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  • 抗原的制備方法

    實驗步驟一、抗原的提取 抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中,如鹽析、有機溶劑抽提、層析和結晶等;②把混合物置于單一物相中,通過物理力場的作用使各組分分配于不同的區域而達到分離的目的,如電泳、超速離心和超濾等。由于組織細胞內存著許多分子結構和理化性質不同的抗原物質,其分離方法也不一樣,就是同一類大分子物質,因選材不同,所使用的方法也很大差別。因此很難有一個通用的標準方法供提取任何生物活性物質使用,所以在提取前必須針對所欲提取的物質,充分查閱文獻資料,選用合適的方法。如果要提取一個結構及性質未知的抗原物質,更需要經過各種方法的比較探索,才能找到一些工作規律和獲得預期的效果。 抗原物質的制備,大......閱讀全文

    抗原制備

    不管是制備單抗還是多抗,抗原的設計與制備都是一個非常重要的問題,設計或者制備得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗體來。一個良好的抗原必須具體的條件:(1)分子足夠大。對于多肽或蛋白質類的抗原來說,一個抗原決定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8個氨基酸殘基組成。而平均每5-10kD才有一個表位

    抗原的制備方法

    實驗概要除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。實驗步驟一、抗原的提取  

    抗原的制備2

     2.核酸的分離純化  從細胞中提取核酸后,仍混雜著蛋白質、多糖和各種大小分子核酸同類物。除去這些“雜質”的過程,也就是核酸提純過程。在核酸的分離純化時,為防止核酸大分子的變性降解,必須在0~4℃的低溫條件下操作。核酸酶的水解作用,是過去制備具有活性核酸大分子的嚴重障礙,現普遍采用加入去污劑或加入E

    抗原的制備1

    抗原的制備  除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。  一、抗原的提取 

    抗原的制備方法

    抗原的制備  除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。  一、抗原的提取 

    抗原的制備方法

    實驗步驟一、抗原的提取抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中,如

    抗原的制備方法

    實驗步驟一、抗原的提取  抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中

    抗原的制備方法2

    表2-1 室溫下由S1提高到S2時每升加固體硫酸銨的克數  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00?0 55 113 114 175 209 242 278 3

    若想提供抗原制備抗體,需要提供多少抗原?

    ① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是凍干粉。② 如果抗原是蛋白,建議您提供3-5mg濃度為1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的緩沖液和蛋白濃度。對于需要做親和純化的項目,需要額外提供3-4mg蛋白用于親和純化。 該量

    ICC用細胞抗原的制備

    一、材料和試劑1、0.01M PBS(pH7.4): NaCl 8.0g; KCl 0.2g; Na2HPO4 1.44g; KH2PO4??0.24g; ddH2O至1000ml ; 高壓滅菌,分裝。2、0.25%胰酶:稱取EDTA 0.02g? ?NaCl? ?0.8g??KCl??0.04g?

    酶標記抗體或抗原的制備

      標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。  1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑  (1)一步法:連接AP。  ①優點:操作簡便、有效,重復性好。  ②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小

    抗原與免疫血清的制備

    實驗方法原理 動物產生抗體的量,一方面可因動物的種類、年齡、營養狀況及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面還與抗原的種類、注射量、注射途徑、注射次數以及注射的間隔時間有關。抗原量低到一定限度時,抗體不能產生或用現有方法不能測出,但超過最高限度對抗體的產生反起抑制作用。在最低限度以上,抗體根據抗原量

    酶標記抗體或抗原的制備

    標記方法應符合:技術方法簡單、產率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交聯法:同源雙功能交聯劑(1)一步法:連接AP。?①優點:操作簡便、有效,重復性好。②缺點:交聯時分子間比例不嚴格,大小不一,影響效果。(

    皮膚試驗的條件和抗原制備

    首先應當制備試驗用抗原,如有合格商品可直接購買。可以作為變應原的物質種類繁多,例如動物皮毛、家禽羽毛、鴿糞、昆蟲、螨類、真菌、花粉、雜草、物理粉塵和各種食品等都可能成為變應原。不同抗原的制備方法不同,但一般包括以下幾個步驟:①收集原料;②粉碎與勻漿;③脫脂與提取;④過濾與分離;⑤分裝保存。分裝保存之

    大腸桿菌O抗原,傷寒桿菌O抗原等的制備

    大腸菌群并非細菌學分類命名,而是衛生細菌領域的用語,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌,這些細菌在生化及血清學方面并非完全一致,其定義為:需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克

    抗原和免疫血清的制備實驗——抗菌血清的制備

    抗體是機體接受抗原刺激后產生的一種具有免疫特異性的球蛋白。在免疫學實踐,為制備抗體常以抗原性物質(細菌、病毒、類毒素、血清及其他蛋白質)給動物注射。經過一定時間后,動物血清中可以產生大量的特異性抗體。這種含有特異性抗體的血清稱為免疫血清。實驗材料家兔試劑、試劑盒普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀

