高效液相色譜知識（一）
一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationary phase)發生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國植物學家茨維特（Tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時發現的，色譜法(Chromatography)因之得名。后來在此基礎上發展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法......閱讀全文
高效液相色譜知識（一）
一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationary phase)發生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法
高效液相色譜知識（二）
正相色譜法 采用極性固定相（如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相）；流動相為相對非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環已烷），常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用于分離中等極性和極性較強的化合物（如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等）。反相色譜法 一般用非極性固定相（如C18、C8
高效液相色譜之高效反相液相色譜（一）
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色
高效液相色譜之高效反相液相色譜（二）
附：色譜柱操作說明，（以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例）1. 色譜柱常規參數訂貨號：Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品專利號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如，Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
高效液相色譜之高效排阻液相色譜
高效液相色譜（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高壓、高速、近代液相色譜，通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法，到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面，現已成為分離純化蛋白質非常有效的方
液相色譜制備基礎知識（一）
制備液相色譜基礎知識一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是：溶于流動相( phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationary phase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用，存放時，柱內應充滿溶劑，兩端封死(如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器，當使用緩沖溶液時，要用水沖洗進樣口，同時搬動進樣閥數次，每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100，
液相色譜小知識
高效液相經常使用粒徑5um?的色譜柱，用過一段時間后，柱壓會略有升高，尤其是做中藥。常用來洗色譜柱的溶劑為甲醇，當色譜柱用甲醇洗過之后，再用含乙腈的流動相平衡，會使柱壓迅速升高，色譜柱滴漏，這是由于甲醇和乙腈匯合產生局部高壓。因此，這種情況下，應慢慢升高流速，可以從0.6ml/min開始，一步步的平
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用，存放時，柱內應充滿溶劑，兩端封死(如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器，當使用緩沖溶液時，要用水沖洗進樣口，同時搬動進樣閥數次，每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100，
高效液相色譜原理
采用高效液相色譜（HPLC）法分離單糖和寡糖，較多采用氨基柱，乙腈和水作為流動相，此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法分離測