二甲基亞砜是一種重要的滲透型細胞保護劑。在深低溫(零下200度)保存細胞時凍存過程中,為防止細胞內液冰晶形成、滲透壓改變、細胞結構紊亂等導致的損傷,有必要使用含有DMSO冷凍保護劑。DMSO能夠快速穿透細胞膜進入細胞中,降低冰點、延緩凍存過程,同時提高細胞內離子濃度,減少細胞內冰晶的形成,從而減少細胞損傷。深低溫時二甲基亞砜的細胞毒性受到抑制。復蘇時動作要快,盡快洗掉二甲基亞砜,否則會造成對細胞嚴重的毒性。二甲基亞砜(DMSO)是最好的細胞凍存保護劑,但也是一種以細胞毒性很大的化學試驗劑。研究結果表明,培養液中DMSO濃度為10%時,細胞生長抑制率近100%;1‰濃度時抑制率為35%,即使是0.04‰的濃度,DMSO對細胞的生長也有不利的影響。......閱讀全文
產品描述: STEM-CELLBANKER ?是GMP下生產的ES細胞和iPS細胞專用凍存液 產品特點是化學成分清晰,無動物源成分,專門針對ES細胞和iPS細胞特點設計的細胞凍存液。STEM-CELLBANKER ?是完全無血清和動物源性成分的,所有成分完全滿足歐洲藥典或美國藥典的要求,是
含DMSO的凍存液DMSO是最常用的滲透性冷凍保護劑,廣泛應用于細胞的冷凍保存。在細胞水平,DMSO除了是一種DNA致畸因子外,還可滲入細胞內,分子中S=O鍵可能與細胞內蛋白發生化學反應,致使蛋白變性。因此,有些細胞和組織細胞對DMSO敏感,使用含DMSO的細胞冷凍液會降低細胞復蘇后活性,進而影響細
在細胞培養中,細胞凍存是最關鍵環節之一,尤其在細胞治療、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據降溫速度區分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術要
在細胞培養中,細胞凍存是最關鍵環節之一,尤其在細胞治療、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據降溫速度區分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術要
細胞凍存是將細胞儲存在低溫環境中,減少細胞代謝,實現長期儲存的一種技術。在大多數細胞系中,細胞會隨著衰老和演化不斷的積累改變,造成表型和基因型的“培養漂移”,在凍存過程中,適當的操作和合適的凍存條件可以減少細胞特性的改變或丟失,起到細胞保種的作用。因而,正確且成功的凍存對于細胞的長久應用起著非常重要
細胞凍存和復蘇 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存
細胞凍存和復蘇 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存
細胞凍存和復蘇可以:(1)用于生物學保種;(2)用于醫學上干細胞研究;(3)用于傳代培養。實驗方法原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減
建樣本庫的基本原則是安全、準確、便捷。其中安全包括樣本生物安全、樣本信息安全、設備運行安全;準確包括樣本信息準確、樣本存放取出位置準確;便捷包括工作流程便捷、軟件系統操作便捷、信息交流便捷、硬件軟件耗材供應及技術支持便捷。 樣本庫通常由基礎設施、凍存設備、凍存耗材
⑵-1400C凍存設備(液氮氣相和深冷冰箱):液氮氣相和深冷冰箱是實現-1400C長期樣品儲存的常用設備。這兩種方法因為不存在液氮進入樣本內的風險,因而儲藏期間沒有樣本間交叉感染的危險。深冷冰箱是相對較新的一種設備,從近幾年的客戶使用反饋來看,在滿載樣品的情況下能夠實現-140~-1500C的穩定環
(二)細胞融合 1.細胞融合前準備 (1)骨髓瘤細胞系的選擇:骨髓瘤細胞應和免疫動物屬于同一品系,這樣雜交融合率高,也便于接種雜交瘤在同一品系小鼠腹腔內產生大量McAb。常用的骨髓瘤細胞系見表2-4。表2-4用于融合試驗的主要骨髓瘤細胞系名 稱來 源耐 受 藥 物Ig鏈H LP3/X63-Ag
細胞凍存和復蘇應用領域(1)用于生物學保種;(2)用于醫學上干細胞研究;(3)用于傳代培養。細胞凍存和復蘇原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細
凍存細胞的復蘇可以用于:(1)在細胞的實驗操作中,凍存的細胞要進行復蘇,再培養傳代。(2)持久地保留細胞系實驗方法原理凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套,因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮,而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。實驗材料凍存細胞試劑
檢測抗體的方法應根據抗原的性質、抗體的類型不同,選擇不同的篩選方法,一般以快速、簡便、特異、敏感的方法為原則。 常用的方法有: 1. ELISA用于可溶性抗原蛋白質、細胞和病毒等McAb的檢測。 2. RIA用于可溶性抗原、細胞McAb的檢測。 3. FACS熒光激活細胞分類儀用于檢查細胞