    抗原與免疫血清的制備實驗

    將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。

    抗原與免疫血清的制備實驗

    將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。實

    抗原和免疫血清的制備實驗

    實驗材料 家兔試劑、試劑盒 普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀器、耗材 標準比濁管離心機實驗步驟 1. 抗原的制備:標準菌株的選擇:所用的菌種傷寒桿菌H901和傷寒桿菌O901應具有典型形態菌落及生化反應。在生理鹽水中不發生自身凝集,與特異血清有高度凝集者可作為菌種。2. 菌液的制備(1)原液制

    可溶性抗原的制備及鑒定1

    蛋白質、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補體、脂多糖、細菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原,它們有相當部分來源于組織和細胞,成分復雜。制備這類免疫原時,首先須將組織和細胞破碎,然后再從組織和細胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原,提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。?一、組織勻漿的制備?用于制備免疫原的材料必須是新鮮或低

    抗原呈遞細胞的選擇和制備

    實驗步驟基本方案 過 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 備 腹 腔 巨 噬 細 胞材 料單核細胞增多性利斯特氏菌無 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(見 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培養基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V

    固相合成法制備抗原肽環肽

    1.1? 儀器與試劑多肽合成儀(CS536,美國CSBio公司),半制備型高效液相色譜儀(Waters Delta Prep4000,美國Waters公司),分析型高效液相色譜儀(Agilent 1100,美國Agilent公司),冷凍干燥機(Christ Alpha,德國Christ公司)

    抗原免疫動物制備血清,常用動物有哪些

    抗原免疫動物制備血清,常用動物有哪些抗原注射進入動物體內后,因為不是一個單獨的分子,會隨血液循環輸送到各處,也就會接觸不同的免疫細胞。有些還會被抗原提呈細胞再加工。所以最后的結果是很多個免疫細胞都會接觸到。一個抗原分子也有很多抗原表位。每個表位理論上都有能力激活一個B細胞轉化為漿細胞。所以體內最后針

    可溶性抗原的制備及鑒定2

    1、超速離心法?此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內,達到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質有蔗糖、甘油、CsCl等。?用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時,除個別成分外,極難將某一抗原成分分離出來,故只用于少數大分子抗原的分

    人工抗原的制備是什么樣的

    半抗原與載體蛋白的耦聯物稱之為人工抗原。載體不僅是簡單地增加半抗原的分子質量,更重要的是利用其強的免疫原性誘導機體產生免疫應答,對半抗原發生載體效應的作用。蛋白質結構越復雜,免疫原性越好。常用的載體蛋白有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、兔血清白蛋白(RSA)、人血清白蛋白(HSA)、人γ

    半抗原性免疫原的制備

    半抗原指只具有抗原性而無免疫原性的物質。多見于分子量小于4000的有機物質。半抗原與載體相結合具有免疫原性。(一)載體1.?蛋白質:以牛血白蛋白最常見。2.?多肽聚合物:常用多聚賴氨酸。3.?大分子聚合物和某些顆粒。(二)半抗原與載體的連接方法1.?物理方法:通過電荷和微孔吸附半抗原。2.?化學方法

    抗原和免疫血清制備實驗—抗紅細胞抗體(溶血素)制備

    實驗材料家兔試劑、試劑盒紅細胞懸液生理鹽水阿氏液儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1.? 紅細胞懸液的制備(1) 采血采取的綿羊血與滅菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存數周,也可用抗凝方法(2) 洗滌血球先將抗凝血液離心沉淀(2000 cpm×5分鐘)吸去上清。加入2~3倍的生理鹽水并用毛細滴管反復吹

    抗原和免疫血清的制備實驗——抗人血清抗體的制備

    實驗材料家兔試劑、試劑盒羊毛脂石蠟油卡介苗生理鹽水儀器、耗材研缽離心機培養箱實驗步驟1. ?弗氏佐劑的制備將羊毛脂與石蠟油按1:5比例混合,高壓滅菌。2. ?人血清—弗氏完全的制備將滅菌佐劑一份置研缽中,邊研磨邊滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳劑,研磨要充分,使乳劑滴入冰水中

    細胞表面抗原染色的組織樣本制備方法

    該方法適用于新鮮和冷凍標本1.將組織(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用緩沖液或培養液浸濕。2.用1ml緩沖液或培養液預洗Medicon?二遍。3.將組織和1ml緩沖液或培養液放入到Medicon中,蓋上蓋子,將Medicon?插入到Medimachine中。4.降解組織。降解組織的時間長短依

    抗原呈遞細胞的選擇和制備(一)

    基本方案 過 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 備 腹 腔 巨 噬 細 胞材 料單核細胞增多性利斯特氏菌無 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(見 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培養基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V ) 臺

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