RNAi技術的應用
5 RNAi技術的應用5.1 功能基因組和遺傳學應用隨著各種模式生物和人類基因組測序的完成，基因功能的研究遠遠落后于大量序列所提供的信息，研究和發現基因功能成為越來越緊迫的任務。長期以來，破壞基因結構或抑制基因表達是研究基因功能的重要方法，如常用的基因敲除技術( gene knock out) 。基因敲除技術要求對所研究的基因序列要有詳細的認識 比較費時費力。自RNAi 現象發現后，因其操作簡單、特異性高、能迅速而方便地使某個基因失去功能等優點 獲得了生物學家的青睞而首先被應用于功能基因組和反向遺傳學的研究。RNAi 技術還具有一個優勢 能同時封閉多個基因或基因家族 用于研究mRNA 差別剪接形成的異構體[22 ]；甚至在基因組水平上構建針對基因組的RNAi 表達載體[23 ,24 ] ，用于研究基因之間的相互作用和進行基因功能的高通量篩查。相對于基因敲除技術可破壞基因的完整性，RNAi 技術僅僅使基因表達暫時降低，基因組的信息......閱讀全文
RNAi技術的應用
5 RNAi技術的應用5.1 功能基因組和遺傳學應用隨著各種模式生物和人類基因組測序的完成，基因功能的研究遠遠落后于大量序列所提供的信息，研究和發現基因功能成為越來越緊迫的任務。長期以來，破壞基因結構或抑制基因表達是研究基因功能的重要方法，如常用的基因敲除技術( gene knock out) 。基
RNAi技術的應用特點
由于使用RNAi技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達，（長度超過三十的dsRNA會引起干擾素毒性）所以該技術已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療領域。
RNAi技術
?DNA芯片檢測siRNA專一性? 長片斷的雙鏈RNA ?(dsRNA)?導入例如植物，真菌，果蠅，線蟲等生物的細胞中會引發同源mRNA的降解——這就是所謂的RNA interference ?(RNAi)。RNAi分兩個步驟，首先是長片斷雙鏈dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25個堿基的sm
RNAi干擾技術及應用進展研究（四）
3.5?轉基因研究在動植物的轉基因試驗中，?經常發生基因沉默。因此，?對轉基因沉默機制的探索可以為在轉基因研究中避免基因沉默提供對策。在轉基因植物研究中避免基因沉默可提高試驗成功率，且節省時間，而在大型動物轉基因研究中避免基因沉默可節約成本，提高產率。?3.6?干細胞研究在干細胞研究方面，在dsRN
RNAi干擾技術及應用進展研究（二）
1.2?RNAi的作用特點?(1)“共抑制”性。RNAi是雙鏈RNA介導的轉錄后基因沉默機制，它的啟動子相當活躍，外源基因可以轉錄，但不能正常積累mRNA；RNAi作用不僅使外源基因在轉錄后水平上失活，同時誘導與其同源的內源基因沉默。 (2) 高效性。試驗證明雙鏈RNA干擾mRNA?翻譯的效率比
RNAi干擾技術及應用進展研究（三）
3.2?基因治療及藥物篩選探索由于RNAi是針對轉錄后階段的基因沉默，相對于傳統基因治療對基因水平上的敲除，整個流程設計更簡便，且作用迅速，效果明顯，為基因治療開辟了新的途徑。 其總體思路是通過加強關鍵基因的RNAi機制，控制疾病中出現異常的蛋白合成進程或外源致病核酸的復制及表達。尤其針對引起一
RNAi干擾技術及應用進展研究（一）
RNAi是Napoli?CD等在試圖向紫色矮牽牛花轉導色素合成基因，用以增加其花色時發現的。結果出乎預料，轉基因的植株不僅沒有新基因的表達，反而自身的色素合成也減弱了，一些轉基因的花出現了全白色或部分白色。他們把這種導入的基因未表達和植物本身合成色素基因的失活現象命名為共抑制(cosuppressi
RNAi技術在功能基因組中的應用
在功能基因組研究中，需要對特定基因進行功能喪失或降低突變，以確定其功能。由于RNAi具有高度的序列專一性，可以特異地使特定基因沉默，獲得功能喪失或降低突變，因此RNAi可以作為一種強有力的研究工具，用于功能基因組的研究。將功能未知的基因的編碼區（外顯子）或啟動子區，以反向重復的方式由同一啟動子控制表
RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的
RNAi的機理與應用（二）
首先，外源的或體內產生的長雙鏈 RNA(long double stranded RNA, dsRNA) 首先被 Dicer 酶降解為長 21 ～ 23bp （堿基對）長度的小分子雙鏈 RNA （稱為小干擾核酸， small interfering RNA, siRNA), 這是一個依賴 A
RNAi的機理與應用（一）
關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。RNAi 受到追捧的原因主要有兩個方面，一方面， RNAi 可以說是基
使用RNAi技術治療腫瘤病
