耗材離心機電泳裝置凝膠上樣吸頭玻璃板加熱器實驗步驟一、灌制平板膠1.清洗玻璃板。a.將玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b.自來水
蛋白質印跡法SDS－PAGE電泳的相關介紹
1、清洗玻璃板 一只手扣緊玻璃板，另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。兩面都擦洗過后用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。 2、灌膠與上樣 （1）玻璃板對齊后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠（操作時要使兩玻璃對齊，以免漏膠）。 （2） 按前面方法配10%分離膠，加入TEMED后立
定量蛋白質斑點印跡實驗
試劑、試劑盒 鼠抗-σ32 單克隆抗體辣根過氧化酶共價標記的羊抗鼠免疫球蛋白 GECLTM#1 和#2 試劑十二烷基肌氨酸鈉Tris-緩沖鹽溶液儀器、耗材 硝酸纖維素膜斑點印跡裝置ECLTMHYPERFILM或柯達 X 光底片緩沖液 A實驗步驟 材料與設備樣品，由各步純化操作所得硝酸纖維素膜 (0.
量蛋白質斑點印跡實驗
蛋白質印跡法，它是用免疫學方法來測量某一蛋白質的量。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒鼠抗-σ32 單克隆抗體辣根過氧化酶共價標記的羊抗鼠免疫球蛋白 GECLTM#1 和#2 試劑十二烷基肌氨酸鈉Tris-緩沖鹽溶液儀器、耗材硝酸纖維素膜斑點印跡裝置ECLTMHYPER
定量蛋白質斑點印跡實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 鼠抗-σ32 單克隆抗體 辣根過氧化酶共價標記的羊抗鼠免疫球蛋白 G ECLTM#1 和#2 試劑 十二烷基肌氨酸鈉 Tris-緩沖鹽溶液
免疫印跡與免疫檢測實驗——轉移槽轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟1. ?制備抗原樣品，并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白，在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后，拆卸凝膠夾層，去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 min。3
蛋白質印跡與探測(Western－Blot)實驗原理、方法與步驟（1）
【實驗原理】Western Blot（蛋白質印跡或免疫印跡）技術，以蛋白質為檢測對象，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。實驗采用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）將樣品蛋白質分離，再轉移到固相載體（PVDF尼龍膜或NC膜）上；固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且保持電泳分離的多肽類型及其生物學活
固相化－pH－梯度雙向凝膠電泳實驗15
方案15 雙向凝膠的半干印跡實驗實驗方法原理當 “ 三明治”結構中的濾紙浸透緩沖液時，半干印跡轉移設備能將蛋白質從凝膠轉移到膜上。和槽式印跡轉移設備相比，半干印跡只用較少的緩沖液；因為電極板靠得很近，故轉移時只要求較低的電壓。實驗材料含有蛋白質樣品的凝膠試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材印跡紙支持性纖
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗——均一濃度的微型凝膠電泳
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒電泳緩沖液儀器、耗材電泳儀梳子注射器夾子實驗步驟1. ?按順序安裝帶凹口的小玻璃平板或小矩形玻璃平板、0.75 mm 墊片、大矩形玻璃平板疊放在一起組裝成夾層，并確保夾層放入多膠灌制裝置后，墊片能安放妥當，兩頭均與玻璃平板的上下邊緣對齊。?2. ?將凝膠夾層緊密地安放在多板
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗——制備多塊梯度膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TEMED丙烯酰胺儀器、耗材離心管電泳儀實驗步驟1. ?如灌制均一濃度凝膠一樣在多板凝膠灌制裝置中組裝好微型膠夾層。?2. ?如圖一、安裝好30 ml 梯度發生器、磁力攪拌器、蠕動泵（可選用）和聚乙烯Tygon管，梯度發生器的輸出端連接于制膠室下方的輸入口。圖一3. ?配制
印跡轉移電泳
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southren創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southren印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
轉移電泳技術介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southern印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
瓊脂糖的轉移電泳的基本內容
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southern印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Nort
瓊脂糖轉移電泳的相關介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交,但瓊脂糖不適合于進行雜交操作,1975年,Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上,再進行雜交的方法,被稱為Southern印跡法。隨后,Alwine等將類似方法用于RNA印跡,被戲稱為Nort