實驗方法原理 凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套,因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮,而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。
玻璃化凍存技術——成功解決活腫瘤組織凍存復蘇難題,助力活腫瘤樣本庫建設和腫瘤精準治療玻璃化凍存技術成功突破了活腫瘤組織凍存復蘇后存活率低的難題,使得凍存的腫瘤細胞可長期保存腫瘤組織活性,組織復蘇后可維持與新鮮腫瘤組織幾乎相同的形態特征和功能。1、活腫瘤組織樣本庫的意義活體組織特別是活腫瘤組織,具有重
實驗方法原理1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單
1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單克隆抗體包括動物免疫
淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨
實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤
科幻電影中將凍存若干年的生命體重新解凍復活的情節在生命科學研究過程中每一天都在上演。為了將每一種有生命的細胞較好的保存其原有的細胞特性或者長久的保存種質資源,實驗人員往往將細胞用特殊配置的細胞凍存液保存于-196℃ 的液氮,使得細胞暫時脫離生長狀態,等到
一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環境,在無菌、適當溫度和一定的營養條件下,生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞
2. HAT選擇雜交瘤 一般在融合24 小時后,加HAT選擇培養液。HT和HAT均有商品化試劑50×貯存,用時1 ml加入50 ml20 %小牛血清完全培養液中。 因為在培養板內已加入飼養細胞、融合后的細胞,200 μl/孔。所以在加選擇培養液時應加3倍量的HAT。我
實驗方法原理 凍存細胞應在流水中快速融化并加入生長培養液。實驗者應配戴護目鏡和手套,因為曾浸沒在液氮中的凍存管中可能漏人液氮,而當融化凍存液時凍存管中的氣體溫度上升可導致爆炸。實驗步驟 1) 調整水龍頭溫度為 40°C,在龍頭下放置一廣口燒杯。2) 從液氮中取出凍存細胞的凍存管。3) 將凍存管置于
細胞低溫冷凍貯存是細胞室的常規工作。細胞凍存與細胞傳代保存相比可以減少人力、經費,減少污染,減少細胞生物學特性變化。一、凍存和復蘇的原則:慢凍快融當細胞冷到零度以下,可以產生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶;相
原位分子雜交選實驗技術服務,還在上海斯信。您的選擇,就是對我們公司的肯定。相信斯信,相信自己,我們有太多優勢,讓您在眾多信息流中獨具慧眼的找到我們。一,斯信的服務與態度公司的宗旨是以更高的品質、更低的價格、更快的供貨、更優質的服務的“四更”要求為國內廣大科研實驗工作者提供更為完善的產品供應渠道和售后
一)準備和安裝過濾器 清洗好過濾器,干燥,放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜,用布包裝好,15磅20 min進行高壓滅菌處理。 在超凈臺內打開過濾器架好,膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中,出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用泵過濾,過濾后要檢查濾膜是否完好無損。
復蘇技術1. 細胞復蘇的原則在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。2. 細胞復蘇的主要操作步驟(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。(2)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動
藥用輔料一般是指在生物制劑配方中包含的非活性成分,雖然是非活性成分,但藥用輔料往往具備賦形,成型,增溶,助溶等作用,甚至會影響藥效,藥品質量和安全性等方面。所以,藥用輔料在整個制藥過程一直受到各制藥企業的重視。藥用輔料同時需要達到較高的標準才可在生產中使用,如高純度,低內毒素,符合多國藥典標準,以及
導讀在前幾期我們為大家介紹了藥物溶解的各種配方及策略,其中不被推薦的DMSO也作為助溶劑占有一席之地,然而卻頗受爭議。這個被FDA限制使用,廣傳毒性很大的溶劑,究竟毒性有多大,我們在實驗中如何使用?今天我們就為大家揭曉,“萬能溶劑”的DMSO,在細胞和動物實驗中的正確使用方法。DMSO簡介二甲基亞砜