腫瘤病的治療腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果，傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長，而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性，設計針對這一區段序列的dsRNA分子，只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現，也可以同時注
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post tran
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
核糖核酸干擾技術(RNAi技術)介紹
轉錄后基因沉默（PTGS， post- transcriptional gene silencing）-最初被認為僅限于矮牽牛花和其它一些植物中的奇異現象，是目前分子生物學研究中一個最熱門的話題。過去幾年中，科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中，在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中
RNAi在植物學中的應用
Napoli等將1個查爾酮合成酶基因（chs）置于1個強啟動子后導人矮牽牛（Petunia hybrida），試圖加深花朵的紫顏色。結果部分花的顏色并非期待中的深紫色，而是形成了花斑狀甚至白色，而且這種性狀可以遺傳。因為導入的基因和其同源的內源基因同時都被抑制，他們將這種現象命名為共抑制（co-su
RNAi在細胞培養中的應用
The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size
Dharmacon文庫在RNAi文庫篩選的應用
1.什么是文庫？――大幅提高研究效率的利器以往的實驗室研究中，無論是尋找新基因的功能、探索已知基因致病的機制、解析復雜信號通路網絡、探索疾病發生發展的機制，藥物敏感性測試或者是尋找藥物開發的新靶點，科研工作者們往往是圍繞著潛在的單個目標基因進行改造，包括針對該基因的過表達、沉默、敲除、激活、修飾、突
《Nature》子刊：RNAi療法新應用
這項研究由麻省大學醫學院Anastasia Khvorova和Melissa Moore博士以及貝斯以色列女執事醫學中心和哈佛醫學院的Ananath Karumanchi醫學博士領導，提示RNA干擾療法可能是治療先兆子癇的一種潛在策略。Ananath KarumanchiMelissa Moor
RNAi技術專有名詞(2)
21.Homologous Chromosome：同源染色體一對染色體，分別來自父本和母本，染色體上有著相同的線性基因序列。 22.Recombinant Clone：重組克隆將不同來源的DNA片段合成在一個DNA分子中，這種技術稱為重組，得到的分子為重組克隆。 23.Ribonucleic
RNAi技術專有名詞(1)
1.RNAi：（RNA interference）RNA干擾 一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達，促使mRNA降解，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型，稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi，也譯作RNA干預或者干涉）。它也是體內抵御外在感染的一種重要保護機
反義技術——RNA干擾（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在整形外科領域的應用前景
已證實N-Ras或BRAF的激活型突變是引發黑素瘤的主要病因，其中66%的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80%的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變為腺嘌呤造成第599位的纈氨酸突變為谷氨酸所致。使用RNAi技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在整形外科領域的應用前景
已證實N-Ras或BRAF的激活型突變是引發黑素瘤的主要病因，其中66%的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80%的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變為腺嘌呤造成第599位的纈氨酸突變為谷氨酸所致。使用RNAi技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用