免疫熒光組織（細胞）化學技術基本原理
免疫熒光組織化學是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素，熒光素受激發光的照射，由低能態進入高能態，而高能態的電子是不穩定的，以輻射光量子的形式釋放能量后，再回到原來的低能態，這時發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色)，利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質和定位，以及利用定量技術測定含量。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學分直接法、間接法和補體法。 1、直接法 （1） 檢查抗原方法 這是最簡便、快速的方法，用已知特異性抗體與熒光素結合，制成特異性熒光抗體，直接用于細胞或組織抗原的檢查。此法特異性強，常用于腎穿刺，皮膚活檢和病原體檢查......閱讀全文
免疫熒光組織（細胞）化學技術基本原理
免疫熒光組織化學是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素，熒光素受激發光的照射，由低能態進入高能態，而高能態的電子是不穩定的，以輻射光量子的形式釋放能量后，
免疫熒光組織（細胞）化學技術：如何設置對照（直接...
免疫熒光組織（細胞）化學技術：如何設置對照（直接法、間接法為了保證免疫熒光組織化學染色的準確性，排除某些非特異性染色，必須在初次試驗時設置對照：?1、直接法?（1）標本自發熒光對照?標本只加PBS或緩沖甘油封片，熒光顯微鏡觀察組織內如果有熒光，稱為自發熒光。 （2）抑制試驗 ? 可分為一
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法：直接法基本原理?將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低；而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。?試劑與儀器?磷酸鹽
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法
一、其它熒光抗體染色方法1、膜抗原熒光抗體染色法本法應用直接法或間接法的原理和步驟，可對活細胞在試管內進行染色，常用于T和B細胞、細胞培養物、瘤細胞抗原和受體等的檢查和研究，陽性熒光主要在細胞膜上。FACS即采用此法原理。2、雙重染色法在同一標本上有兩個抗原需要同時顯示（如A抗原和B抗原），A抗原的
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法：直接法基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低；而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。 試劑與儀器 磷酸鹽
免疫熒光組織（細胞）化學技術發展簡史和概述
一、免疫熒光組織（細胞）化學技術的發展簡史免疫熒光組織化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一，是由Coons和他的同事(1941)建立，免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞（或組織）化學。它與葡萄球菌A蛋白（SPA）、生物素與卵白素、植物血凝素（ConA等）相結合拓寬了領域；與激光技
免疫熒光細胞化學技術
免疫熒光細胞化學技術免疫熒光細胞化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一，是由Coons等（1950）建立，經過近43年的發展，免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞（或組織）化學。它與親合化學技術如葡萄球菌A蛋白（SPA）、生物素與卵白素、植物血凝素（ConA等）相結合拓寬了領域；與激
免疫熒光組織（細胞）化學的操作流程
一、原理與意義免疫熒光組織（細胞）化學染色方法——直接法，是一種熒光抗體染色法。該方法比較簡單，適合做細菌、螺旋體、原蟲、真菌及濃度較高的蛋白質抗原如腎、皮膚的檢查和研究。此法每種熒光抗體只能檢查一種相應的抗原，特異性高而敏感性較低。二、操作流程1、染色：切片經固定后，滴加經稀釋至染色效價如1：8或
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...-2
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗體的方法 2P3（2）Chadwick氏法?試劑和材料：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸鹽緩沖鹽水、1%硫柳汞、離心機及離心管、三角燒瓶(25 ml)、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、燒杯(500 ml
免疫熒光組織（細胞）化學技術：熒光抗體的質量控制
1、染色特異性和敏感性的測定方法?（1）特異性染色和效價測定?直接染色法中效價以倍比稀釋如1：2、1：4、1：8……，與相應抗原標本作一系列染色，熒光強度在“+++”的最大稀釋度，為其染色滴度（效價）或單位。實際染色時，可取低一個或兩個稀釋度（即2~4個單位），如染色效價為1：64，實際應用時可取1